摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略词表 | 第9-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
·研究问题的由来 | 第11页 |
·文献综述 | 第11-20页 |
·炎症因子 | 第11-12页 |
·S100蛋白家族研究进展 | 第12-16页 |
·RAGE蛋白研究进展 | 第16-19页 |
·S100/RAGE/NF-κB信号通路 | 第19-20页 |
·本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-38页 |
·材料 | 第21-28页 |
·样品与细胞 | 第21页 |
·载体和菌株 | 第21-25页 |
·试剂与试剂盒 | 第25-27页 |
·主要仪器设备 | 第27页 |
·主要分子生物学软件、网站和数据库 | 第27-28页 |
·方法 | 第28-38页 |
·本研究的技术路线 | 第28页 |
·细胞培养 | 第28-29页 |
·双荧光素酶报告基因检测 | 第29-32页 |
·组织表达谱与基因过表达效果定量分析 | 第32-34页 |
·激光共聚胶显微镜观察BIFC蛋白互作 | 第34-36页 |
·倒置荧光显微镜观察SCT+SNT蛋白互作 | 第36-38页 |
3 结果 | 第38-53页 |
·Sox-5负调控猪S1OOA12基因 | 第38-40页 |
·猪S100A8、S100A9、S100A12和RAGE基因组织表达谱及在PK-15细胞过表达效果检测 | 第40-42页 |
·猪S100A8、S100A9、S100A12和RAGE基因组织表达谱 | 第40-41页 |
·猪S100A8、S100A9、S100A12及RAGE基因在PK-15细胞中过表达效果检测 | 第41-42页 |
·利用双荧光素酶报告载体pNFκB-luc检测NF-κB活性 | 第42-47页 |
·猪源细胞系PK-15 | 第42-45页 |
·鼠源细胞系C2C12 | 第45-47页 |
·BIFC检测RAGE下游互作蛋白 | 第47-53页 |
·RAGE下游候选互作蛋白 | 第47-48页 |
·BIFC融合载体的构建 | 第48页 |
·共聚焦激光扫描显微镜 | 第48-50页 |
·BIFC技术后续研究—SCT+SNT系统 | 第50-53页 |
4 讨论 | 第53-61页 |
·关于Sox-5负调控S100A12基因表达的讨论 | 第53-54页 |
·关于影响S100/RAGE/NF-κB信号通路的因素 | 第54-57页 |
·细胞类型与细胞密度 | 第54-55页 |
·TLR4受体 | 第55-56页 |
·RAGE蛋白配体间作用 | 第56页 |
·其他有机物调节 | 第56-57页 |
·关于RAGE下游互作蛋白讨论 | 第57-59页 |
·NCK1 | 第58页 |
·GrB2 | 第58页 |
·RHOA | 第58-59页 |
·蛋白互作技术讨论 | 第59-61页 |
5 小结 | 第61-62页 |
·本研究的主要结论 | 第61页 |
·本研究的特色与创新点 | 第61页 |
·本研究的不足与进一步工作的建议 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-72页 |
附录 | 第72-74页 |
攻读学位期间发表论文 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |