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西瓜嗜酸菌双精氨酸转运系统功能基因tatB研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-23页
   ·细菌性果斑病简介第12-15页
     ·病原菌生物学特性第12页
     ·发病特征及防治方法第12-14页
     ·西瓜嗜酸菌致病机理研究进展第14-15页
   ·革兰氏阴性菌蛋白分泌系统第15-20页
     ·一步分泌系统第16-18页
     ·两步分泌系统第18-19页
     ·其他分泌系统第19-20页
   ·双精氨酸转运系统第20-22页
     ·双精氨酸转运系统的组成第20页
     ·双精氨酸转运系统的转运机制第20-21页
     ·研究意义第21-22页
     ·双精氨酸转运系统在植物病原细菌中的研究进展第22页
   ·研究目的及研究内容第22-23页
第二章 tatB 基因生物信息学分析第23-33页
   ·实验材料第23页
   ·实验方法第23-24页
     ·西瓜嗜酸菌 tatB 基因基本信息第23页
     ·8 种细菌 TatB 蛋白质理化性质分析第23页
     ·8 种细菌 TatB 蛋白氨基酸序列分析及系统发育树构建第23页
     ·西瓜嗜酸菌 TatB 蛋白疏水性分析第23-24页
     ·西瓜嗜酸菌 TatB 蛋白跨膜结构域预测第24页
     ·西瓜嗜酸菌 TatB 蛋白三级结构模拟第24页
   ·结果与分析第24-32页
     ·西瓜嗜酸菌 tatB 基因基本信息第24-25页
     ·8 种细菌 TatB 蛋白质理化性质分析第25-27页
     ·8 种细菌 TatB 蛋白氨基酸序列分析及系统发育树构建第27页
     ·西瓜嗜酸菌 TatB 蛋白疏水性分析第27-29页
     ·西瓜嗜酸菌 TatB 蛋白跨膜结构域预测第29-30页
     ·西瓜嗜酸菌 TatB 蛋白的三级结构模拟第30-32页
   ·小结与讨论第32-33页
第三章 西瓜嗜酸菌 tatB 基因克隆及功能分析第33-55页
   ·实验材料第33-36页
     ·仪器与试剂第33-34页
     ·培养基第34-35页
     ·供试植株、菌株和质粒第35-36页
   ·实验方法第36-42页
     ·野生型菌株基因组提取第36页
     ·引物设计及目的片段扩增第36-37页
     ·目的片段回收与纯化第37页
     ·目的片段与 pMD19-T Vector 的连接与转化第37页
     ·质粒 DNA 的提取第37-38页
     ·同源重组交换菌株构建第38-39页
     ·tatB 基因缺失突变体菌株筛选第39页
     ·tatB 基因缺失突变体菌株验证第39-40页
     ·互补菌株的构建、筛选及验证第40-41页
     ·致病性与致敏性测定第41页
     ·运动性测定第41页
     ·生长能力测定第41页
     ·胞外纤维素酶活性测定第41-42页
     ·生物膜形成测定第42页
     ·胞外多糖产生量测定第42页
   ·结果与分析第42-53页
     ·目的片段扩增第42-43页
     ·突变体构建第43-44页
     ·突变体验证第44-46页
     ·互补菌株的构建及验证第46-47页
     ·致病性与过敏性测定第47-49页
     ·运动能力测定第49-50页
     ·生长能力测定第50-51页
     ·胞外纤维素酶活性测定第51-52页
     ·生物膜形成测定第52-53页
     ·胞外多糖产生量测定第53页
   ·小结与讨论第53-55页
第四章 tatB 基因对相关基因表达量的影响第55-62页
   ·材料第55页
     ·实验相关菌株第55页
     ·仪器与试剂第55页
   ·实验方法第55-58页
     ·荧光定量引物设计第55-56页
     ·供试菌株总 RNA 的提取第56-57页
     ·RNA 反转录成第一链 cDNA第57页
     ·建立荧光定量 PCR 的反应体系第57-58页
     ·相对定量法第58页
   ·结果与分析第58-61页
     ·普通 PCR 检测引物特异性第58页
     ·供试细菌总 RNA 提取第58-59页
     ·突变菌株△tatB 中相关基因表达第59-61页
   ·小结与讨论第61-62页
第五章 全文结论第62-63页
参考文献第63-70页
致谢第70-72页
作者简历第72页

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