| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-19页 |
| ·研究背景 | 第8-17页 |
| ·中国肿瘤现状 | 第8-9页 |
| ·肿瘤的耐药机制 | 第9-10页 |
| ·功能基因筛选方法的研究进展 | 第10-14页 |
| ·cDNA文库的构建方法和功能基因筛选的应用 | 第14-16页 |
| ·CPR技术的应用 | 第16-17页 |
| ·研究意义 | 第17-18页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章cDNA文库的构建及鉴定 | 第19-36页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·细胞株 | 第19页 |
| ·逆转录病毒载体 | 第19页 |
| ·试剂 | 第19-20页 |
| ·仪器 | 第20-21页 |
| ·引物 | 第21页 |
| ·流程与方法 | 第21-32页 |
| ·细胞培养 | 第21页 |
| ·TRIzol法提取总RNA | 第21-22页 |
| ·RNA甲醛变性核酸凝胶电泳 | 第22-23页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第23-27页 |
| ·连接产物转化感受态大肠杆菌 | 第27-28页 |
| ·转化子收集 | 第28页 |
| ·质粒提取 | 第28-29页 |
| ·cDNA插入片段的鉴定 | 第29页 |
| ·构建含cDNA片段多样性的逆转录病毒表达系统 | 第29-31页 |
| ·病毒滴度测定 | 第31-32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-35页 |
| ·总RNA的完整性分析 | 第32-33页 |
| ·双链ds cDNA的合成 | 第33页 |
| ·层析柱CHROMA SPIN-400 c DNA分选结果图 | 第33-34页 |
| ·预实验摸索连接体系 | 第34页 |
| ·逆转录病毒cDNA文库的库容量分析 | 第34页 |
| ·逆转录病毒cDNA文库中插入片段的鉴定 | 第34-35页 |
| ·实时定量PCR法测定病毒滴度 | 第35页 |
| ·本章小结与讨论 | 第35-36页 |
| 第三章CPR平台的构建及应用 | 第36-53页 |
| ·材料 | 第36-38页 |
| ·细胞株 | 第36页 |
| ·质粒 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36-37页 |
| ·仪器 | 第37页 |
| ·引物 | 第37-38页 |
| ·流程 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·细胞培养 | 第38-39页 |
| ·体外药物敏感实验 | 第39页 |
| ·病毒感染工作细胞 | 第39页 |
| ·质粒转染和病毒上清收集 | 第39-40页 |
| ·基因组提取 | 第40页 |
| ·PCR | 第40-41页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-51页 |
| ·工作细胞和干预药物的确定 | 第41-44页 |
| ·药物干预条件的确定 | 第44-45页 |
| ·CPR平台的构建及可行性分析 | 第45页 |
| ·CPR技术应用于筛选肺癌和肝癌cDNA文库中耐ADM相关基因 | 第45-51页 |
| ·本章小结 | 第51-53页 |
| 第四章 总结与展望 | 第53-54页 |
| ·结论 | 第53页 |
| ·不足与展望 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第59页 |