中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
第一章 :前言 | 第12-45页 |
·KGF-1研究进展 | 第12-27页 |
·KGF-1概述 | 第12-14页 |
·KGF-1药理学活性 | 第14-20页 |
·KGF-1病理活性 | 第20-23页 |
·KGF-1工程化研究 | 第23-25页 |
·安全性和毒性研究 | 第25-26页 |
·应用 | 第26-27页 |
·昆虫细胞表达系统的研究现状 | 第27-44页 |
·昆虫细胞培养 | 第27-32页 |
·昆虫细胞生物反应器培养 | 第32-37页 |
·杆状病毒载体的改进 | 第37-39页 |
·昆虫细胞杆状病毒表达系统的现状 | 第39-44页 |
·本研究的目的和意义 | 第44-45页 |
第二章 :KGF-1基因优化及病毒载体构建 | 第45-68页 |
·材料 | 第45页 |
·实验材料 | 第45页 |
·仪器设备 | 第45页 |
·方法 | 第45-56页 |
·目的基因优化 | 第45页 |
·转移载体构建 | 第45-53页 |
·穿梭载体构建 | 第53-56页 |
·结果与分析 | 第56-67页 |
·序列改造前后序列比对 | 第56-59页 |
·转移载体及穿梭载体的构建 | 第59-67页 |
·小结 | 第67-68页 |
第三章 :KGF-1的表达及纯化 | 第68-84页 |
·材料与设备 | 第68页 |
·实验材料 | 第68页 |
·仪器设备 | 第68页 |
·方法 | 第68-74页 |
·重组杆状病毒的获得 | 第68-70页 |
·病毒滴度的测定 | 第70-71页 |
·蛋白表达条件的摸索 | 第71-72页 |
·重组蛋白的纯化 | 第72-73页 |
·重组蛋白的鉴定 | 第73-74页 |
·结果与分析 | 第74-83页 |
·重组杆状病毒的获得 | 第74页 |
·不同MOI对活细胞率的影响 | 第74-77页 |
·信号肽对KGF-1蛋白表达的影响 | 第77-79页 |
·细胞数对KGF-1蛋白的表达的影响 | 第79-80页 |
·蛋白纯化及稳定性 | 第80-82页 |
·HPLC鉴定 | 第82页 |
·MALDI-TOF鉴定 | 第82-83页 |
小结 | 第83-84页 |
第四章 :rhKGF-1的活性研究 | 第84-88页 |
·材料 | 第84页 |
·试剂设备 | 第84页 |
·方法 | 第84-85页 |
·HaCat细胞培养 | 第84页 |
·BaF3细胞培养及检测方法 | 第84-85页 |
·结果 | 第85-87页 |
·细胞培养 | 第85-86页 |
·HaCat细胞培养及检测结果 | 第86页 |
·BaF3检测结果 | 第86-87页 |
·小结 | 第87-88页 |
第五章 :rhKGF-1与急性肝损伤 | 第88-104页 |
·材料 | 第89页 |
·材料 | 第89页 |
·试剂及溶液配制 | 第89页 |
·仪器设备 | 第89页 |
·方法 | 第89-92页 |
·急性肝损伤模型的建立 | 第89-90页 |
·rhKGF-1对急性肝损伤的保护 | 第90页 |
·血清中ALT和AST分析 | 第90页 |
·肝组织中MDA和SOD的测定 | 第90页 |
·HE染色 | 第90-91页 |
·rhKGF-1对人肝细胞的作用 | 第91-92页 |
·结果与分析 | 第92-102页 |
·血清中ALT和AST的分析 | 第92-93页 |
·组织中MDA和SOD的分析 | 第93-95页 |
·小鼠肝组织切片HE染色 | 第95-96页 |
·CCl_4诱导肝细胞损伤后上清的变化 | 第96-98页 |
·KGF-1对肝细胞增殖的影响 | 第98-101页 |
·KGF-1蛋白对CCl_4诱导的人正常肝细胞HL7702损伤的作用 | 第101-102页 |
·小结 | 第102-104页 |
第七章 讨论 | 第104-107页 |
结论 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-123页 |
附录 | 第123-129页 |
致谢 | 第129-130页 |
在学期间发表学术论文情况 | 第130页 |