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经典WNT信号通路关键基因在人胎肺中的表达

中文摘要第1-3页
Abstract第3-4页
中文文摘第4-7页
目录第7-10页
绪论第10-22页
 1.课题背景第10页
 2.哺乳动物肺器官发育的主要分期第10-11页
 3.经典WNT信号通路调控哺乳动物肺器官发育的研究进展第11-19页
 4. WNT信号通路与肺部疾病第19-21页
 5.本课题的意义及创新之处第21-22页
第一章 材料与方法第22-42页
   ·实验材料第22-25页
     ·菌株和载体第22页
     ·细胞和实验胚胎第22页
     ·实验仪器与设备第22-23页
     ·主要实验药品及试剂第23-25页
   ·试剂配制第25-30页
     ·分子克隆试剂第25页
     ·组织学试剂第25页
     ·原位杂交试剂第25-28页
     ·细胞培养试剂第28页
     ·Western Blot试剂第28-30页
   ·实验方法第30-42页
     ·胚胎的取材第30页
     ·总RNA抽提第30-31页
     ·逆转录cDNA(按照M-MLV RTase cDNA Synthesis Kit说明操作)第31页
     ·Real-time PCR步骤第31-32页
     ·质粒载体构建第32-34页
     ·RNA探针制备第34-35页
     ·原位杂交第35-37页
     ·HE染色步骤第37-38页
     ·细胞培养第38页
     ·组织体外培养第38-39页
     ·Western Blot检测第39-42页
第二章 实验结果第42-64页
   ·人胎肺发育时期经典WNT信号通路关键基因的表达量检测第42-48页
     ·人胎肺组织RNA的提取第42页
     ·引物扩增效率检测第42-46页
     ·人胎肺发育时期经典WNT信号通路关键基因表达量的检测第46-48页
   ·人胎肺发育时期经典WNT信号通路关键基因表达模式的检测第48-60页
     ·经典WNT信号通路关键基因质粒载体的构建第48-51页
     ·经典WNT信号通路关键基因RNA探针的制备第51-54页
     ·人胎肺组织形态观察第54页
     ·经典WNT信号通路胞外配体在人胎肺组织中的表达模式第54-55页
     ·经典WNT信号通路受体在人胎肺组织中的表达模式第55-56页
     ·经典WNT信号通路调控器在人胎肺组织中的表达模式第56-58页
     ·经典WNT信号通路转录因子和抑制物在人胎肺组织中表达模式第58-60页
   ·人胎肺发育时期经典WNT信号通路的功能研究第60-64页
     ·CHIR-99021在A549细胞系中能激活经典WNT信号通路第60-61页
     ·经典WNT信号通路被CHIR-99021激活后对人胎肺发育的影响第61-64页
第三章 讨论第64-70页
   ·经典WNT信号通路在人胎肺发育过程中的调控作用第64-66页
   ·经典WNT信号通路在人和小鼠胎肺发育时期表达模式的比较第66-67页
   ·经典WNT信号通路在人肺发育及相关疾病研究中的临床意义第67-70页
第四章 结论第70-72页
   ·经典WNT信号通路关键基因在人胎肺发育时期的表达量第70页
   ·经典WNT信号通路关键基因在人胎肺发育时期的表达模式第70-71页
   ·经典WNT信号通路对人胎肺上皮细胞分化的调控作用第71-72页
附录1 英文缩略词表第72-74页
附录2 Real-time PCR引物表第74-76页
附录3 原位杂交模板质粒构建引物表第76-78页
附录4 质粒测序比对结果第78-82页
参考文献第82-88页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第88-90页
致谢第90-92页
个人简历第92-94页

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