| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-17页 |
| 前言 | 第17-21页 |
| 第一章 p24表达载体的构建及鉴定 | 第21-30页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·引物 | 第21页 |
| ·质粒与菌株 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·主要溶液的配制 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-25页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·PCR反应模板—gag基因的制备 | 第23页 |
| ·PCR反应体系 | 第23页 |
| ·重组质粒p24-pET28a(+)的构建与鉴定 | 第23-24页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第24页 |
| ·转化 | 第24页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第24-25页 |
| ·结果 | 第25-28页 |
| ·PCR | 第25页 |
| ·p24-pET28a(+)重组表达质粒的筛选及鉴定 | 第25-26页 |
| ·测序鉴定 | 第26-28页 |
| ·讨论 | 第28-29页 |
| ·本章小结 | 第29-30页 |
| 第二章 重组蛋白的诱导表达、纯化及鉴定 | 第30-42页 |
| ·材料 | 第30-32页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·人血清样本 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·溶液及培养基配制 | 第30-32页 |
| ·方法 | 第32-34页 |
| ·重组蛋白的诱导表达及产物的SDS-PAGE分析 | 第32页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌中的大量诱导表达 | 第32-33页 |
| ·包涵体的洗涤 | 第33页 |
| ·表达产物的纯化及复性 | 第33-34页 |
| ·表达产物的Western-blot鉴定 | 第34页 |
| ·表达产物的间接ELISA法鉴定 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-40页 |
| ·重组质粒p24-pET28a(+)的表达 | 第35页 |
| ·p24的大量表达及包涵体的洗涤 | 第35-37页 |
| ·重组蛋白的纯化及复性 | 第37-39页 |
| ·重组p24抗原的Western blot鉴定 | 第39页 |
| ·重组p24抗原免疫反应性测定 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 HIV-1 p24抗原时间分辨荧光免疫分析方法的研究 | 第42-59页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·主要材料 | 第42页 |
| ·标本 | 第42页 |
| ·主要溶液 | 第42-43页 |
| ·主要实验仪器 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-49页 |
| ·反应模式的选择 | 第43-44页 |
| ·阴、阳性对照的制备 | 第44页 |
| ·包被 | 第44-45页 |
| ·Eu~(3+)标记抗体的制备 | 第45-47页 |
| ·操作流程 | 第47页 |
| ·方法学评价 | 第47-49页 |
| ·结果 | 第49-54页 |
| ·标记抗体的浓度和蛋白回收率 | 第49页 |
| ·最佳包被量及标记抗体最佳稀释度的选择 | 第49-50页 |
| ·参考值的确定 | 第50-51页 |
| ·剂量-反应曲线 | 第51页 |
| ·自制的p24抗原与市售的p24抗原比较 | 第51-52页 |
| ·特异性分析 | 第52页 |
| ·精密度试验 | 第52-53页 |
| ·抗干扰性分析 | 第53页 |
| ·稳定性试验 | 第53页 |
| ·临床血样检测试验 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-58页 |
| ·本章小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 英文缩写词 | 第66-68页 |
| 硕士期间科研成果 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |