| 目录 | 第1-5页 |
| 英文缩略词(Abbreviations) | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 实验材料 | 第16-21页 |
| 1 药品和试剂 | 第16-19页 |
| ·药品 | 第16页 |
| ·生化试剂 | 第16页 |
| ·免疫试剂 | 第16-18页 |
| ·溶液配制 | 第18-19页 |
| 2 细胞株、质粒及si-RNA | 第19页 |
| 3 主要仪器 | 第19-21页 |
| 实验方法 | 第21-31页 |
| 1 受试化合物的配制方法 | 第21页 |
| 2 细胞培养 | 第21页 |
| 3 MTT法检测化合物体外对肿瘤细胞的抑制作用 | 第21-22页 |
| 4 pEGFP-N1-ANXA1质粒稳定转染人慢性髓系白血病K562细胞 | 第22-26页 |
| ·pEGFP-N1-ANXA1质粒转化DH5α感受态细菌,小量提取质粒及鉴定 | 第22-23页 |
| ·质粒中量提取 | 第23页 |
| ·G418抗生素筛选浓度的确定 | 第23-24页 |
| ·稳定转染及鉴定 | 第24-26页 |
| 5 激光共聚焦显微镜观察稳定转染情况 | 第26页 |
| 6 Western Blot法检测稳定转染后三株细胞中相关蛋白的表达 | 第26-28页 |
| ·收集细胞、总蛋白提取及定量 | 第26页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第26-28页 |
| 7 MTS检测细胞增殖状况 | 第28页 |
| 8 流式细胞术检测细胞周期分布 | 第28页 |
| 9 免疫共沉淀检测稳定转染后蛋白的相互作用 | 第28-29页 |
| 10 RNA干扰实验 | 第29-30页 |
| ·瞬时干扰效率的检测 | 第29页 |
| ·MTT法检测瞬时干扰后药物对三株细胞的抑制作用 | 第29页 |
| ·Western Blot法检测瞬时干扰后三株细胞中相关蛋白的表达 | 第29-30页 |
| ·免疫共沉淀法检测瞬时干扰后蛋白的相互作用 | 第30页 |
| 11 统计学处理 | 第30-31页 |
| 结果 | 第31-47页 |
| 1 细胞水平观察JIN系列化合物对K562、Ba/F3 P210(WT、Y253F、T315I)和Ba/F3 P190 E255K细胞的生长抑制作用 | 第31-32页 |
| 2 耐Imatinib的K562细胞模型的相关蛋白表达鉴定 | 第32-34页 |
| 3 K562-pEGFP-N1和K562-pEGFP-N1-ANXA1稳定转染细胞株的建立 | 第34-39页 |
| ·pEGFP-N1-ANXA1质粒的小量提取及鉴定 | 第34-35页 |
| ·G418抗生素筛选浓度的确定 | 第35页 |
| ·转染预实验 | 第35-36页 |
| ·建立K562-pEGFP-N1和K562-pEGFP-N1-ANXA1稳定转染细胞株及筛选单克隆 | 第36-37页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察稳定转染情况 | 第37-38页 |
| ·Westem Blot法鉴定蛋白表达 | 第38-39页 |
| 4 Imatinib对K562,K562-pEGFP-N1及K562-pEGFP-N1-ANXA1细胞的生长抑制作用 | 第39-40页 |
| 5 检测K562, K562-pEGFP-N1及K562-pEGFP-N1-ANXA1细胞的增殖情况 | 第40-41页 |
| 6 流式细胞术检测K562, K562-pEGFP-N1及K562-pEGFP-N1-ANXA1细胞的细胞周期分布 | 第41-42页 |
| 7 K562, K562-pEGFP-N1及K562-pEGFP-N1-ANXA1细胞中相关蛋白的表达 | 第42-43页 |
| 8 免疫共沉淀检测ANXA1相互作用 | 第43页 |
| 9 瞬时干扰效率的检测 | 第43-44页 |
| 10 MTT法检测瞬时干扰后药物对三株细胞的抑制作用 | 第44-45页 |
| 11 Western Blot法检测瞬时干扰后三株细胞中相关蛋白的表达 | 第45-46页 |
| 12 免疫共沉淀法检测瞬时干扰后蛋白的相互作用 | 第46-47页 |
| 讨论 | 第47-57页 |
| 结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-70页 |
| 论文综述 | 第70-80页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
| 个人简历 | 第82-83页 |
