| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-27页 |
| ·MiRNA背景研究概况 | 第11-13页 |
| ·MiRNA的生物合成法 | 第13-15页 |
| ·基因结构和miRNA转录 | 第13-14页 |
| ·MiRNA的成熟化 | 第14页 |
| ·Drosha诱导的细胞核内的加工 | 第14页 |
| ·转出蛋白-5诱导核输出 | 第14页 |
| ·Dicer诱导细胞质加工 | 第14-15页 |
| ·MiRNA生物合成中的协同作用因子 | 第15页 |
| ·MiRNA的功能 | 第15-16页 |
| ·检测miRNA的目的 | 第16页 |
| ·MiRNA检测的传统方法 | 第16-20页 |
| ·微阵列方法 | 第16-17页 |
| ·Northern印迹法 | 第17-18页 |
| ·qRT-PCR方法 | 第18-19页 |
| ·深度测序法 | 第19-20页 |
| ·MiRNA检测的新方法 | 第20-24页 |
| ·酶辅助信号放大检测miRNA | 第20-22页 |
| ·基于链置换反应检测miRNA | 第22-23页 |
| ·基于纳米材料检测miRNA | 第23-24页 |
| ·MiRNA在癌症诊断中的研究与应用 | 第24-26页 |
| ·实验目的及意义 | 第26-27页 |
| 第二章 基于扩增产生G-四联体DNA核酶检测miRNA技术研究 | 第27-41页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·实验原理 | 第27-28页 |
| ·实验部分 | 第28-34页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第28-29页 |
| ·实验步骤 | 第29-34页 |
| ·实验结果和讨论 | 第34-39页 |
| ·扩增时间优化 | 第34-35页 |
| ·不同模板浓度对实验结果的影响 | 第35-36页 |
| ·不同浓度血红素对实验结果的影响 | 第36页 |
| ·选择性实验 | 第36-37页 |
| ·灵敏度实验 | 第37-38页 |
| ·实样检测 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-41页 |
| 第三章 双链DNA介导合成荧光纳米铜簇定量检测miRNA | 第41-62页 |
| ·引言 | 第41-43页 |
| ·实验原理 | 第43-44页 |
| ·实验部分 | 第44-51页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第44-45页 |
| ·实验步骤 | 第45-51页 |
| ·实验结果与讨论 | 第51-60页 |
| ·合成荧光纳米铜探针选择 | 第51-52页 |
| ·DNA3浓度优化 | 第52-53页 |
| ·铜离子(Cu~(2+))浓度优化 | 第53页 |
| ·模板(T)浓度优化 | 第53-54页 |
| ·恒温指数扩增时间优化 | 第54-55页 |
| ·选择性实验 | 第55页 |
| ·加入不同浓度miR-200b对实验结果的影响 | 第55-56页 |
| ·加入标准miRNA样品计算回收率 | 第56页 |
| ·模拟生物组分进行特异性实验 | 第56-57页 |
| ·在扩增体系中不加入DNA3对实验结果的影响 | 第57页 |
| ·不同浓度的DNA3/DNA4对产生荧光纳米铜的影响 | 第57-58页 |
| ·荧光纳米铜粒子表征 | 第58-60页 |
| ·产生荧光纳米铜粒子动态表征 | 第60页 |
| ·小结 | 第60-62页 |
| 第五章 总结与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 附录1 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |