符号和缩略词说明 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 引言 | 第11-24页 |
·大蒜概述 | 第11-12页 |
·大蒜的化学成分 | 第11-12页 |
·大蒜的重要生理功能 | 第12页 |
·大蒜的生理休眠 | 第12-13页 |
·大蒜产业的现状及前景 | 第13-14页 |
·国内外有关大蒜绿变的研究 | 第14-16页 |
·大蒜绿色素的性质 | 第14-15页 |
·烷基-吡咯基氨基酸与大蒜绿变 | 第15页 |
·呼吸代谢与大蒜绿变 | 第15页 |
·大蒜绿色素的结构解析 | 第15-16页 |
·三羧酸循环与大蒜绿变 | 第16页 |
·卟啉合成共有途径酶类研究进展 | 第16-22页 |
·胆色素原脱氨酶(Porphobilinogen deaminase,PBGD) | 第18页 |
·尿卟啉原 III 合酶(Uroporporphyrinogn III synthase,UROS) | 第18页 |
·5-氨基酮戊酸脱水酶(5-aminolevulinate dehydratase,ALAD) | 第18-22页 |
·本课题研究目的和意义 | 第22-24页 |
·研究目的 | 第22-23页 |
·研究意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-36页 |
·试验材料 | 第24-26页 |
·植物材料 | 第24页 |
·菌株与质粒 | 第24页 |
·试剂盒和酶 | 第24页 |
·生化试剂及实验仪器 | 第24页 |
·培养基 | 第24-25页 |
·PCR 引物 | 第25-26页 |
·试验方法 | 第26-36页 |
·总 RNA 的提取 | 第26页 |
·总 RNA 的检测 | 第26-27页 |
·反转录 cDNA 模板 | 第27页 |
·通过 3’RACE 获得 3’端序列 | 第27-28页 |
·通过 5’RACE 获得 5’端序列 | 第28-30页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第30-31页 |
·目的片段的回收 | 第31页 |
·连接反应 | 第31页 |
·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备和转化 | 第31-33页 |
·碱法提质粒 | 第33-34页 |
·质粒 DNA 酶切验证 | 第34页 |
·cDNA 片段的测序及序列分析 | 第34页 |
·实时荧光定量 PCR | 第34-35页 |
·大蒜绿变强度定义及测定方法 | 第35页 |
·5-氨基酮戊酸脱水酶的测定方法 | 第35页 |
·胆色素原的测定方法 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-49页 |
·大蒜总 RNA 的提取 | 第36页 |
·大蒜 5-氨基酮戊酸脱水酶基因的克隆 | 第36-38页 |
·大蒜 5-氨基酮戊酸脱水酶基因中间片段的克隆 | 第36-37页 |
·5-氨基酮戊酸脱水酶基因 3’端的克隆 | 第37-38页 |
·5-氨基酮戊酸脱水酶基因 5’端的克隆 | 第38页 |
·ALAD 基因序列分析 | 第38-41页 |
·5-氨基酮戊酸脱水酶活性变化 | 第41-43页 |
·不同贮藏温度下邳州白蒜和苍山蒲棵大蒜 ALAD 活性变化 | 第41-42页 |
·室温下邳州白蒜和苍山蒲棵大蒜 ALAD 活性变化 | 第42-43页 |
·胆色素原含量的变化 | 第43-45页 |
·不同贮藏温度下邳州白蒜和苍山蒲棵大蒜 PBG 含量变化 | 第43-44页 |
·室温下邳州白蒜和苍山蒲棵大蒜 PBG 含量变化 | 第44-45页 |
·5-氨基酮戊酸脱水酶基因的表达 | 第45-47页 |
·不同贮藏温度下邳州白蒜和苍山蒲棵大蒜 ALAD 基因表达 | 第45-46页 |
·室温下邳州白蒜和苍山蒲棵大蒜 ALAD 基因表达 | 第46-47页 |
·大蒜绿变强度变化 | 第47-49页 |
·不同贮藏温度下邳州白蒜和苍山蒲棵大蒜绿变强度变化 | 第47-48页 |
·室温下邳州白蒜和苍山蒲棵大蒜绿变强度变化 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
·关于大蒜 RNA 的提取 | 第49页 |
·关于 5’race | 第49-50页 |
·关于 ALAD 基因表达与酶活性 | 第50-51页 |
·进一步研究方向 | 第51-52页 |
5 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
致谢 | 第61页 |