大豆胚尖再生体系的优化及EPSPS基因遗传转化的研究
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-20页 |
| ·研究的目的和意义 | 第8-9页 |
| ·大豆组织培养再生体系的研究进展 | 第9-11页 |
| ·不定芽器官发生体系 | 第9-10页 |
| ·体细胞胚胎发生体系 | 第10-11页 |
| ·原生质体再生体系 | 第11页 |
| ·大豆遗传转化的主要方法 | 第11-15页 |
| ·农杆菌介导法 | 第11-12页 |
| ·基因枪法 | 第12-13页 |
| ·电激法 | 第13页 |
| ·聚乙二醇法 | 第13-14页 |
| ·花粉管通道法 | 第14页 |
| ·超声波辅助农杆菌转化法 | 第14-15页 |
| ·大豆抗除草剂遗传转化的研究 | 第15-17页 |
| ·抗除草剂大豆的研究进展 | 第15页 |
| ·草甘膦的作用机理 | 第15-17页 |
| ·抗除草剂大豆的实现方式 | 第17页 |
| ·农杆菌介导大豆遗传转化的影响因素 | 第17-20页 |
| ·基因型 | 第17-18页 |
| ·外植体类型 | 第18页 |
| ·农杆菌菌株和质粒载体类型 | 第18页 |
| ·筛选剂和筛选方式 | 第18-19页 |
| ·培养基和培养条件 | 第19-20页 |
| 第二章 大豆胚尖再生体系的建立 | 第20-32页 |
| ·材料和方法 | 第20-24页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·主要试剂配置 | 第20页 |
| ·大豆胚尖再生体系的基本操作程序 | 第20-22页 |
| ·大豆胚尖再生体系的优化 | 第22-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-29页 |
| ·诱导培养基中 6-BA 浓度的确定 | 第24页 |
| ·伸长培养基中 6-BA 和 IBA 浓度的确定 | 第24-25页 |
| ·生根培养基中 IBA 浓度的确定 | 第25-26页 |
| ·基因型对胚尖再生体系的影响 | 第26页 |
| ·筛选剂草甘膦浓度的确定 | 第26-29页 |
| ·讨论与小结 | 第29-32页 |
| ·6-BA 对不定芽诱导的影响 | 第29页 |
| ·6-BA 和 IBA 对不定芽伸长的影响 | 第29-30页 |
| ·IBA 对不定芽生根的影响 | 第30页 |
| ·不同基因型对大豆胚尖再生体系的影响 | 第30页 |
| ·确定草甘膦浓度的必要性 | 第30-32页 |
| 第三章 农杆菌介导大豆胚尖遗传转化体系的研究 | 第32-49页 |
| ·材料和方法 | 第32-40页 |
| ·植物材料和菌株材料 | 第32页 |
| ·主要试剂配制方法 | 第32-34页 |
| ·质粒提取与检测 | 第34-35页 |
| ·农杆菌介导大豆胚尖遗传转化的基本程序 | 第35-38页 |
| ·农杆菌介导大豆胚尖遗传转化体系的优化 | 第38-39页 |
| ·抗性植株的检测 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-46页 |
| ·质粒 DNA 的检测 | 第40-41页 |
| ·预培养时间对抗性芽再生的影响 | 第41页 |
| ·菌液浓度和侵染时间对转化的影响 | 第41-43页 |
| ·共培养培养基中 AS 对转化的影响 | 第43页 |
| ·共培养培养基中 6-BA 对抗性芽再生的影响 | 第43-44页 |
| ·共培养温度和时间对转化的影响 | 第44-45页 |
| ·抗性植株的草甘膦涂抹检验 | 第45页 |
| ·抗性植株的 PCR 检测 | 第45-46页 |
| ·讨论与小结 | 第46-49页 |
| ·预培养时间对抗性芽再生的影响 | 第46页 |
| ·菌液浓度和侵染时间对转化的影响 | 第46-47页 |
| ·共培养培养基中 AS 对转化的影响 | 第47页 |
| ·共培养培养基中 6-BA 对抗性芽再生的影响 | 第47-48页 |
| ·共培养温度和时间对抗性芽再生的影响 | 第48-49页 |
| 第四章 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第56-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |