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角质细胞生长因子-1(KGF-1)在昆虫细胞中的表达及其活性研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-12页
第一章 :前言第12-45页
   ·KGF-1研究进展第12-27页
     ·KGF-1概述第12-14页
     ·KGF-1药理学活性第14-20页
     ·KGF-1病理活性第20-23页
     ·KGF-1工程化研究第23-25页
     ·安全性和毒性研究第25-26页
     ·应用第26-27页
   ·昆虫细胞表达系统的研究现状第27-44页
     ·昆虫细胞培养第27-32页
     ·昆虫细胞生物反应器培养第32-37页
     ·杆状病毒载体的改进第37-39页
     ·昆虫细胞杆状病毒表达系统的现状第39-44页
   ·本研究的目的和意义第44-45页
第二章 :KGF-1基因优化及病毒载体构建第45-68页
   ·材料第45页
     ·实验材料第45页
     ·仪器设备第45页
   ·方法第45-56页
     ·目的基因优化第45页
     ·转移载体构建第45-53页
     ·穿梭载体构建第53-56页
   ·结果与分析第56-67页
     ·序列改造前后序列比对第56-59页
     ·转移载体及穿梭载体的构建第59-67页
   ·小结第67-68页
第三章 :KGF-1的表达及纯化第68-84页
   ·材料与设备第68页
     ·实验材料第68页
     ·仪器设备第68页
   ·方法第68-74页
     ·重组杆状病毒的获得第68-70页
     ·病毒滴度的测定第70-71页
     ·蛋白表达条件的摸索第71-72页
     ·重组蛋白的纯化第72-73页
     ·重组蛋白的鉴定第73-74页
   ·结果与分析第74-83页
     ·重组杆状病毒的获得第74页
     ·不同MOI对活细胞率的影响第74-77页
     ·信号肽对KGF-1蛋白表达的影响第77-79页
     ·细胞数对KGF-1蛋白的表达的影响第79-80页
     ·蛋白纯化及稳定性第80-82页
     ·HPLC鉴定第82页
     ·MALDI-TOF鉴定第82-83页
 小结第83-84页
第四章 :rhKGF-1的活性研究第84-88页
   ·材料第84页
   ·试剂设备第84页
   ·方法第84-85页
     ·HaCat细胞培养第84页
     ·BaF3细胞培养及检测方法第84-85页
   ·结果第85-87页
     ·细胞培养第85-86页
     ·HaCat细胞培养及检测结果第86页
     ·BaF3检测结果第86-87页
   ·小结第87-88页
第五章 :rhKGF-1与急性肝损伤第88-104页
   ·材料第89页
     ·材料第89页
     ·试剂及溶液配制第89页
     ·仪器设备第89页
   ·方法第89-92页
     ·急性肝损伤模型的建立第89-90页
     ·rhKGF-1对急性肝损伤的保护第90页
     ·血清中ALT和AST分析第90页
     ·肝组织中MDA和SOD的测定第90页
     ·HE染色第90-91页
     ·rhKGF-1对人肝细胞的作用第91-92页
   ·结果与分析第92-102页
     ·血清中ALT和AST的分析第92-93页
     ·组织中MDA和SOD的分析第93-95页
     ·小鼠肝组织切片HE染色第95-96页
     ·CCl_4诱导肝细胞损伤后上清的变化第96-98页
     ·KGF-1对肝细胞增殖的影响第98-101页
     ·KGF-1蛋白对CCl_4诱导的人正常肝细胞HL7702损伤的作用第101-102页
   ·小结第102-104页
第七章 讨论第104-107页
结论第107-108页
参考文献第108-123页
附录第123-129页
致谢第129-130页
在学期间发表学术论文情况第130页

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