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毛白杨PtAUX1基因的表达及其在毛白杨中的转化分析

符号说明第1-8页
中文摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
1. 引言第12-25页
   ·杨树基因工程第12-20页
     ·杨树材性改良基因工程第12-15页
     ·杨树抗虫基因工程第15-17页
     ·杨树抗旱、耐盐、耐洪涝基因工程第17-20页
   ·生长素的研究进展第20-25页
     ·生长素合成及代谢第20-22页
     ·生长素受体第22-23页
     ·生长素极性运输第23-24页
     ·生长素信号转导第24-25页
   ·本研究的目的和意义第25页
2. 材料与方法第25-33页
   ·实验材料第25-26页
     ·植物材料第25-26页
     ·菌株和质粒第26页
     ·酶和生化试剂第26页
     ·PCR引物第26页
   ·实验方法第26-33页
     ·目的基因的获得第26-28页
       ·总RNA的提取第26-27页
       ·反转录cDNA第一链的合成第27页
       ·大肠杆菌感受态细胞的转化第27-28页
       ·碱法大量提质粒第28页
       ·序列测定和比较分析第28页
     ·表达载体的构建和农杆菌的转化第28-30页
       ·表达载体构建第28-29页
       ·根癌农杆菌LBA4404感受态的制备第29-30页
       ·冻融法转化农杆菌第30页
     ·农杆菌介导的毛白杨遗传转化第30-31页
       ·农杆菌培养第30页
       ·叶圆盘法转化毛白杨第30-31页
       ·毛白杨组织培养及遗传转化所用的培养基第31页
       ·转基因无菌苗的驯化和移栽第31页
     ·PtAUX1基因的表达分析及转基因植株的检测第31-32页
       ·半定量RT-PCR检测PtAUX1基因的表达分析第31-32页
       ·PtAUX1转基因植株的RT-PCR检测第32页
     ·Southern杂交第32页
     ·PtAUX1转基因系对植物激素的反应第32页
       ·生长素的反应第32页
       ·细胞分裂素的反应第32页
     ·PtAUX1转基因植株对光照的反应第32-33页
       ·对光照长度的反应第32-33页
       ·对光照强度的反应第33页
       ·转基因植株不同时期下的RT-PCR检测第33页
       ·转基因植株不同位置的RT-PCR检测第33页
3. 结果与分析第33-46页
   ·PtAUX1基因表达载体的构建第33-35页
   ·毛白杨遗传转化体系的优化第35-39页
     ·菌液浓度叶片转化的影响第35-36页
     ·侵染时间对遗传转化的影响第36页
     ·乙酰丁香酮对遗传转化的影响第36-37页
     ·暗培养对不定芽分化的影响第37页
     ·毛白杨遗传转化效率的分析第37-39页
   ·PtAUX1转基因植物的表型分析第39-43页
     ·Southern杂交结果第39页
     ·PtAUX1基因表达模式第39-40页
     ·PtAUX1基因促进叶的产生第40-41页
     ·PtAUX1转基因苗对外源激素的反应第41-43页
   ·PtAUX1转基因苗对不同光照的反应第43-46页
     ·PtAUX1转基因苗对不同光照时间的反应第43-45页
     ·PtAUX1转基因苗对低光照强度的反应第45-46页
4. 讨论第46-51页
   ·PtAUX1基因是生长素输入载体第46-47页
   ·PtAUX1基因促进毛白杨的生长第47-48页
   ·组培苗继代培养的影响因素第48-49页
   ·抗生素对叶片不定芽再生的影响第49页
   ·遗传转化影响因素第49-50页
   ·超表达PtAUX1影响毛白杨植株对光的敏感性第50-51页
5. 结论第51-53页
参考文献第53-65页
附录第65-68页
致谢第68-69页
攻读硕士学位期间发表论文情况第69页

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