| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-27页 |
| ·MRJPS 家族概述 | 第15-19页 |
| ·MRJPs 家族简介 | 第15页 |
| ·MRJP1 和 MRJP2 的研究概况 | 第15-16页 |
| ·MRJPs 家族其他成员的研究概况 | 第16-17页 |
| ·MRJPs 的功能 | 第17-18页 |
| ·MRJPs 的克隆、表达和分离纯化 | 第18-19页 |
| ·蛋白质结构研究方法 | 第19-26页 |
| ·X-射线蛋白质晶体学技术 | 第19-23页 |
| ·同步辐射真空紫外圆二色谱(SRCD)技术 | 第23-24页 |
| ·小角 X-射线散射(SAXS)技术 | 第24-26页 |
| ·研究目的、意义和主要内容 | 第26-27页 |
| 第二章 重组 MRJP1 的克隆、表达和纯化 | 第27-39页 |
| ·实验材料和仪器设备 | 第27页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·层析介质 | 第27页 |
| ·仪器设备 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-33页 |
| ·MRJP1 原核表达载体的构建 | 第27-30页 |
| ·MRJP1 蛋白表达条件的优化 | 第30-31页 |
| ·MRJP1 蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| ·Bio-Rad Protein Assay Kit 测定蛋白浓度 | 第32-33页 |
| ·实验结果 | 第33-38页 |
| ·载体的构建及鉴定 | 第33页 |
| ·MRJP1 蛋白表达条件的优化 | 第33-36页 |
| ·MRJP1 蛋白的纯化 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 天然 MRJP1 和 MRJP2 的分离纯化及鉴定 | 第39-49页 |
| ·实验材料和仪器设备 | 第39页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·层析介质 | 第39页 |
| ·仪器设备 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·目标蛋白的提取 | 第39页 |
| ·目标蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| ·双向电泳分析 | 第40-41页 |
| ·MS-MS 鉴定 | 第41页 |
| ·分析超速离心 | 第41页 |
| ·实验结果 | 第41-48页 |
| ·目标蛋白的纯化 | 第41-44页 |
| ·双向电泳鉴定 | 第44页 |
| ·MS-MS 质谱鉴定 | 第44-47页 |
| ·MRJP1 低聚体的分析超速离心 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 MRJP1 和 MRJP2 晶体生长条件的筛选 | 第49-56页 |
| ·实验材料和仪器设备 | 第49页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·仪器设备 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-52页 |
| ·蛋白晶体的初筛 | 第49-50页 |
| ·蛋白晶体的优化 | 第50页 |
| ·X 射线衍射数据的收集与数据的初步处理 | 第50页 |
| ·脱水法、固液法和甲基化法结晶 | 第50-52页 |
| ·实验结果 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 MRJP1 和 MRJP2 二级结构的测定 | 第56-65页 |
| ·实验材料和仪器设备 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-58页 |
| ·MRJP1 四聚体圆二色谱方法 | 第56页 |
| ·MRJP1 单体的圆二色谱方法 | 第56-57页 |
| ·MRJP2 的圆二色谱方法 | 第57页 |
| ·Tm 值测定方法 | 第57-58页 |
| ·实验结果 | 第58-64页 |
| ·MRJP1 四聚体的圆二色谱分析 | 第58-59页 |
| ·MRJP1 单体的圆二色谱分析 | 第59-60页 |
| ·MRJP2 的圆二色谱分析 | 第60-62页 |
| ·三种蛋白 Tm 值的测定 | 第62-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| 第六章 MRJP1 和 MRJP2 三维点阵结构的解析 | 第65-72页 |
| ·实验材料和仪器设备 | 第65页 |
| ·实验方法 | 第65-66页 |
| ·样品的预处理与上样 | 第65页 |
| ·小角 X 射线散射数据的处理 | 第65-66页 |
| ·实验结果 | 第66-70页 |
| ·蛋白的三维点阵结构解析 | 第66-68页 |
| ·结构的验证 | 第68-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| 第七章 全文总结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 附录 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简历 | 第82页 |
