| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 图表索引 | 第15-17页 |
| 英文缩略词表 | 第17-18页 |
| 引言 | 第18-21页 |
| 1 材料与方法 | 第21-36页 |
| ·材料 | 第21-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·试剂的配制 | 第23-25页 |
| ·方法 | 第25-36页 |
| ·对象选择、标本采集以及临床病理资料的收集 | 第25页 |
| ·用Trizol试剂提取癌组织及正常组织中的mRNA | 第25-26页 |
| ·提取mRNA的准备工作 | 第25页 |
| ·癌组织及正常组织的研磨及mRNA提取的具体步骤 | 第25-26页 |
| ·mRNA质量检测 | 第26页 |
| ·mRNA逆转录 | 第26-27页 |
| ·β-actin,ephrinA5,EphA3引物设计 | 第27页 |
| ·样品cDNA中目的基因的Real-time PCR检测 | 第27-29页 |
| ·荧光定量PCR反应体系 | 第27-28页 |
| ·Real time PCR反应步骤 | 第28-29页 |
| ·质量控制 | 第29页 |
| ·组织蛋白提取及Western Blot分析步骤 | 第29-30页 |
| ·免疫组化方法 | 第30-32页 |
| ·载玻片的处理 | 第30页 |
| ·免疫组织化学染色方法 | 第30-32页 |
| ·质粒构建 | 第32-34页 |
| ·EphrinA5 DNA胶回收 | 第32页 |
| ·EphrinA5 DNA的酶切消化与回收 | 第32页 |
| ·质粒空载体的DNA的酶切消化与回收 | 第32-33页 |
| ·EphrinA5 cDNA片段克隆入质粒载体 | 第33页 |
| ·质粒的提取和消化 | 第33-34页 |
| ·细胞培养和MTT细胞生长分析 | 第34-35页 |
| ·人类食管癌细胞系的培养 | 第34页 |
| ·细胞转染及克隆筛选 | 第34页 |
| ·人类食管癌细胞总蛋白的提取及Western blot测定 | 第34-35页 |
| ·转染基因对细胞生长的影响 | 第35页 |
| ·统计分析 | 第35-36页 |
| 2 结果 | 第36-49页 |
| ·研究对象的基本情况 | 第36-37页 |
| ·RNA纯度和浓度测定 | 第37页 |
| ·荧光定量PCR结果分析 | 第37-39页 |
| ·EphrinA5和EphA3 mRNA表达与食管癌临床病理参数的关系 | 第39-42页 |
| ·Western blot结果 | 第42-43页 |
| ·免疫组织化学染色结果 | 第43-44页 |
| ·EphrinA5和EphA3蛋白表达与食管癌临床病理参数的关系 | 第44-47页 |
| ·人类食管癌细胞系中EphrinA5的表达情况 | 第47页 |
| ·细胞转染及克隆筛选 | 第47页 |
| ·MTT比色法绘制细胞生长曲线 | 第47-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 4 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 综述 Eph/ephrin信号网络 | 第56-74页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及科研成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
