| 中文序言 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-9页 |
| Preface | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-15页 |
| Contents | 第15-19页 |
| LIST OF TABLES | 第19-23页 |
| Abbreviations | 第23-26页 |
| Chapter 1 Literature Review | 第26-56页 |
| ·Lung cancer | 第26-35页 |
| ·Lung cancer etiology | 第26-27页 |
| ·Epidemiology of lung cancer | 第27页 |
| ·Molecular genetics of lung cancer | 第27-28页 |
| ·Cell cycle and lung cancer | 第28-30页 |
| ·Apoptosis and lung cancer | 第30-31页 |
| ·Selected Oncogenes and tumor suppressor genes | 第31-35页 |
| ·MicroRNAs | 第35-51页 |
| ·Historical background | 第35页 |
| ·MicroRNA biogenesis and nomenclature | 第35-39页 |
| ·Biological and cellular functions of microRNAs | 第39-41页 |
| ·Transcriptional gene regulation by microRNAs | 第41-42页 |
| ·Mechanisms of gene repression by microRNAs | 第42-46页 |
| ·MicroRNAs and cancer | 第46页 |
| ·MicroRNAs act as tumor suppressors or oncogene | 第46-48页 |
| ·MicroRNA let-7 family | 第48-50页 |
| ·MicroRNA-34a | 第50-51页 |
| ·Identification of suitable reference genes for gene expression studies using real-time quantitative PCR in lung cancer | 第51-56页 |
| ·geNorm program | 第53页 |
| ·BestKeeper program | 第53页 |
| ·NormFinder program | 第53-56页 |
| Chapter 2 Methodology | 第56-83页 |
| 2. Materials and Methods | 第56-83页 |
| ·Materials | 第56-58页 |
| ·Equipment | 第58-59页 |
| ·Reagents preparation | 第59-65页 |
| ·Culture medium | 第59-60页 |
| ·Buffers and other materials used during western blot process | 第60-65页 |
| ·Research Design | 第65-67页 |
| ·Methods | 第67-80页 |
| ·Cell culture | 第67页 |
| ·Preparation of microRNAs mimics | 第67-68页 |
| ·Transient-transfection | 第68页 |
| ·RNA extraction | 第68-69页 |
| ·Agarose Gel Electrophoresis | 第69-70页 |
| ·Complementary DNA (cDNA) Synthesis | 第70-71页 |
| ·Polymerase chain reaction (PCR) | 第71-72页 |
| ·Detection of microRNA let-7a and miR-34a | 第72页 |
| ·Real time - quantitative PCR | 第72-75页 |
| ·Relative Quantification of mRNA | 第75页 |
| ·Cell Proliferation analysis | 第75-76页 |
| ·Cell cycle analysis by flow cytometry | 第76页 |
| ·Detection of apoptosis by annexin V-FITC/PI assay | 第76页 |
| ·Protein extraction | 第76-80页 |
| ·Statistical Analysis | 第80页 |
| ·Identification of suitable reference genes for gene expression studies using RT-qPCR in lung cancer | 第80-83页 |
| ·Cell lines | 第80页 |
| ·RNAExtractionandcomplementaryDNA(cDNA)biosynthesis | 第80-81页 |
| ·Real-timequantitativePCRidentificationsuitablereferencegenes | 第81-82页 |
| ·Data analysis | 第82-83页 |
| Chapter 3 Results | 第83-117页 |
| ·Chose hsa -microRNA let-7a and miR-34a | 第83-85页 |
| ·Ectopic microRNA let-7a expression in A549 and NCI-H446 lung cancer cells | 第85-86页 |
| ·Ectopic miR-34a expression in A549 and NCI-H446 lung cancer cells | 第86-87页 |
| ·MicroRNA let-7a inhibits cell growth of lung cancer cells NCI-H446 and A549 | 第87-88页 |
| ·MicroRNA 34a inhibits cell growth of lung cancer cells NCI-H446 and A549 | 第88-90页 |
| ·MicroRNA let-7a and miR-34a induces G0/G1 cell cycle arrest in A549and NCI-H446 lung cancer cells line | 第90-95页 |
| ·Increased apoptosis up on delivery of microRNA let-7a or miR-34a into A549 and NCI-H446 lung cancer cells line | 第95-100页 |
| ·RNA purity and concentration | 第100页 |
| ·Complementary DNA (cDNA) synthesis | 第100-101页 |
| ·Identification of suitable reference genes for gene expression studies using real-time quantitative PCR in lung cancer | 第101-108页 |
| ·Relative expression level of P53, C-MYC, BAX, K-RAS, CCDK4, P57, Bcl-2 at transcriptional level | 第108-112页 |
| ·Relative expression of C-MYC, P53, and Bcl-2 at protein level | 第112-117页 |
| Chapter4 Discussion | 第117-123页 |
| Chapter5 Conclusion | 第123-128页 |
| ·Summary | 第123-125页 |
| ·Novel findings of the study | 第125-126页 |
| ·Future perspective | 第126-128页 |
| References | 第128-156页 |
| Statement of Original Authorship | 第156-157页 |
| List of SCI publications | 第157-158页 |
| 附录 | 第158-159页 |
| Acknowledgement | 第159-160页 |
