| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1 苏云金芽胞杆菌 | 第12-13页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的分布 | 第12-13页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的生理生化性质 | 第13页 |
| ·土壤中苏云金芽胞杆菌的分离 | 第13页 |
| 2 苏云金芽胞杆菌的杀虫晶体蛋白 | 第13-19页 |
| ·杀虫Cry蛋白 | 第14-17页 |
| ·Cry蛋白的分类命名 | 第14-15页 |
| ·Cry蛋白的保守区域及结构域 | 第15-17页 |
| ·Cry蛋白的杀虫机制 | 第17页 |
| ·Cyt杀虫蛋白 | 第17-19页 |
| ·Cyt蛋白的分类命名 | 第17-18页 |
| ·Cyt蛋白的结构和杀虫活性 | 第18-19页 |
| 3 杀虫晶体蛋白的鉴定 | 第19-20页 |
| 4 杀虫晶体蛋白的应用与研究进展 | 第20-23页 |
| ·Cry蛋白的应用与研究展望 | 第20-22页 |
| ·Cyt基因蛋白的应用与研究展望 | 第22-23页 |
| 5 立题依据和研究目的以及意义 | 第23-25页 |
| 第二章 模式基因挖掘新方法的建立及新基因的功能验证 | 第25-52页 |
| 1 材料与方法 | 第26-37页 |
| ·材料 | 第26-29页 |
| ·研究中所用的菌株和质粒 | 第26-27页 |
| ·培养基与抗生素 | 第27页 |
| ·仪器设备 | 第27-28页 |
| ·主要实验试剂 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-37页 |
| ·菌株的选择 | 第29页 |
| ·扫描电子显微镜(SEM)对供试菌株的晶体形态观察 | 第29页 |
| ·苏云金芽胞杆菌质粒提取 | 第29-30页 |
| ·基因组的混合测序以及组装 | 第30页 |
| ·杀虫基因的挖掘 | 第30页 |
| ·杀虫基因的扩增以及克隆 | 第30-33页 |
| ·新基因的序列分析 | 第33页 |
| ·新基因的表达载体的构建 | 第33-35页 |
| ·电转化无晶体突变株 | 第35页 |
| ·电转化阳性克隆子的筛选 | 第35-36页 |
| ·阳性转化株的SDS-PAGE及SEM验证 | 第36页 |
| ·重组菌株的生物测定 | 第36-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-49页 |
| ·菌株的选择 | 第37-38页 |
| ·混合质粒测序和数据组装 | 第38页 |
| ·杀虫基因的挖掘 | 第38-39页 |
| ·杀虫基因全长的克隆 | 第39-41页 |
| ·Cry56Aa3、Cry59Ba1和Cry70Aa1蛋白质氨基酸序列分析 | 第41-47页 |
| ·Cry56Aa3蛋白的氨基酸组成 | 第41-43页 |
| ·Cry59Ba1蛋白的氨基酸组成 | 第43-45页 |
| ·Cry70Aa1蛋白的氨基酸组成 | 第45-47页 |
| ·新基因穿梭表达载体的构建 | 第47页 |
| ·阳性转化株的SDS-PAGE及SEM验证 | 第47-48页 |
| ·三个新基因的杀虫活性测定 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-52页 |
| 第三章 西昌、攀枝花Bt菌株的分离和杀虫基因资源的鉴定 | 第52-64页 |
| 1 材料与方法 | 第52-58页 |
| ·材料 | 第52-54页 |
| ·土样采集 | 第52-53页 |
| ·培养基与抗生素 | 第53页 |
| ·仪器与设备 | 第53页 |
| ·主要实验试剂 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-58页 |
| ·土样采集 | 第54页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的分离与纯化 | 第54-55页 |
| ·扫描电镜观察分离菌株的晶体形态 | 第55页 |
| ·苏云金芽胞杆菌晶体蛋白的提取 | 第55页 |
| ·菌株晶体蛋白的SDS-PAGE检测 | 第55页 |
| ·苏云金芽胞杆菌总基因组的提取 | 第55-56页 |
| ·通用引物对菌株基因初筛 | 第56-58页 |
| ·菌株系统发育分析 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-62页 |
| ·菌株的采集以及分离 | 第58-59页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的扫描电镜观察 | 第59页 |
| ·苏云金芽胞杆菌菌株的SDS-PAGE检测 | 第59-60页 |
| ·通用引物鉴定结果 | 第60-61页 |
| ·菌株系统发育分析 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 在读期间发表的科研论文情况 | 第73-74页 |
| 专利申请情况 | 第74-75页 |
| 附录 | 第75页 |
