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水稻U-Box泛素连接酶OsPUB57的功能分析及其互作蛋白的筛选

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 绪论第9-16页
   ·稻瘟病研究慨述第9-11页
     ·稻瘟病菌的病原特征和危害现状第9页
     ·稻瘟病菌入侵机制第9-10页
     ·稻瘟病菌与水稻互作第10-11页
   ·泛素—蛋白酶体系统第11-14页
     ·泛素—蛋白酶体系统概述第11页
     ·泛素—蛋白酶体系统相关蛋白和功能第11-13页
     ·泛素—蛋白酶体系统参与生命活动的调节第13-14页
   ·植物天然免疫应答第14-16页
     ·植物天然免疫系统第14页
     ·泛素化修饰与植物免疫应答第14-16页
2 实验材料与方法第16-29页
   ·实验材料第16-18页
     ·OsPUB57水稻转基因株系第16页
     ·稻瘟病菌燕麦培养基和稻瘟病菌第16-17页
     ·制备大肠杆菌感受态细胞第17-18页
   ·实验方法第18-29页
     ·水稻材料DNA的提取第18-19页
     ·水稻材料RNA的提取第19页
     ·cDNA的合成第19-20页
     ·质粒DNA的提取(OMEGA试剂盒)第20页
     ·质粒的转化第20-21页
     ·PCR和琼脂糖电泳检测核酸第21-22页
     ·PCR产物胶回收(QIAGEN)第22页
     ·PCR胶回收产物和质粒的酶切与连接第22-23页
     ·水稻转基因植株的潮霉素鉴定第23页
     ·Real-time PCR第23-24页
     ·稻瘟病抗性鉴定第24-25页
     ·制备酵母感受态第25-26页
     ·酵母感受态的转化第26页
     ·酵母质粒提取(百泰克,一步法酵母质粒快速提取试剂盒)第26-27页
     ·酵母双杂交技术筛选互作基因第27-29页
3 结果与分析第29-48页
   ·OsPUB57转基因株系的潮霉素筛选第29-30页
   ·OsPUB57转基因株系中OsPUB57转录水平的semi-qPCR检测第30-31页
   ·OsPUB57转基因株系中OsPUB57转录水平的Real-timePCR检测第31-33页
   ·OsPUB57转基因株系的稻瘟病接种第33-35页
   ·OsPUB57转基因株系的黑暗诱导叶片凋亡第35-36页
   ·OsPUB57在flag 22和chitin介导的抗病免疫中的作用第36-37页
   ·OsPUB57互作基因的筛选与验证第37-44页
     ·构建酵母双杂载体第37-39页
     ·OsPUB57的自激活检测第39-40页
     ·OsPUB57互作基因的筛选第40-43页
     ·OsPUB57互作基因的验证第43-44页
   ·OsPUB57互作基因的过表达和RNAi载体的构建第44-48页
     ·OsPUB57互作基因的过表达载体pCXUN-Myc-PIP10构建第44-45页
     ·OsPUB57互作基因的RNAi载体pANDA-PIP1O RNAi的构建第45-48页
4 小结与讨论第48-50页
参考文献第50-55页
致谢第55-57页
作者简历第57页

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