水稻组织特异启动子的克隆及功能分析
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| ·研究问题由来 | 第11页 |
| ·启动子 | 第11-21页 |
| ·启动子的结构 | 第11-14页 |
| ·转录因子 | 第14页 |
| ·植物启动子的分类 | 第14-18页 |
| ·组成型启动子 | 第15-16页 |
| ·诱导型启动子 | 第16页 |
| ·组织特异性启动子 | 第16-18页 |
| ·启动子的分离及克隆方法 | 第18-19页 |
| ·启动子的预测 | 第18页 |
| ·利用PCR技术克隆启动子 | 第18页 |
| ·启动子捕获法克隆启动子 | 第18页 |
| ·聚合酶保护法克隆启动子 | 第18-19页 |
| ·利用启动子探针载体筛选启动子 | 第19页 |
| ·启动子顺式作用元件的研究方法 | 第19-20页 |
| ·缺失分析 | 第19页 |
| ·定点突变 | 第19-20页 |
| ·研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-34页 |
| ·菌株材料 | 第21页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·RT-PCR法鉴定 | 第21-24页 |
| ·RNA的抽提 | 第21-22页 |
| ·RNA质量检测 | 第22页 |
| ·cDNA的获得 | 第22-23页 |
| ·RT-PCR验证候选基因表达模式 | 第23-24页 |
| ·启动子的克隆与植物表达载体构建 | 第24-26页 |
| ·水稻的遗传转化 | 第26-27页 |
| ·转基因植株的阳性检测 | 第27-28页 |
| ·阳性植植株GUS活性的组织化学分析 | 第28-30页 |
| ·P_(12)阳性植株GUS活性检测 | 第30-32页 |
| ·试剂准备 | 第30页 |
| ·测定样品的选取 | 第30-31页 |
| ·总蛋白的提取 | 第31页 |
| ·总蛋白浓度测定 | 第31-32页 |
| ·GUS活性测定 | 第32页 |
| ·表达载体的改造 | 第32-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-55页 |
| ·MH63各组织RNA抽提结果 | 第34页 |
| ·候选基因的表达模式鉴定 | 第34-35页 |
| ·水稻启动子的克隆与植物表达载体的构建 | 第35-40页 |
| ·转基因植株的阳性检测 | 第40页 |
| ·转基因植株的GUS组织化学分析 | 第40-52页 |
| ·P_(12)转基因植株的GUS活性检测 | 第52-53页 |
| ·植物特异性表达载体改造 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-59页 |
| ·启动子在植物基因工程中的运用 | 第55-56页 |
| ·GUS与GFP报告基因 | 第56-57页 |
| ·GUS组织化学检测 | 第57页 |
| ·GUS活性检测 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
