| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-20页 |
| 1 大麦遗传转化技术研究现状与进展 | 第9-16页 |
| ·大麦的遗传转化方法 | 第9-13页 |
| ·基因枪转化法 | 第9-10页 |
| ·电穿孔 | 第10-11页 |
| ·显微注射 | 第11页 |
| ·花粉管通道法 | 第11页 |
| ·农杆菌介导法 | 第11-13页 |
| ·转基因技术在大麦研究中的应用 | 第13-16页 |
| ·大麦抗病害研究 | 第13-14页 |
| ·环境胁迫抗性应用 | 第14-15页 |
| ·大麦品质改良应用 | 第15-16页 |
| 2 植物抗冻基因工程研究进展 | 第16-19页 |
| ·抗冻基因的来源 | 第16-17页 |
| ·抗冻基因的应用 | 第17-19页 |
| ·抗冻蛋白基因 | 第17页 |
| ·脯氨酸基因 | 第17-18页 |
| ·脂肪酸去饱和酶基因 | 第18页 |
| ·超氧化物歧化酶基因 | 第18-19页 |
| 3 研究的目的意义 | 第19-20页 |
| 第二章 大麦幼胚再生体系的建立 | 第20-24页 |
| 1 材料和方法 | 第20页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| 2 大麦愈伤组织的诱导、继代培养、分化及植株再生 | 第20-21页 |
| 3 结果统计及分析 | 第21-24页 |
| ·统计方法 | 第21页 |
| ·幼胚愈伤组织的诱导与再生 | 第21-22页 |
| ·不同基因型对幼胚愈伤组织诱导及分化的影响 | 第22-23页 |
| ·ABA对幼胚愈伤组织诱导的影响 | 第23-24页 |
| 第三章 KN2基因表达载体的构建与遗传转化 | 第24-40页 |
| 1 实验材料与方法 | 第24-34页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-34页 |
| ·KN2基因表达载体的构建 | 第24-30页 |
| ·KN2基因表达载体构建策略 | 第25页 |
| ·PCR引物设计与反应条件 | 第25-26页 |
| ·割胶回收目的片段 | 第26-27页 |
| ·T-simple载体的连接 | 第27页 |
| ·CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第27页 |
| ·质粒向大肠杆菌的转化 | 第27-28页 |
| ·测序 | 第28页 |
| ·质粒提取 | 第28-29页 |
| ·质粒酶切与连接 | 第29-30页 |
| ·33011-K载体的构建 | 第30页 |
| ·农杆菌介导的大麦遗传转化 | 第30-34页 |
| ·大麦组织培养过程中的培养基制备 | 第30页 |
| ·电转化农杆菌感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| ·质粒转化农杆菌 | 第31页 |
| ·农杆菌标准培养物的制备 | 第31页 |
| ·侵染和共培养 | 第31-32页 |
| ·筛选培养和植株再生 | 第32-33页 |
| ·转基因大麦植株PCR检测 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-40页 |
| ·KN2基因表达载体的构建 | 第34-37页 |
| ·KN2基因的扩增与T载体连接 | 第34-35页 |
| ·表达载体33011K的构建 | 第35-36页 |
| ·表达载体pCAMBIA33011K向农杆菌AGL1的转化 | 第36-37页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第37-40页 |
| ·农杆菌介导幼胚的转化及植株再生 | 第37-38页 |
| ·转基因大麦植株PCR检测 | 第38-40页 |
| 第四章 讨论 | 第40-42页 |
| 1 大麦幼胚再生体系的建立 | 第40页 |
| 2 表达载体构建中的影响因素 | 第40-41页 |
| 3 农杆菌介导的遗传转化 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-50页 |
| 附录1：缩略语表 | 第50-51页 |
| 附录2：常用培养基及其它试剂和抗生素母液配方 | 第51-53页 |
| 附录3：KN2基因编码序列 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |