摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
主要符号对照表 | 第9-10页 |
第1章 引言 | 第10-42页 |
·斑马鱼突变体的筛选 | 第11-19页 |
·物理诱变 | 第11-12页 |
·化学诱变 | 第12-18页 |
·插入突变 | 第18-19页 |
·Tol2 转座子的研究 | 第19-23页 |
·Tol2 转座子 | 第19-20页 |
·斑马鱼中 Tol2 转座子介导的捕获技术及筛选 | 第20-23页 |
·斑马鱼咽弓软骨的发育 | 第23-27页 |
·斑马鱼咽弓软骨结构及发育 | 第23-25页 |
·咽弓软骨发育受内部信号调节 | 第25页 |
·咽弓软骨发育受外部信号调节 | 第25-27页 |
·咽弓软骨发育异常相关的出生缺陷 | 第27页 |
·斑马鱼肠道的发育 | 第27-28页 |
·核孔复合体的研究 | 第28-36页 |
·核孔复合体的结构 | 第28-30页 |
·核孔复合体的装配 | 第30-31页 |
·核孔复合体功能及研究进展 | 第31-35页 |
·核孔蛋白 Nup107 研究进展 | 第35-36页 |
·DNA 损伤检验点 | 第36-41页 |
·细胞周期检验点激活 | 第37-38页 |
·DNA 修复通路激活 | 第38页 |
·细胞凋亡 | 第38-41页 |
·本课题的目的和内容 | 第41-42页 |
第2章 材料和方法 | 第42-62页 |
·斑马鱼品系及转基因鱼 | 第42页 |
·Tol2 转座子介导的基因捕获及突变体筛选 | 第42-44页 |
·Tol2 转座子基因捕获载体结构 | 第42-43页 |
·Tol2 转座酶合成 | 第43页 |
·显微注射 | 第43页 |
·转基因鱼和突变体筛选 | 第43-44页 |
·Tol2 转座子插入位点分析 | 第44-51页 |
·基因组 DNA 提取 | 第44页 |
·TAIL-PCR | 第44-46页 |
·LM-PCR | 第46-49页 |
·5’RACE | 第49-50页 |
·RT-PCR | 第50-51页 |
·胚胎基因型分析 | 第51页 |
·整胚原位杂交 | 第51-53页 |
·原位杂交探针载体构建 | 第51页 |
·探针合成 | 第51页 |
·整胚原位杂交 | 第51-53页 |
·荧光实时定量 PCR | 第53-54页 |
·Morpholino 合成 | 第54-55页 |
·冷冻切片 | 第55-56页 |
·石蜡切片及苏木素/伊红染色(H&E)染色 | 第56页 |
·免疫荧光染色(整胚/切片) | 第56-57页 |
·Aclian Blue 染色 | 第57页 |
·吖啶橙染色 | 第57-58页 |
·Tunel 检测 | 第58页 |
·BrdU 染色 | 第58-59页 |
·流式细胞术分析胚胎细胞周期 | 第59页 |
·Poly[A]+ RNA 出核实验 | 第59-60页 |
·透射电镜 | 第60页 |
·免疫印迹 | 第60-62页 |
第3章 Tol2 转座子介导的插入诱变及突变体筛选 | 第62-70页 |
·大规模注射及饲养 | 第62页 |
·转基因鱼筛选 | 第62-64页 |
·仅母源表达 GFP 的转基因鱼家系 | 第62-63页 |
·母源和合子期均表达 GFP 的转基因家系 | 第63页 |
·只在合子期表达 GFP 的转基因家系 | 第63-64页 |
·突变体筛选 | 第64-68页 |
·TSG016 突变体 | 第65-66页 |
·TSG055 突变体 | 第66页 |
·TSG182 突变体 | 第66-67页 |
·TSG190 突变体 | 第67-68页 |
·总结与讨论 | 第68-70页 |
第4章 斑马鱼 nup107 突变体的研究 | 第70-95页 |
·nup107~(tsu068Gt)转基因胚胎荧光表达谱 | 第70页 |
·nup107~(tsu068Gt)t转基因家系中 nup107 被捕获 | 第70-73页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体表型分析 | 第73-75页 |
·咽弓、肠道和眼等组织发育需要 nup107 的表达 | 第75-76页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体中软骨细胞分化受影响 | 第76-79页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体中出现过量细胞凋亡 | 第79-81页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体中细胞过量凋亡部分依赖 p53 | 第81-83页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体中细胞增殖及周期正常 | 第83-84页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体中纺锤体装配和染色体分离正常 | 第84-85页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体中 FG-repeat 核孔蛋白定位受到破坏 | 第85-86页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体中核孔数量减少 | 第86-87页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体中 mRNAs 出核受到抑制 | 第87-89页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体中 DNA 损伤应答 ATM-Chk2-p53 通路被激活 | 第89-90页 |
·nup107~(tsu068Gt)突变体对 DNA 复制抑制剂敏感 | 第90-91页 |
·总结与讨论 | 第91-95页 |
第5章 结论 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-111页 |
致谢 | 第111-113页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第113页 |