| 符号说明 | 第1-11页 |
| 中文摘要 | 第11-15页 |
| ABSTRACT | 第15-20页 |
| 1 引言 | 第20-41页 |
| ·坦布苏病毒病概述 | 第20-21页 |
| ·TMUV 的生物学特性 | 第21-30页 |
| ·TMUV 的分类地位 | 第21页 |
| ·黄病毒的形态结构 | 第21-22页 |
| ·黄病毒的基因组及编码蛋白 | 第22-26页 |
| ·黄病毒的复制机制 | 第26-27页 |
| ·黄病毒基因组末端倒置互补序列 | 第27-28页 |
| ·TMUV 的研究进展 | 第28-30页 |
| ·RNAi 研究进展 | 第30-36页 |
| ·RNAi 概念 | 第30-31页 |
| ·RNAi 在抗病毒治疗中的应用 | 第31-35页 |
| ·黄病毒 RNAi 研究进展 | 第35-36页 |
| ·腺病毒载体研究进展 | 第36-39页 |
| ·研究的目的意义 | 第39-41页 |
| 2 材料与方法 | 第41-73页 |
| ·材料 | 第41-44页 |
| ·病毒株及抗体 | 第41页 |
| ·实验动物及细胞 | 第41页 |
| ·主要试剂、试剂盒及化学药品 | 第41-42页 |
| ·试剂的配制 | 第42页 |
| ·载体 | 第42-43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43-44页 |
| ·试验方法 | 第44-73页 |
| ·TMUV 半套式 RT-PCR 检测方法的建立与应用 | 第44-49页 |
| ·TMUV RT-LAMP 检测方法的建立与应用 | 第49-52页 |
| ·TMUV 多种核酸检测方法的比较 | 第52-54页 |
| ·不同宿主来源的 TMUV 的分离与鉴定 | 第54-57页 |
| ·TMUV 山东分离株 SD1001 全基因序列测定 | 第57-63页 |
| ·靶向干扰 TMUV E 基因和 NS5 基因的 shRNA 序列的筛选 | 第63-71页 |
| ·干扰 TMUV 复制的重组腺病毒的构建与鉴定及体外干扰试验 | 第71-73页 |
| 3 结果 | 第73-96页 |
| ·TMUV 半套式 RT-PCR 检测方法的建立与应用 | 第73-74页 |
| ·半套式 RT-PCR 检测方法的特异性试验结果 | 第73页 |
| ·半套式 RT-PCR 检测方法的敏感性 | 第73-74页 |
| ·半套式 RT-PCR 对 TMUV 临床样品的检测结果 | 第74页 |
| ·TMUV RT-LAMP 检测方法的建立与应用 | 第74-76页 |
| ·TMUV RT-LAMP 检测方法的敏感性试验结果 | 第74页 |
| ·TMUV RT-LAMP 检测方法的特异性试验结果 | 第74-75页 |
| ·临床样品检测结果 | 第75-76页 |
| ·TMUV 多种核酸检测方法的比较 | 第76-79页 |
| ·多种检测方法的敏感性试验结果 | 第76页 |
| ·多种检测方法的特异性试验结果 | 第76-78页 |
| ·临床样品检测结果 | 第78-79页 |
| ·不同宿主来源的 TMUV 的分离与鉴定 | 第79-84页 |
| ·不同宿主来源的 TMUV 流行病学调查 | 第79页 |
| ·麻雀分离株 TMUV-SDHS 鸭胚培养特性 | 第79-80页 |
| ·麻雀分离株 TMUV-SDHS 细胞培养特性 | 第80-81页 |
| ·蚊源分离株 TMUV-SDHS 细胞培养特性 | 第81-83页 |
| ·TMUV-SDHS 的 E 基因和 NS5 基因的遗传进化分析结果 | 第83页 |
| ·TMUV-SDHS 及 TMUV-SDMS 株对产蛋鸭致病性研究结果 | 第83-84页 |
| ·TMUV 山东分离株 SD1001 全基因序列测定 | 第84-88页 |
| ·TMUV 基因组分析结果 | 第84-85页 |
| ·TMUV 病毒的蛋白的氨基酸比对结果 | 第85-86页 |
| ·TMUV 5’末端和 3’末端非编码区的分析 | 第86-87页 |
| ·TMUV 病毒的蛋白的潜在糖基化位点预测 | 第87页 |
| ·TMUV 开放阅读框 Bootscan 扫描 | 第87-88页 |
| ·靶向干扰 TMUV E 基因和 NS5 基因的 shRNA 序列的筛选 | 第88-94页 |
| ·重组载体 pEGFP-E 及 pEGFP-NS5 载体的测序鉴定 | 第88页 |
| ·转染用细胞的选择 | 第88页 |
| ·荧光标签载体转染 293T 细胞 | 第88-90页 |
| ·shRNA 干扰 E-GFP 和 NS5-GFP 融合蛋白的表达 | 第90-91页 |
| ·shRNA 干扰载体与 GFP 融合蛋白的表达载体共转染后的流式细胞检测 | 第91-93页 |
| ·E 基因和 NS5 基因的相对荧光定量检测结果 | 第93-94页 |
| ·干扰 TMUV 复制的重组腺病毒的构建与鉴定及体外干扰试验 | 第94-96页 |
| ·重组腺病毒的包装出毒 | 第94页 |
| ·重组腺病毒的鉴定 | 第94-95页 |
| ·重组腺病毒滴度的测定 | 第95页 |
| ·重组腺病毒介导的 shRNA 体外干扰 TMUV 复制的研究 | 第95-96页 |
| 4 讨论 | 第96-102页 |
| ·TMUV 核酸检测方法的建立及多种核酸检测方法的比较 | 第96-98页 |
| ·TMUV 半套式 RT-PCR 检测方法的建立与应用 | 第96页 |
| ·TMUV RT-LAMP 检测方法的建立与应用 | 第96页 |
| ·TMUV 多种核酸检测方法的比较 | 第96-98页 |
| ·不同宿主来源的 TMUV 的分离与鉴定 | 第98-99页 |
| ·TMUV 山东分离株 SD1001 全基因序列测定 | 第99-100页 |
| ·重组腺病毒介导的 shRNA 干扰 TMUV 复制的研究 | 第100-102页 |
| 5 结论 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-114页 |
| 附录 | 第114-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 博士在读期间发表论文 | 第117-118页 |
