| 英文缩写词表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-29页 |
| 1 基因打靶技术 | 第12-21页 |
| ·基因打靶概念和原理 | 第12页 |
| ·基因打靶技术的发展简史 | 第12-14页 |
| ·基因打靶主要技术环节 | 第14-19页 |
| ·基因打靶技术在人类疾病小鼠模型研究中的应用 | 第19-21页 |
| 2 核磷蛋白 | 第21-27页 |
| ·NPM 的结构与功能 | 第22-23页 |
| ·NPM 与人类肿瘤 | 第23-26页 |
| ·NPM 基因小鼠模型研究进展 | 第26-27页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 NPM 条件基因打靶载体的构建 | 第29-42页 |
| 1 材料方法 | 第29-31页 |
| ·质粒和菌株 | 第29-30页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第30-31页 |
| ·常规分子生物学操作 | 第31页 |
| 2 实验结果 | 第31-39页 |
| ·NPM 条件基因剔除载体构建策略和LoxP 插入位点的选择 | 第31-34页 |
| ·打靶载体的构建和酶切鉴定 | 第34-39页 |
| 3 讨论 | 第39-42页 |
| ·基因打靶载体的构建原则 | 第39-40页 |
| ·构建NPM 条件基因打靶载体实验过程中遇到的问题 | 第40页 |
| ·NPM 条件剔除载体打靶位点选择 | 第40页 |
| ·NPM 条件基因打靶载体初步验证 | 第40-42页 |
| 第三章 中靶ES 细胞的筛选和鉴定 | 第42-51页 |
| 1 材料与方法 | 第42-47页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·线性化打靶载体DNA 的制备 | 第43页 |
| ·ES 细胞的常规培养 | 第43-44页 |
| ·电击法转染ES 细胞 | 第44页 |
| ·阳性ES 克隆的挑取 | 第44-45页 |
| ·阳性ES 克隆的冻存 | 第45页 |
| ·ES 克隆基因组DNA 的制备 | 第45-46页 |
| ·DNA 放射性探针的标记和纯化 | 第46页 |
| ·Southern blot 法鉴定中靶ES 细胞 | 第46-47页 |
| 2 实验结果 | 第47-49页 |
| ·Southern blot 探针的制备及其鉴定 | 第47-48页 |
| ·打靶载体线性化 | 第48页 |
| ·中靶ES 细胞的PCR 鉴定 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| ·Southern blot 探针的设计 | 第49-50页 |
| ·中靶ES 细胞的鉴定 | 第50页 |
| ·关于同源重组频率 | 第50-51页 |
| 总结 | 第51-52页 |
| 下一步工作 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
