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猪S100A12基因转录调控及信号通路研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略词表第9-11页
1 前言第11-21页
   ·研究问题的由来第11页
   ·文献综述第11-20页
     ·炎症因子第11-12页
     ·S100蛋白家族研究进展第12-16页
     ·RAGE蛋白研究进展第16-19页
     ·S100/RAGE/NF-κB信号通路第19-20页
   ·本研究的目的与意义第20-21页
2 材料与方法第21-38页
   ·材料第21-28页
     ·样品与细胞第21页
     ·载体和菌株第21-25页
     ·试剂与试剂盒第25-27页
     ·主要仪器设备第27页
     ·主要分子生物学软件、网站和数据库第27-28页
   ·方法第28-38页
     ·本研究的技术路线第28页
     ·细胞培养第28-29页
     ·双荧光素酶报告基因检测第29-32页
     ·组织表达谱与基因过表达效果定量分析第32-34页
     ·激光共聚胶显微镜观察BIFC蛋白互作第34-36页
     ·倒置荧光显微镜观察SCT+SNT蛋白互作第36-38页
3 结果第38-53页
   ·Sox-5负调控猪S1OOA12基因第38-40页
   ·猪S100A8、S100A9、S100A12和RAGE基因组织表达谱及在PK-15细胞过表达效果检测第40-42页
     ·猪S100A8、S100A9、S100A12和RAGE基因组织表达谱第40-41页
     ·猪S100A8、S100A9、S100A12及RAGE基因在PK-15细胞中过表达效果检测第41-42页
   ·利用双荧光素酶报告载体pNFκB-luc检测NF-κB活性第42-47页
     ·猪源细胞系PK-15第42-45页
     ·鼠源细胞系C2C12第45-47页
   ·BIFC检测RAGE下游互作蛋白第47-53页
     ·RAGE下游候选互作蛋白第47-48页
     ·BIFC融合载体的构建第48页
     ·共聚焦激光扫描显微镜第48-50页
     ·BIFC技术后续研究—SCT+SNT系统第50-53页
4 讨论第53-61页
   ·关于Sox-5负调控S100A12基因表达的讨论第53-54页
   ·关于影响S100/RAGE/NF-κB信号通路的因素第54-57页
     ·细胞类型与细胞密度第54-55页
     ·TLR4受体第55-56页
     ·RAGE蛋白配体间作用第56页
     ·其他有机物调节第56-57页
   ·关于RAGE下游互作蛋白讨论第57-59页
     ·NCK1第58页
     ·GrB2第58页
     ·RHOA第58-59页
   ·蛋白互作技术讨论第59-61页
5 小结第61-62页
   ·本研究的主要结论第61页
   ·本研究的特色与创新点第61页
   ·本研究的不足与进一步工作的建议第61-62页
参考文献第62-72页
附录第72-74页
攻读学位期间发表论文第74-75页
致谢第75-76页

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