| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-27页 |
| 1 热休克蛋白 | 第14页 |
| 2 HSP70 家族的分类 | 第14-15页 |
| 3 HSP70 的分子结构 | 第15-16页 |
| 4 HSP70 的生物学功能 | 第16-17页 |
| ·细胞保护作用 | 第16-17页 |
| ·分子伴侣功能 | 第17页 |
| 5 HSP70 的基因调控 | 第17-19页 |
| ·转录水平的调控 | 第17-19页 |
| ·翻译水平的调控 | 第19页 |
| 6 HSP70 在动物热应激中的作用 | 第19-22页 |
| ·保护细胞作用 | 第20页 |
| ·使生物获得耐热性 | 第20-21页 |
| ·抗氧化作用 | 第21-22页 |
| 7 HSP70 及其mRNA 的检测方法 | 第22-25页 |
| ·HSP70 的检测方法 | 第22-23页 |
| ·HSP70m RNA 的检测方法 | 第23-25页 |
| 8 HSP70 的应用和展望 | 第25页 |
| 9 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 第二部分 试验研究 | 第27-70页 |
| 试验一 不同热应激强度（时间）对大鼠血清抗氧化能力的影响 | 第27-32页 |
| 1 材料与方法 | 第27-28页 |
| ·试验动物 | 第27页 |
| ·试验处理 | 第27-28页 |
| ·不同热应激强度 | 第27页 |
| ·不同热应激时间 | 第27-28页 |
| ·样品采集 | 第28页 |
| ·仪器设备 | 第28页 |
| ·测定指标与方法 | 第28页 |
| ·数据处理 | 第28页 |
| 2 结果 | 第28-29页 |
| ·不同热应激强度下大鼠血清中的抗氧化指标 | 第28-29页 |
| ·不同热应激时间下大鼠血清中的抗氧化指标 | 第29页 |
| 3 讨论 | 第29-32页 |
| 试验二 不同热应激强度（时间）对大鼠肝脏HSP70 表达的动态研究 | 第32-46页 |
| 1 材料与方法 | 第32-37页 |
| ·试验动物 | 第32页 |
| ·试验处理 | 第32页 |
| ·仪器设备 | 第32页 |
| ·试验试剂 | 第32-33页 |
| ·药品和酶 | 第32-33页 |
| ·常规溶液及试剂配制 | 第33页 |
| ·方法与步骤 | 第33-37页 |
| ·肝脏蛋白样品的制备 | 第33-34页 |
| ·样品总蛋白浓度测定 | 第34-35页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第35-36页 |
| ·免疫转印 | 第36页 |
| ·数据统计与分析 | 第36-37页 |
| 2 结果 | 第37-42页 |
| ·样品上样量 | 第37页 |
| ·不同热应激条件下HSP70 的检测结果 | 第37-42页 |
| ·不同热应激强度时HSP70 的检测结果 | 第37-38页 |
| ·HSP70 表达量测定结果 | 第38-39页 |
| ·不同热应激时间时HSP70 的检测结果 | 第39-41页 |
| ·HSP70 表达量测定结果 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-46页 |
| ·HSP70 在热应激中的表达 | 第42-43页 |
| ·不同热应激条件对大鼠肝脏HSP70 表达规律的分析 | 第43-44页 |
| ·热应激时肝脏HSP70 的表达的原因分析 | 第44-46页 |
| 试验三 不同热应激强度（时间）对大鼠肝脏HSP70mRNA 定量研究 | 第46-70页 |
| 1 材料与方法 | 第46-52页 |
| ·试验动物 | 第46页 |
| ·试验处理 | 第46页 |
| ·仪器设备 | 第46页 |
| ·试验试剂 | 第46-47页 |
| ·药品和酶 | 第46-47页 |
| ·常规溶液及试剂配制 | 第47页 |
| ·相关容器的处理 | 第47页 |
| ·试验方法与步骤 | 第47-49页 |
| ·总RNA 的提取 | 第47-48页 |
| ·总RNA 的分析和定量 | 第48页 |
| ·总RNA 的纯化 | 第48页 |
| ·合成cDNA 第一链 | 第48-49页 |
| ·半定量RT-PCR | 第49-50页 |
| ·引物设计 | 第49页 |
| ·PCR 反应体系 | 第49-50页 |
| ·控制引物对之间竞争 | 第50页 |
| ·确定循环数 | 第50页 |
| ·电泳及光密度值分析 | 第50页 |
| ·Real-time PCR | 第50-52页 |
| ·引物设计 | 第50-51页 |
| ·标准曲线模板制备 | 第51页 |
| ·荧光定量PCR 反应体系 | 第51-52页 |
| ·数据处理 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-66页 |
| ·总RNA 提取与检测结果 | 第52-53页 |
| ·半定量RT–PCR 检测结果 | 第53-59页 |
| ·引物间扩增竞争对PCR 的影响 | 第53页 |
| ·循环数对平台期影响 | 第53-54页 |
| ·以β-Actin 为内标对HSP70 基因定量的结果 | 第54-59页 |
| ·Real-time PCR 检测结果 | 第59-64页 |
| ·Real-time PCR 标准曲线的建立 | 第59-61页 |
| ·以β-Actin 为内标对HSP70 基因定量的结果 | 第61-62页 |
| ·HSP70mRNA 转录量检测结果 | 第62-64页 |
| ·Real-time PCR 和半定量RT-PCR 基因检测结果的比较 | 第64页 |
| ·HSP70m RNA 转录量与HSP70 表达量的比较 | 第64-66页 |
| 3 讨论 | 第66-70页 |
| ·半定量RT-PCR 检测基因表达 | 第66页 |
| ·Real-time PCR 检测基因表达 | 第66-67页 |
| ·对不同热应激处理大鼠肝脏HSP70mRNA 定量的分析 | 第67-70页 |
| 全文结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
