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山羊毛囊细胞分离培养与鉴定及毛囊体外重塑研究

符号说明第1-7页
目录第7-10页
中文摘要第10-13页
Abstract第13-17页
1 引言第17-32页
   ·山羊的毛囊结构与济宁青山羊毛皮品质第18-19页
     ·山羊的毛囊结构第18-19页
     ·济宁青山羊的毛皮品质第19页
   ·动物毛囊的生理特性及功能第19-25页
     ·动物毛囊的生长周期第19-20页
     ·动物毛囊的细胞组成及功能第20-23页
     ·毛囊的组织分化与发育第23-24页
     ·山羊毛囊形态发生的过程第24-25页
   ·毛囊再生与重建及损伤修复的相关调控因子第25-28页
     ·胰岛素样生长因子第25-26页
     ·表皮生长因子第26页
     ·碱性成纤维细胞生长因子第26-27页
     ·β-连环蛋白(β-catenin)及 Wnt/β-catenin 信号通路第27-28页
   ·动物毛囊重建体外培养研究进展第28-32页
     ·毛囊体外诱导再生研究进展第28-29页
     ·毛囊真皮源性细胞对于体外毛囊诱导重塑的影响第29-30页
     ·动物毛囊体外培养与毛囊细胞分离培养的研究进展第30-31页
     ·建立动物毛囊体外重塑培养模型的研究前景第31-32页
   ·本研究的目的与意义第32页
2 材料和方法第32-43页
   ·实验材料第32-35页
     ·实验动物种群的维持与样品采集第32页
     ·主要仪器设备第32-33页
     ·主要试剂及其来源第33页
     ·培养液和常用试剂的配置第33-35页
   ·试验方法第35-43页
     ·外根鞘细胞原代培养用细胞培养板的处理第35页
     ·毛乳头细胞原代培养用细胞培养板的前期处理第35页
     ·济宁青山羊次级毛囊的分离第35-36页
     ·青山羊毛囊外根鞘细胞体外培养体系的完善第36-37页
     ·济宁青山羊毛乳头细胞的体外分离与培养第37-39页
     ·青山羊真皮成纤维细胞的分离培养及其细胞系的建立第39-42页
     ·青山羊毛囊体外重塑模型的建立第42-43页
3 结果与分析第43-59页
   ·青山羊毛囊外根鞘细胞培养体系的优化第43-47页
     ·毛囊贴壁法培养外根鞘细胞的生长状态与形态学观察第43-44页
     ·山羊毛囊外根鞘细胞 Giemsa 染色的观察结果第44-45页
     ·传代培养的毛囊外根鞘细胞的生长特性第45页
     ·山羊毛囊外根鞘细胞的染色体分析第45-46页
     ·山羊毛囊外根鞘细胞免疫细胞化学鉴定第46页
     ·毛囊外根鞘细胞的形态回复试验第46-47页
   ·毛乳头细胞的分离培养与生物学特性检测第47-50页
     ·毛乳头细胞的形态学观察第47-48页
     ·毛乳头细胞克隆形成率第48-49页
     ·毛乳头细胞的种属来源及组织来源鉴定第49-50页
   ·济宁青山羊真皮成纤维细胞的分离培养与鉴定第50-54页
     ·原代外植法培养细胞的形态学及 Giemsa 染色的观察结果第50-51页
     ·传代培养的真皮成纤维细胞的生长特性第51-52页
     ·山羊真皮成纤维细胞的染色体分析第52页
     ·微生物污染检测结果第52-53页
     ·细胞活率与贴壁率的测定结果第53页
     ·四种荧光蛋白质粒转染 DFB 效果第53-54页
   ·体外重塑毛囊组织培养体系的建立第54-59页
     ·体外重塑毛囊的生长形态观察第54-55页
     ·体外重塑毛囊的组织学结构第55-57页
     ·体外重塑毛囊与体内分离毛囊毛纤维生长速度的测定与比较第57-58页
     ·体外重塑毛囊中关键基因表达量的测定第58-59页
4 讨论第59-70页
   ·生长因子与激素对毛囊外根鞘细胞体外生长的调节作用第59-60页
   ·培养体系中非毛囊外根鞘细胞的生长抑制与去除第60-61页
   ·表面覆盖物(培养基质)对外根鞘细胞贴壁的促进作用第61页
   ·山羊毛乳头细胞分离培养及其生物学特性的保持第61-63页
     ·山羊毛乳头细胞分离培养体系的优化第61-62页
     ·α-SMA 在体外培养毛乳头细胞中的表达第62-63页
   ·毛乳头细胞与毛囊外根鞘细胞的相互作用第63-67页
     ·生长因子在 DPC 诱导 ORSC 中的作用第63-65页
     ·体外培养基质对 DPC 与 ORSC 相互作用的影响第65-67页
   ·毛囊的体外三维重塑第67-70页
     ·相关生长因子对体外重塑毛囊的影响第67-68页
     ·培养液成分与体外培养基质对毛囊重建的作用第68-70页
   ·山羊毛囊体外重塑模型成功建立的关键第70页
5 结论第70-71页
   ·优化了毛囊外根鞘细胞体外培养的技术体系第70页
   ·建立了毛乳头细胞高效分离与纯化技术及其培养体系第70-71页
   ·建立了山羊真皮成纤维细胞系并完善建系方法第71页
   ·建立了体外毛囊重塑培养模型并探索出毛囊重建的有效诱导条件第71页
6 参考文献第71-79页
7 致谢第79-80页
8 攻读学位期间发表论文情况第80页

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