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MicroRNA-18a在结肠癌HCT116细胞中对ATM基因表达和自噬的调控作用

中文摘要第1-13页
ABSTRACT第13-37页
Chapter 1第37-123页
   ·Introduction第37-80页
  Preface第37-40页
     ·Autophagy第40-44页
     ·Autophagy and disease第44-56页
     ·Molecular machinery of autophagy第56-70页
     ·Regulation of autophagy第70-80页
   ·ATM第80-94页
     ·ATM and DNA repair第82-87页
     ·ATM in Cell Cycle regulation第87-89页
     ·ATM and autophagy第89-94页
   ·MicroRNAs (miRNAs)第94-123页
     ·MicroRNA biogenesis第96-104页
     ·Mode of gene repression by MicroRNAs第104-115页
     ·Biological functions and future implications of microRNAs第115-123页
Chapter 2. Materials and Methods第123-153页
   ·- Materials and Equipment第123-126页
     ·Materials第123-125页
     ·Equipment第125-126页
     ·Cell lines第126页
   ·Methods第126-147页
     ·Cells preservation第126-127页
     ·Recovery of cells第127页
     ·Reagents preparation第127-129页
     ·Transformation procedure steps are as follwoing第129页
     ·Plasmid purification第129页
     ·Detection of the concentration of the plasmid第129-130页
     ·- Vector construction第130-138页
     ·Transfection第138-140页
     ·Western Blotting第140-147页
       ·Buffers and other materials used during western blotting process wereprepared as follows:-第140-145页
       ·- Protein harvesting process第145页
       ·protein concentration measurement—standard curve第145页
       ·SDS-PAGE Gel preparation第145-146页
       ·Western Blot process第146-147页
   ·Ionizing radiation第147-148页
   ·Real-time PCR第148-149页
   ·GFP-LC3 localization assay第149-150页
   ·Cell viability assay (CCK-8)第150页
   ·Clonogenic assay第150-151页
   ·Statistical analyses第151-153页
Chapter 3. Results第153-177页
   ·- Chose miR-18a that could bind to the 3′-UTR of ATM第153-155页
   ·- miR-18a targets and upregulates ATM gene expression第155-160页
   ·-miR-18a expression was up-regulated by ionizing radiation第160-164页
   ·-miR-18a overexpression promotes autophagy第164-171页
   ·-miR-18a overexpression inhibits mTORC1 activity第171-172页
   ·-miR-18a overexpression enhances HCT116 cells radiosensitivity第172-174页
   ·-miR-18a overexpression inhibits the growth of colon cancer cells第174-177页
Chapter 4第177-237页
   ·Discussion第177-226页
   ·Summary and conclusions第226-229页
   ·Future perspectives第229-235页
   ·The Novel findings in this study第235-237页
References第237-327页
Appendix第327-331页
Acknowledgements第331页

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