| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| ·CHIR99021 研究研究进展 | 第11页 |
| ·Klf4 的研究进展 | 第11-13页 |
| ·Klf4 简介 | 第11-12页 |
| ·KLF4 功能研究进展 | 第12-13页 |
| ·Wnt 信号通路简介 | 第13-18页 |
| ·Wnt 蛋白配体及特性 | 第13页 |
| ·Wnt 通路相关蛋白 | 第13-16页 |
| ·Wnt 信号通路 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-36页 |
| ·试剂材料与仪器 | 第18-23页 |
| ·引物 | 第18页 |
| ·芯片 | 第18页 |
| ·载体、菌株和细胞 | 第18页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第18-20页 |
| ·主要试剂溶液的配置 | 第20-21页 |
| ·主要耗材和仪器 | 第21-22页 |
| ·主要分析工具和网站 | 第22-23页 |
| ·试验方法 | 第23-36页 |
| ·技术路线 | 第23页 |
| ·小鼠总 RNA 和基因组 DNA 的提取 | 第23-25页 |
| ·基因表达谱芯片 | 第25-26页 |
| ·基因表达谱芯片数据分析 | 第26页 |
| ·实时定量 PCR 验证及数据分析 | 第26-27页 |
| ·免疫荧光染色 | 第27-28页 |
| ·碱性磷酸酶染色 | 第28页 |
| ·载体构建 | 第28-32页 |
| ·细胞培养及转染 | 第32-34页 |
| ·双荧光素酶报告基因检测 | 第34页 |
| ·蛋白免疫印迹 | 第34-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-54页 |
| ·总 RNA 和基因组 DNA 提取结果 | 第36页 |
| ·总 RNA 提取结果 | 第36页 |
| ·基因组 DNA 提取结果 | 第36页 |
| ·基因表达谱芯片分析结果 | 第36-42页 |
| ·聚类分析 | 第36-38页 |
| ·差异表达基因的 GO 分析 | 第38-41页 |
| ·差异表达基因的实时定量 PCR 验证 | 第41-42页 |
| ·CHIR99021 促进 Klf4 基因表达 | 第42-47页 |
| ·CHIR99021 处理时间和加药浓度的确定 | 第42-43页 |
| ·CHIR99021 增强 Klf4 基因的蛋白翻译水平 | 第43-45页 |
| ·CHIR99021 增强 Klf4 基因的启动子活性 | 第45-47页 |
| ·CHIR99021 通过激活典型的 Wnt 信号来激活 Klf4 的表达 | 第47-52页 |
| ·Wnt 通路报告载体的验证 | 第48-49页 |
| ·CHIR99021 激活 -catenin 的表达 | 第49-50页 |
| ·过表达 -catenin 激活 Klf4 的表达 | 第50-52页 |
| ·CHIR99021 抑制维甲酸诱导的胚胎干细胞的分化 | 第52-54页 |
| 第四章 研究讨论与总结 | 第54-57页 |
| ·关于 CHIR99021 与差异表达基因 | 第54页 |
| ·关于 klf4 启动子活性讨论 | 第54页 |
| ·关于 CHIR99021 与干细细胞干性维持 | 第54-55页 |
| ·研究总结 | 第55-56页 |
| ·创新点 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 附录 1：mklf4 基因启动子序列及酶切图谱 | 第60-62页 |
| 附录 2：mCtnnb1 基因编码区序列 | 第62-64页 |
| 缩略词 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
