| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 文献综述 | 第12-24页 |
| 第一章 卵泡颗粒细胞与细胞永生化研究进展 | 第12-21页 |
| ·卵泡颗粒细胞 | 第12-14页 |
| ·颗粒细胞在卵泡发育中的作用 | 第12-13页 |
| ·颗粒细胞的分泌功能 | 第13-14页 |
| ·卵泡颗粒细胞凋亡 | 第14-16页 |
| ·雌激素 | 第14页 |
| ·胰岛素样生长因子(IGF) | 第14页 |
| ·消耗细胞生长因子引起的凋亡 | 第14-15页 |
| ·FAS配合基和FAS系统 | 第15页 |
| ·肿瘤坏死因子-α(TNF-α) | 第15-16页 |
| ·BCL2家族成员(线粒体介导的凋亡) | 第16页 |
| ·端粒与端粒酶 | 第16-17页 |
| ·端粒的结构与功能 | 第16-17页 |
| ·端粒酶的结构与功能 | 第17页 |
| ·细胞永生化 | 第17-21页 |
| ·细胞衰老 | 第17-18页 |
| ·细胞危机 | 第18页 |
| ·细胞永生化的方法 | 第18-19页 |
| ·端粒酶对细胞永生化的作用与优势 | 第19-21页 |
| 第二章 凋亡诱导因子研究进展 | 第21-24页 |
| ·凋亡诱导因子的研究概况 | 第21-22页 |
| ·AIF在细胞程序性死亡中的作用 | 第21-22页 |
| ·AIF在凋亡细胞中致死作用的调控 | 第22页 |
| ·凋亡细胞中线粒体释放AIF的调控 | 第22-23页 |
| ·凋亡诱导因子在细胞存活、增殖和新陈代谢中的作用 | 第23-24页 |
| 试验研究 | 第24-56页 |
| 第三章 永生化山羊卵泡颗粒细胞系的建立 | 第24-41页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-30页 |
| ·山羊卵巢的采集 | 第24页 |
| ·卵泡颗粒细胞的分离与培养 | 第24-25页 |
| ·pCI-neo-hTERT转染山羊卵泡颗粒细胞 | 第25-26页 |
| ·hTERT-GGCs生物学鉴定 | 第26-30页 |
| ·结果 | 第30-38页 |
| ·山羊卵泡颗粒细胞的分离培养 | 第30-31页 |
| ·pCI-neo-hTERT的鉴定 | 第31页 |
| ·新霉素(G418)最佳筛选浓度确定 | 第31-32页 |
| ·阳性细胞扩大培养 | 第32页 |
| ·hTERT-GGCs形态学观察 | 第32页 |
| ·hTERT基因表达鉴定 | 第32-34页 |
| ·检测甾体类激素合成相关基因的表达 | 第34页 |
| ·hTERT-GGCs增值活力和细胞周期检测 | 第34-35页 |
| ·hTERT-GGCs甾体类激素合成水平的检测 | 第35-37页 |
| ·软琼脂试验 | 第37页 |
| ·hTERT-GGCs核型分析 | 第37-38页 |
| ·hTERT-GGCs端粒长度检测 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-41页 |
| 第四章 凋亡诱导因子在山羊卵泡颗粒细胞凋亡中的作用 | 第41-56页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·实验中涉及的细胞 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-48页 |
| ·山羊卵巢组织包埋、切片 | 第41-42页 |
| ·免疫组织化学定位AIF | 第42页 |
| ·山羊有腔卵泡的剥离和颗粒细胞的收集 | 第42页 |
| ·细胞全蛋白的提取 | 第42-43页 |
| ·Western Blot分析 | 第43页 |
| ·山羊AIF基因shRNA慢病毒载体构建 | 第43-46页 |
| ·慢病毒的包装 | 第46-48页 |
| ·结果 | 第48-54页 |
| ·AIF在山羊卵巢的定位 | 第48页 |
| ·AIF在颗粒细胞的表达水平 | 第48-49页 |
| ·慢病毒干扰载体PCR鉴定 | 第49-50页 |
| ·慢病毒包装质粒鉴定 | 第50-51页 |
| ·慢病毒包装与滴度检测 | 第51-52页 |
| ·有效干扰片段的筛选 | 第52-53页 |
| ·AIFshRNA对hTERT-GGCs饥饿诱导的凋亡的影响 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-68页 |
| 缩略词 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |