| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一部分 脂肪酸延长酶1FAE1基因的克隆,序列分析和中间载体构建 | 第12-53页 |
| 1 材料 | 第12-15页 |
| ·实验材料 | 第12页 |
| ·菌株和载体 | 第12-13页 |
| ·试剂 | 第13页 |
| ·试剂配方 | 第13-15页 |
| 2 方法 | 第15-21页 |
| ·引物设计 | 第15页 |
| ·甘蓝型油菜总DNA提取 | 第15-16页 |
| ·PCR反应扩增FAE1片段 | 第16页 |
| ·PCR产物的回收 | 第16-17页 |
| ·利用pMD18-T载体克隆FAE1片段 | 第17-19页 |
| ·中间载体pBluescript-SK(pSK)的建立 | 第19-21页 |
| 3 结果与分析 | 第21-51页 |
| ·甘蓝型油菜总DNA的提取 | 第21-22页 |
| ·甘蓝型油菜脂肪酸延长酶1FAE1基因的扩增 | 第22-23页 |
| ·pMD18-FAE1重组质粒鉴定 | 第23-24页 |
| ·甘蓝型油菜FAE1基因全长cDNA的核酸序列分析 | 第24-25页 |
| ·FAE1基因序列同源性分析 | 第25-38页 |
| ·甘蓝型油菜FAE1基因推导蛋白质序列 | 第38-39页 |
| ·FAE1推导蛋白质序列结构分析 | 第39-50页 |
| ·中间载体pSK-FAE1的构建 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 第二部分 甘蓝型油菜脂肪酸延长酶FAE1的原核表达与初步分离纯化 | 第53-71页 |
| 1 材料 | 第53-56页 |
| ·菌株和载体 | 第53-54页 |
| ·试剂 | 第54页 |
| ·试剂配方 | 第54-56页 |
| 2 方法 | 第56-62页 |
| ·GTK-BnFAE1表达载体的构建 | 第56-58页 |
| ·GST-FAE1融合蛋白的诱导表达 | 第58-60页 |
| ·pQE-BnFAE1表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·6×His-BnFAE1融合蛋白的诱导表达 | 第61-62页 |
| 3 结果与分析 | 第62-69页 |
| ·克隆载体和克隆片段的制备 | 第62-63页 |
| ·重组质粒的检测 | 第63-66页 |
| ·融合蛋白的表达的检测 | 第66-68页 |
| ·融合蛋白的初步纯化 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-71页 |
| 第三部分 甘蓝型油菜脂肪酸延长酶1FAE1基因导入拟南芥中的研究 | 第71-79页 |
| 1 材料 | 第71-73页 |
| ·实验材料 | 第71页 |
| ·菌株和载体 | 第71页 |
| ·试剂 | 第71-72页 |
| ·试剂配方 | 第72-73页 |
| 2 方法 | 第73-75页 |
| ·酶切载体pSK-FAE1+/-以及pBI121载体 | 第73-74页 |
| ·连接和转化 | 第74页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第74页 |
| ·转化农杆菌EHA105 | 第74-75页 |
| ·花序浸染法转拟南芥 | 第75页 |
| ·转基因种子筛选 | 第75页 |
| 3 结果与分析 | 第75-77页 |
| ·pBI121载体双酶切 | 第75-76页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第76页 |
| ·转基因拟南芥种子筛选 | 第76-77页 |
| 4 讨论 | 第77-79页 |
| 文献综述 | 第79-99页 |
| 参考文献 | 第99-108页 |
| 在读期间发表及待发表的论文 | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
