| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-20页 |
| ·香蕉束顶病毒概述 | 第9-12页 |
| ·香蕉束顶病毒及其引起的病害 | 第9-10页 |
| ·香蕉束顶病毒分子生物学研究进展 | 第10-12页 |
| ·核穿梭蛋白NSP的研究进展 | 第12-14页 |
| ·植物病毒编码的NSP蛋白研究概述 | 第12-13页 |
| ·BBTV DNA6编码蛋白的研究 | 第13页 |
| ·NSP蛋白的生物学意义 | 第13-14页 |
| ·蛋白互作技术在植物病毒研究中的应用 | 第14-18页 |
| ·酵母双杂交原理及在植物病毒研究中的应用 | 第14-16页 |
| ·双分子荧光互补技术原理及在植物病毒研究中的应用 | 第16-17页 |
| ·免疫共沉淀技术原理及在植物病毒研究中的应用 | 第17-18页 |
| ·本研究目的意义 | 第18-19页 |
| ·本研究技术路线 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-37页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·菌株与质粒 | 第20页 |
| ·表达载体 | 第20-21页 |
| ·酶及生化试剂 | 第21-22页 |
| ·仪器设备 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-37页 |
| ·引物设计 | 第22-24页 |
| ·PCR扩增 | 第24页 |
| ·PCR产物变性退火 | 第24-25页 |
| ·连接产物胶回收 | 第25页 |
| ·诱饵载体的构建 | 第25-27页 |
| ·酵母双杂交报告菌株Y2HGold的表型鉴定 | 第27页 |
| ·Y2HGold酵母感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·诱饵质粒转化酵母感受态细胞 | 第28页 |
| ·菌落PCR鉴定 | 第28-29页 |
| ·诱饵质粒的自激活活性检测 | 第29页 |
| ·诱饵质粒对Y2H Gold酵母菌的毒性检测 | 第29页 |
| ·激活域载体的构建 | 第29-30页 |
| ·酵母双杂交报告菌株Y187的表型鉴定 | 第30页 |
| ·Y187酵母感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·激活域质粒转化酵母感受态细胞 | 第30页 |
| ·菌落PCR鉴定 | 第30页 |
| ·激活域质粒的自激活活性检测 | 第30页 |
| ·激活域质粒对Y187酵母菌的毒性检测 | 第30页 |
| ·含诱饵质粒的Y2H与含激活域质粒的Y187菌株杂交 | 第30-31页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第31页 |
| ·阳性酵母质粒的提取 | 第31-32页 |
| ·阳性酵母质粒回转大肠杆菌验证 | 第32页 |
| ·阳性克隆的测序 | 第32页 |
| ·双分子荧光互补载体的构建 | 第32-34页 |
| ·农杆菌EHA105感受态的制备 | 第34-35页 |
| ·重组质粒DNA转化农杆菌EHA105 | 第35页 |
| ·注射烟草 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-49页 |
| ·BBTV基因组份的克隆 | 第37页 |
| ·诱饵载体pGBKT7-DNA1/DNA2/DNA3/DNA4/DNA5/DNA6的构建及鉴定 | 第37-38页 |
| ·激活域载体pGADT7-DNA1/DNA2/DNA3/DNA4/DNA5/DNA6的构建及鉴定 | 第38-39页 |
| ·诱饵载体毒性及自激活活性检测 | 第39-40页 |
| ·激活域载体毒性及自激活活性检测 | 第40-42页 |
| ·酵母双杂交阳性克隆筛选 | 第42-44页 |
| ·营养缺陷培养基的筛选 | 第42页 |
| ·SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/AbA/X-a-Gal平板的筛选 | 第42-43页 |
| ·回转验证及测序 | 第43-44页 |
| ·双分子荧光互补载体构建 | 第44-46页 |
| ·目的基因的扩增 | 第44-45页 |
| ·目的基因的克隆 | 第45页 |
| ·双分子荧光互补表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·重组质粒转化农杆菌EHA 105 | 第46页 |
| ·烟草中蛋白互作情况检测 | 第46-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| ·酵母双杂交和双分子荧光互补研究蛋白互作的策略分析 | 第49页 |
| ·BBTV NSP与CP互作分析 | 第49-50页 |
| ·BBTV NSP与Clink互作分析 | 第50-51页 |
| ·BBTV NSP与NSP互作分析 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-62页 |
| 发表文章 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
