符号说明 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
1. 引言 | 第12-25页 |
·杨树基因工程 | 第12-20页 |
·杨树材性改良基因工程 | 第12-15页 |
·杨树抗虫基因工程 | 第15-17页 |
·杨树抗旱、耐盐、耐洪涝基因工程 | 第17-20页 |
·生长素的研究进展 | 第20-25页 |
·生长素合成及代谢 | 第20-22页 |
·生长素受体 | 第22-23页 |
·生长素极性运输 | 第23-24页 |
·生长素信号转导 | 第24-25页 |
·本研究的目的和意义 | 第25页 |
2. 材料与方法 | 第25-33页 |
·实验材料 | 第25-26页 |
·植物材料 | 第25-26页 |
·菌株和质粒 | 第26页 |
·酶和生化试剂 | 第26页 |
·PCR引物 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-33页 |
·目的基因的获得 | 第26-28页 |
·总RNA的提取 | 第26-27页 |
·反转录cDNA第一链的合成 | 第27页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第27-28页 |
·碱法大量提质粒 | 第28页 |
·序列测定和比较分析 | 第28页 |
·表达载体的构建和农杆菌的转化 | 第28-30页 |
·表达载体构建 | 第28-29页 |
·根癌农杆菌LBA4404感受态的制备 | 第29-30页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第30页 |
·农杆菌介导的毛白杨遗传转化 | 第30-31页 |
·农杆菌培养 | 第30页 |
·叶圆盘法转化毛白杨 | 第30-31页 |
·毛白杨组织培养及遗传转化所用的培养基 | 第31页 |
·转基因无菌苗的驯化和移栽 | 第31页 |
·PtAUX1基因的表达分析及转基因植株的检测 | 第31-32页 |
·半定量RT-PCR检测PtAUX1基因的表达分析 | 第31-32页 |
·PtAUX1转基因植株的RT-PCR检测 | 第32页 |
·Southern杂交 | 第32页 |
·PtAUX1转基因系对植物激素的反应 | 第32页 |
·生长素的反应 | 第32页 |
·细胞分裂素的反应 | 第32页 |
·PtAUX1转基因植株对光照的反应 | 第32-33页 |
·对光照长度的反应 | 第32-33页 |
·对光照强度的反应 | 第33页 |
·转基因植株不同时期下的RT-PCR检测 | 第33页 |
·转基因植株不同位置的RT-PCR检测 | 第33页 |
3. 结果与分析 | 第33-46页 |
·PtAUX1基因表达载体的构建 | 第33-35页 |
·毛白杨遗传转化体系的优化 | 第35-39页 |
·菌液浓度叶片转化的影响 | 第35-36页 |
·侵染时间对遗传转化的影响 | 第36页 |
·乙酰丁香酮对遗传转化的影响 | 第36-37页 |
·暗培养对不定芽分化的影响 | 第37页 |
·毛白杨遗传转化效率的分析 | 第37-39页 |
·PtAUX1转基因植物的表型分析 | 第39-43页 |
·Southern杂交结果 | 第39页 |
·PtAUX1基因表达模式 | 第39-40页 |
·PtAUX1基因促进叶的产生 | 第40-41页 |
·PtAUX1转基因苗对外源激素的反应 | 第41-43页 |
·PtAUX1转基因苗对不同光照的反应 | 第43-46页 |
·PtAUX1转基因苗对不同光照时间的反应 | 第43-45页 |
·PtAUX1转基因苗对低光照强度的反应 | 第45-46页 |
4. 讨论 | 第46-51页 |
·PtAUX1基因是生长素输入载体 | 第46-47页 |
·PtAUX1基因促进毛白杨的生长 | 第47-48页 |
·组培苗继代培养的影响因素 | 第48-49页 |
·抗生素对叶片不定芽再生的影响 | 第49页 |
·遗传转化影响因素 | 第49-50页 |
·超表达PtAUX1影响毛白杨植株对光的敏感性 | 第50-51页 |
5. 结论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-65页 |
附录 | 第65-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第69页 |