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表达RV ERA株G蛋白重组新城疫病毒的构建及免疫原性研究

摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 前言第11-33页
   ·狂犬病概述第11-13页
     ·我国狂犬病流行现状第11-13页
   ·狂犬病病毒分子生物学特征第13-20页
     ·RV 分类第13页
     ·RV 的形态结构第13-14页
     ·RV 的生物合成第14-15页
     ·RV 的血清型第15页
     ·RV 基因组结构与功能第15-16页
     ·RV 的结构蛋白与功能第16-20页
   ·狂犬病疫苗的研究进展第20-26页
     ·灭活疫苗第20-22页
     ·减毒活疫苗第22页
     ·基因工程疫苗第22-25页
     ·重组活载体疫苗第25-26页
   ·反向遗传操作系统概述第26-30页
     ·反向遗传操作系统第26-27页
     ·负链RNA 病毒反向遗传操作系统第27-28页
     ·负链RNA 病毒反向遗传操作系统的应用研究第28-30页
   ·新城疫病毒反向遗传操作系统的研究进展第30-33页
     ·新城疫病毒反向遗传操作系统概述第30-31页
     ·成功表达外源基因的重组新城疫病毒第31-32页
     ·表达RVG 的重组新城疫病毒第32-33页
2 材料与方法第33-44页
   ·材料第33-34页
     ·病毒株、细胞、重组质粒及鸡胚第33页
     ·主要试剂第33页
     ·主要仪器和耗材第33-34页
     ·试验动物第34页
     ·引物设计与合成第34页
   ·方法第34-44页
     ·病毒基因组的提取、反转录和PCR 扩增第34-35页
     ·目的DNA 片段与质粒载体的连接反应第35页
     ·连接产物的转化第35-36页
     ·阳性质粒的鉴定第36页
     ·表达RVG 重组NDV 基因组全长cDNA 的构建第36-39页
     ·表达RVG 重组病毒的拯救第39-40页
     ·重组病毒rL-RVG 的鉴定第40-41页
     ·重组病毒rL-RVG 的致病性试验第41-42页
     ·重组病毒rL-RVG 生长动力学比较研究第42页
     ·重组病毒rL-RVG 对小鼠的安全性试验第42页
     ·重组病毒rL-RVG 对小鼠的免疫试验第42页
     ·重组病毒rL-RVG 免疫小鼠对GX/09 街毒的攻毒保护试验第42-43页
     ·重组病毒rL-RVG 对比格犬的免疫试验及中和抗体水平的监测第43-44页
3 结果与分析第44-54页
   ·RVG 基因的PCR 扩增结果第44页
   ·pBRN-R-RVG 的酶切及PCR 鉴定结果第44页
   ·重组病毒rL-RVG 的RT-PCR 鉴定第44-46页
   ·重组病毒rL-RVG 的间接免疫荧光试验第46页
   ·Western-blot 检测重组病毒RVG 的表达第46-47页
   ·重组病毒rL-RVG 的遗传稳定性第47-48页
   ·重组病毒rL-RVG 的致病性试验第48-49页
   ·重组病毒rL-RVG 鸡胚生长动力学第49页
   ·重组病毒rL-RVG 对小鼠的安全性评估第49-51页
   ·重组病毒rL-RVG 免疫小鼠的中和抗体检测试验第51-52页
   ·重组病毒rL-RVG 免疫小鼠对RV GX/09 街毒的攻毒保护试验第52页
   ·重组病毒rL-RVG 对比格犬免疫持续期抗体水平的监测第52-54页
4 讨论第54-56页
5 结论第56-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-68页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第68页

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