利用体细胞核移植技术构建先天性肾病综合征克隆猪模型
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-17页 |
| ·先天性肾病综合征（芬兰型）概述 | 第11-12页 |
| ·利用基因修饰猪作为疾病模型的优势 | 第12-13页 |
| ·猪体细胞核移植技术概况 | 第13-14页 |
| ·猪基因修饰与核移植技术的结合 | 第14-15页 |
| ·研究背景及立题依据 | 第15-17页 |
| 第2章 材料与方法 | 第17-23页 |
| ·实验动物 | 第17页 |
| ·供体细胞 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·主要溶液的配制 | 第17-18页 |
| ·仪器与耗材 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-22页 |
| ·卵母细胞准备阶段操作 | 第18-19页 |
| ·供体PPF细胞准备方法 | 第19页 |
| ·卵母细胞弃核与PPF卵周隙注射方法 | 第19-20页 |
| ·重构胚融合及激活操作方法 | 第20页 |
| ·胚胎的体外培养方法 | 第20页 |
| ·胚胎移植手术方式 | 第20页 |
| ·妊振判断方法 | 第20-21页 |
| ·仔猪提基因组PCR-测序鉴定方法 | 第21-22页 |
| ·统计学分析 | 第22-23页 |
| 第3章 结果 | 第23-33页 |
| ·TALEN基因修饰成纤维细胞结果 | 第23-24页 |
| ·基因修饰阳性细胞复苏及培养结果 | 第24-25页 |
| ·重构胚胎及其融合结果 | 第25-27页 |
| ·胚胎移植手术情况及结果 | 第27-29页 |
| ·妊振B超判断结果 | 第29-30页 |
| ·克隆猪基因组提取及PCR测序鉴定结果 | 第30-33页 |
| 第4章 讨论 | 第33-39页 |
| ·关于共转染筛选中假阳性的讨论 | 第33页 |
| ·探讨SCNT技术总体存在的不足 | 第33-35页 |
| ·于卵母细胞及其影响因素的讨论 | 第35页 |
| ·关于供体细胞及其影响因素的讨论 | 第35-36页 |
| ·关于PPF移入去核卵母细胞的讨论 | 第36页 |
| ·关于重构胚激活操作的讨论 | 第36-37页 |
| ·关于胚胎移植及其影响因素的讨论 | 第37页 |
| ·关于受体妊娠及其维持的讨论 | 第37-39页 |
| 第5章 结论与展望 | 第39-42页 |
| ·结论 | 第39页 |
| ·展望及进一步工作的方向 | 第39-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 综述 | 第51-59页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
