| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-36页 |
| 1 番茄斑萎病毒 | 第13-20页 |
| ·番茄斑萎病毒分类学地位、基因组结构及其病原形态学 | 第13-14页 |
| ·番茄斑萎病毒的分类学地位 | 第13页 |
| ·番茄斑萎病毒的基因组结构 | 第13页 |
| ·番茄斑萎病毒病的病原形态学 | 第13-14页 |
| ·番茄斑萎病毒病的传播方式及传播介体 | 第14-15页 |
| ·番茄斑萎病毒病的危害症状及国内外发生现状 | 第15-18页 |
| ·番茄斑萎病毒病的危害症状 | 第15-17页 |
| ·国内番茄斑萎病毒病的发生现状 | 第17-18页 |
| ·国外番茄斑萎病毒病的发生现状 | 第18页 |
| ·番茄斑萎病毒病的防治 | 第18-20页 |
| 2 基因沉默 | 第20-34页 |
| ·基因沉默现象的发现 | 第20-21页 |
| ·基因沉默的定义 | 第21页 |
| ·基因沉默的分类 | 第21-22页 |
| ·RNA沉默的途径及机制 | 第22-27页 |
| ·RNA沉默的途径 | 第22-23页 |
| ·RNA沉默的机制 | 第23-27页 |
| ·RNA沉默的病毒抑制子 | 第27-29页 |
| ·RNA沉默的应用 | 第29-34页 |
| ·RNA沉默在功能基因组研究上的应用 | 第29-30页 |
| ·RNA沉默在作物品种改良上的应用 | 第30-31页 |
| ·RNA沉默在疾病治疗上的应用 | 第31页 |
| ·RNA沉默在植物病毒病防治上的应用 | 第31-34页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第34-36页 |
| 第二章 番茄斑萎病毒的分离及鉴定 | 第36-64页 |
| 1 材料与方法 | 第36-49页 |
| ·材料 | 第36-38页 |
| ·样品来源及采样时间 | 第36页 |
| ·菌株及质粒 | 第36-37页 |
| ·酶及化学试剂 | 第37页 |
| ·抗体 | 第37页 |
| ·引物 | 第37-38页 |
| ·抗生素 | 第38页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第38页 |
| ·分子生物学软件 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-49页 |
| ·番茄斑萎病毒的分离 | 第38-39页 |
| ·常规分子操作技术 | 第39-47页 |
| ·血清学检测TSWV | 第47-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-60页 |
| ·TSWV分离物的摩擦接种 | 第49-50页 |
| ·TSWV分离物的血清学检测 | 第50-51页 |
| ·TSWV YN-2 N基因和G_N/G_C基因的克隆与分析 | 第51-59页 |
| ·TSWV YN-2 N基因的克隆与分析 | 第51-54页 |
| ·TSWV YN-2 G_N/G_C基因的克隆与分析 | 第54-59页 |
| ·TSWV其他分离物N基因和G_N/G_C基因的克隆与分析 | 第59-60页 |
| ·TSWV其他分离物N基因的克隆与分析 | 第59页 |
| ·TSWV其他分离物G_N/G_C基因的克隆与分析 | 第59-60页 |
| 3 结论与讨论 | 第60-64页 |
| ·结论 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| 第三章 转TSWVN基因dsRNA载体烟草及其抗病性研究 | 第64-80页 |
| 1 材料与方法 | 第65-72页 |
| ·材料 | 第65-66页 |
| ·菌株与载体 | 第65页 |
| ·植物材料 | 第65页 |
| ·培养基 | 第65-66页 |
| ·试剂 | 第66页 |
| ·抗生素与生长激素 | 第66页 |
| ·方法 | 第66-72页 |
| ·电击转化农杆菌LBA4404感受态细胞的制备与转化 | 第66-67页 |
| ·冻融法转化农杆菌LBA4404感受态细胞的制备与转化 | 第67-68页 |
| ·烟草遗传转化体系的建立 | 第68-70页 |
| ·转基因烟草总DNA的提取 | 第70-71页 |
| ·转基因烟草的筛选 | 第71页 |
| ·转基因烟草的扩繁 | 第71-72页 |
| ·转基因烟草的攻毒试验 | 第72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-77页 |
| ·潮霉素临界值的筛选 | 第72页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第72-73页 |
| ·转基因烟草总DNA的提取及PCR筛选 | 第73-74页 |
| ·含50mg/L潮霉素的MS液体培养基筛选转基因烟草 | 第74-75页 |
| ·T_0代转基因烟草的无性扩繁及鉴定 | 第75页 |
| ·T_0代转基因烟草扩繁植株的攻毒实验和抗病性分析 | 第75-76页 |
| ·转基因烟草T_1代攻毒实验和抗病性分析 | 第76-77页 |
| 3 结论与讨论 | 第77-80页 |
| ·结论 | 第77页 |
| ·讨论 | 第77-80页 |
| 第四章 TSWV G_N/G_C基因dsRNA载体构建及其在烟草中的表达 | 第80-94页 |
| 1 材料与方法 | 第80-84页 |
| ·材料 | 第80-82页 |
| ·菌株与载体 | 第80-81页 |
| ·酶与试剂 | 第81页 |
| ·引物 | 第81页 |
| ·抗生素与生长激素 | 第81页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第81-82页 |
| ·分子生物学软件 | 第82页 |
| ·方法 | 第82-84页 |
| ·不同长度的G_N/G_C基因正向片段和反向片段的获得 | 第82页 |
| ·不同长度的G_N/G_C基因片段dsRNA植物表达载体的构建 | 第82-83页 |
| ·不同长度的G_N/G_C基因片段dsRNA植物表达载体转化烟草 | 第83-84页 |
| ·转基因烟草DNA的提取及PCR鉴定 | 第84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-90页 |
| ·不同长度的G_N/G_C基因正向片段和反向片段的获得 | 第84-86页 |
| ·不同长度的G_N/G_C基因片段dsRNA植物表达载体的构建 | 第86-89页 |
| ·不同长度的G_N/G_C基因片段dsRNA植物表达载体转化烟草 | 第89页 |
| ·转基因烟草总DNA的提取及PCR筛选 | 第89-90页 |
| 3 结论与讨论 | 第90-94页 |
| ·结论 | 第90-91页 |
| ·讨论 | 第91-94页 |
| 第五章 全文总结 | 第94-96页 |
| 1 全文主要结果 | 第94页 |
| 2 主要创新点 | 第94-95页 |
| 3 预期展望 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-107页 |
| 附录A 本文所用重要缩写词及中文对照 | 第107-110页 |
| 附录B 本文所用缓冲液及培养基配方 | 第110-115页 |
| 附录C 本文所用抗生素及其使用浓度 | 第115-116页 |
| 附录D 本文所用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第116-118页 |
| 附录E 云南样品TSWV分离物N基因序列信息 | 第118-120页 |
| 附录F 云南样品TSWV分离物G_N/G_C基因序列信息 | 第120-127页 |
| 致谢 | 第127-129页 |
| 作者简介 | 第129页 |
