| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1 ETEC F4受体研究现状 | 第12-17页 |
| ·F4受体的类型 | 第12-14页 |
| ·受体的生化特征 | 第14-15页 |
| ·肠毒素大肠杆菌F4是导致仔猪腹泻的重要的粘附素 | 第15-17页 |
| 2 拷贝数量变异(CNV)及其检测 | 第17-19页 |
| ·拷贝数量变异(CNV) | 第17-18页 |
| ·CNVs对疾病的影响 | 第18页 |
| ·比较基因组杂交(CGH) | 第18-19页 |
| 3 GPI是细胞重要的免疫受体信号转导蛋白 | 第19-20页 |
| 4 GPI1基因的表达与抗病性紧密相关 | 第20-21页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 基因芯片法筛选F4受体相关CNVs | 第23-35页 |
| 1 材料与方法 | 第23-24页 |
| ·试验动物 | 第23页 |
| ·大肠杆菌体外粘附测定 | 第23-24页 |
| ·基因芯片 | 第24页 |
| ·材料准备 | 第24页 |
| ·数据分析方法 | 第24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-32页 |
| ·F4黏附型判定及黏附结果 | 第24页 |
| ·Array-CGH检测F4受体相关CNVs及其基因 | 第24-32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| ·关于array-CGH芯片 | 第32-33页 |
| ·关于检出的CNVs | 第33-34页 |
| 4 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 GPI1基因部分序列的克隆 | 第35-58页 |
| 1 材料 | 第35-36页 |
| ·试验动物 | 第35页 |
| ·实验试剂 | 第35-36页 |
| 2 方法 | 第36-44页 |
| ·总RNA的提取 | 第36-38页 |
| ·总RNA的DNaseⅠ消化 | 第38-39页 |
| ·cDNA合成 | 第39页 |
| ·目的基因PCR | 第39-42页 |
| ·克隆测序 | 第42-44页 |
| ·主要分子生物学分析工具软件 | 第44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-56页 |
| ·提取的样品总RNA的检测 | 第44-45页 |
| ·cDNA的PCR扩增结果 | 第45页 |
| ·目的基因片段的克隆和测序 | 第45-46页 |
| ·目的基因片段的序列 | 第46-47页 |
| ·目的基因片段的序列分析 | 第47-48页 |
| ·基因序列提交 | 第48-49页 |
| ·GPI1基因的蛋白质结构与基本特性 | 第49-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| ·RNA的质量 | 第56页 |
| ·GP1\基因及其蛋白质结构预测 | 第56-57页 |
| 5 小结 | 第57-58页 |
| 第四章 GPI1基因的表达差异分析 | 第58-66页 |
| 1 试验材料 | 第58页 |
| ·试验动物和样品 | 第58页 |
| ·酶和试剂 | 第58页 |
| ·主要仪器 | 第58页 |
| 2 试验方法 | 第58-61页 |
| ·引物设计 | 第58-59页 |
| ·试验分组 | 第59页 |
| ·总RNA提取 | 第59页 |
| ·荧光定量PCR标准品的制备 | 第59-60页 |
| ·Real time RT-PCR检测GPI1基因的表达水平 | 第60-61页 |
| ·统计分析 | 第61页 |
| 3 结果与分析 | 第61-64页 |
| ·标准曲线的建立 | 第61-62页 |
| ·GPI1基因的表达差异分析 | 第62-64页 |
| 4 讨论 | 第64-65页 |
| ·关于荧光定量PCR | 第64页 |
| ·关于GPI1基因的表达差异 | 第64-65页 |
| 5 小结 | 第65-66页 |
| 第五章 GPI1基因部分序列多态性与腹泻抗性的关联分析 | 第66-76页 |
| 1 材料 | 第66页 |
| ·试验用猪及耳样 | 第66页 |
| ·主要仪器和设备 | 第66页 |
| ·主要药品和试剂 | 第66页 |
| ·主要分子生物学分析工具软件 | 第66页 |
| 2 实验方法 | 第66-69页 |
| ·猪基因组DNA的提取 | 第66-67页 |
| ·猪GPI1基因序列候选SNPs位点的预测 | 第67页 |
| ·猪GPI1基因exon3和exon5的PCR扩增 | 第67-68页 |
| ·猪GPI1基因PCR-RFLP分析 | 第68页 |
| ·测序 | 第68页 |
| ·统计分析 | 第68-69页 |
| 3 结果与分析 | 第69-74页 |
| ·猪GPI1基因exon3和exon5酶切位点和内切酶的预测 | 第69页 |
| ·GPI1基因两个外显子的扩增结果 | 第69-70页 |
| ·GPI1基因两个多态位点的PCR-RFLP分析 | 第70-72页 |
| ·GPI1基因两个外显子的遗传结构分析 | 第72-74页 |
| 4 讨论 | 第74-75页 |
| ·利用生物信息学方法筛选SNPs | 第74页 |
| ·exon3和exon5的SNPs与黏附特性的关联 | 第74-75页 |
| 5 小结 | 第75-76页 |
| 第六章 结论 | 第76-79页 |
| 1 主要研究结果 | 第76-77页 |
| 2 创新之处 | 第77页 |
| 3 展望 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-96页 |
| 附录 | 第96-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 作者简历 | 第107-108页 |
