摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
中英文缩略词表 | 第9-10页 |
第1章 前言 | 第10-14页 |
第2章 构建稳定干扰 ECHS1 的 HepG2 细胞株 | 第14-27页 |
·材料 | 第14-17页 |
·细胞株与细胞培养 | 第14页 |
·主要仪器与耗材 | 第14-15页 |
·试剂、抗体 | 第15-17页 |
·实验方法 | 第17-24页 |
·ECHS1 干扰质粒的构建 | 第17-20页 |
·构建稳定干扰 ECHS1 的 HepG2 细胞株 | 第20-24页 |
·统计学分析 | 第24页 |
·结果 | 第24-26页 |
·Real time PCR及Western blot技术检测HepG2细胞株中ECHS1表达 | 第24-26页 |
·讨论 | 第26-27页 |
第3章 ECHS1 基因干扰后对 HepG2 细胞株增殖的影响 | 第27-33页 |
·实验材料 | 第27页 |
·细胞株与细胞培养 | 第27页 |
·试剂 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-28页 |
·CCK-8 法检测 HepG2 细胞增殖情况 | 第27-28页 |
·BrdU 检测细胞增殖情况 | 第28页 |
·Western blot 检测与增殖相关的信号通路蛋白表达 | 第28页 |
·统计学处理 | 第28页 |
·结果 | 第28-31页 |
·ECHS1 促进肝癌细胞 HepG2 的增殖 | 第28-30页 |
·ECHS1 影响 HepG2 细胞周期相关基因的表达 | 第30-31页 |
·讨论 | 第31-33页 |
第4章 ECHS1 基因干扰后对 HepG2 细胞凋亡的影响 | 第33-39页 |
·实验材料 | 第33页 |
·细胞株与细胞培养 | 第33页 |
·试剂 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-34页 |
·流式细胞仪检测细胞凋亡情况 | 第33-34页 |
·TUNEL 定量检测 HepG2 凋亡 | 第34页 |
·Western-blot 检测与凋亡相关的信号通路蛋白表达 | 第34页 |
·统计学处理 | 第34页 |
·实验结果 | 第34-37页 |
·ECHS1 抑制肝癌细胞 HepG2 的凋亡 | 第34-36页 |
·ECHS1 通过影响 AKT 的磷酸化和 Bcl-2 家族蛋白的表达而抑制凋亡 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
第5章 结论及展望 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第45-46页 |
综述 | 第46-51页 |
参考文献 | 第49-51页 |