| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| ·课题的提出 | 第11-12页 |
| ·前人研究进展 | 第12-19页 |
| ·植物单宁研究概述 | 第12-13页 |
| ·柿单宁结构及组成研究进展 | 第13-14页 |
| ·柿单宁合成相关基因研究进展 | 第14-16页 |
| ·柿单宁凝固相关基因及脱涩机理研究进展 | 第16-17页 |
| ·抑制消减杂交技术研究概况 | 第17-19页 |
| ·本课题研究内容 | 第19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-33页 |
| ·试验材料 | 第20-21页 |
| ·植物材料和菌种 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·细菌培养基 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-33页 |
| ·植物材料准备 | 第21-22页 |
| ·柿单宁含量测定 | 第22页 |
| ·溶性单宁含量测定 | 第22页 |
| ·不溶性单宁含量测定 | 第22页 |
| ·抑制消减杂交 | 第22-30页 |
| ·总RNA提取 | 第22-24页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第24页 |
| ·cDNA第二链合成 | 第24-25页 |
| ·Rsa Ⅰ酶切 | 第25-26页 |
| ·接头连接 | 第26-27页 |
| ·接头连接效率检测 | 第27页 |
| ·第一次杂交 | 第27-28页 |
| ·第二次杂交 | 第28页 |
| ·第一轮PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·第二轮PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·利用actin引物检测消减效率 | 第30页 |
| ·消减文库的生成 | 第30-33页 |
| ·PCR扩增产物的纯化回收 | 第30-31页 |
| ·回收产物连接载体 | 第31页 |
| ·大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第31页 |
| ·转化 | 第31-32页 |
| ·消减文库质量分析 | 第32页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-41页 |
| ·果实单宁含量测定 | 第33页 |
| ·果实总RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·消减文库的构建 | 第34-41页 |
| ·柿果实ds cDNA的扩增 | 第34页 |
| ·柿果实ds cDNA酶切前后的检测 | 第34-35页 |
| ·接头连接效率检测 | 第35-36页 |
| ·消减杂交后两次PCR的结果分析 | 第36页 |
| ·消减效率分析 | 第36-37页 |
| ·文库插入片段检测 | 第37页 |
| ·序列分析 | 第37-41页 |
| 4 讨论 | 第41-49页 |
| ·柿果实总RNA的提取 | 第41-42页 |
| ·抑制消减文库构建和文库质量 | 第42-43页 |
| ·柿果实脱涩相关基因 | 第43-48页 |
| ·进一步研究计划 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-59页 |
| 致谢 | 第59页 |