| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 正文部分 | 第12-109页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-58页 |
| 1 猪伪狂犬病在国内外发生和流行状况 | 第12-18页 |
| ·猪伪狂犬病的认识历程 | 第12-13页 |
| ·伪狂犬病的世界性分布 | 第13-16页 |
| ·我国猪伪狂犬病的现状 | 第16-18页 |
| 2 伪狂犬病的主要流行病学特征 | 第18-21页 |
| ·分离的毒株毒力有差异 | 第18-20页 |
| ·强毒株的出现 | 第20页 |
| ·传播的途径 | 第20-21页 |
| 3 伪狂犬病病毒的分子生物学 | 第21-43页 |
| ·伪狂犬病病毒基因组的结构和功能 | 第21-26页 |
| ·伪狂犬病病毒的分子致病机理 | 第26-30页 |
| ·主要疫苗株的遗传背景 | 第30-31页 |
| ·疫苗的安全性和效力标准 | 第31-34页 |
| ·伪狂犬病的免疫机制 | 第34-37页 |
| ·疫苗性能的比较 | 第37-40页 |
| ·影响疫苗效果的因素 | 第40-41页 |
| ·免疫失败以及免疫逃避 | 第41-43页 |
| 4 伪狂犬病病毒gE基因的结构与功 | 第43-45页 |
| ·gE基因的结构 | 第43页 |
| ·gE基因的变异现象 | 第43-44页 |
| ·gE糖蛋白的功能 | 第44-45页 |
| 5 伪狂犬病的根除计划 | 第45-56页 |
| ·根除计划的技术支撑 | 第45页 |
| ·鉴别诊断方法 | 第45-48页 |
| ·一些国家的根除计划及其进展 | 第48-56页 |
| 6 伪狂犬病研究的其它前沿问题 | 第56-58页 |
| ·重组多价疫苗 | 第56页 |
| ·RR突变株 | 第56页 |
| ·基因免疫 | 第56-57页 |
| ·流行病学研究方法的应用 | 第57-58页 |
| 第2章 伪狂犬病病毒TK/gG~-基因缺失疫苗的研究 | 第58-93页 |
| 1 研究目的 | 第58页 |
| 2 材料和方法 | 第58-65页 |
| ·病毒与细胞 | 第58页 |
| ·引物 | 第58页 |
| ·试验动物 | 第58-59页 |
| ·主要设备、溶液和试剂 | 第59页 |
| ·BHK-21、PK-5、IBRS-2细胞的培养 | 第59页 |
| ·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第59页 |
| ·病毒组织培养半数感染量(TCID_(50))的测定 | 第59-60页 |
| ·空斑形成单位(Plaque Forming Unit,PFU)测定 | 第60页 |
| ·中和抗体的测定 | 第60页 |
| ·鄂A株、TK~-/gG~-/LacZ~+等基因缺失株、Bartha株在BHK-21细胞上的增殖滴度的比较 | 第60页 |
| ·鄂AK野毒株、TK／gG~-／LacZ~+等基因缺失株、Bartha株对Balb／c小白LD~5的测定 | 第60页 |
| ·鄂A株、TK~-／gG~-／LacZ~+突变株及Bartha株对成年家兔LD~(50)测定 | 第60页 |
| ·不同剂量TK~-／gG~-／LacZ~+突变株对猪的安全性测定 | 第60-61页 |
| ·基因缺失突变株遗传特征稳定性的测定 | 第61-62页 |
| ·最小免疫剂量的筛选 | 第62页 |
| ·弱毒疫苗生产工艺研究 | 第62-63页 |
| ·疫苗的安全性测定 | 第63页 |
| ·疫苗的免疫效力试验 | 第63-64页 |
| ·疫苗的免疫期测定 | 第64页 |
| ·仔猪母源抗体的测定 | 第64页 |
| ·母源抗体对疫苗的影响测定 | 第64页 |
| ·疫苗的保存期测定 | 第64页 |
| ·几种供试疫苗的免疫性能比较 | 第64-65页 |
| 3 结果与分析 | 第65-82页 |
| ·伪狂犬病鄂A株及其基因突变株、Bartha株在BHK-21细胞上的增殖滴度 | 第65页 |
| ·鄂A株野毒株、TK~-、TK~-／gG~-／LacZ~+及Bartha株对小白鼠LD_(50)的测定 | 第65-66页 |
| ·鄂A株、TK~-／gG~-株和Bartha株对成年家兔毒力测定 | 第66-69页 |
| ·不同剂量突变株对猪的安全性测定结果 | 第69-71页 |
| ·伪狂犬病病毒TK~-／gG~-／LacZ~+突变株的遗传标志稳定性 | 第71-73页 |
| ·最小免疫剂量的测定结果 | 第73-74页 |
| ·TK~-／gG~-／LacZ~+突变株在鸡胚纤维细胞中的生长滴度 | 第74-75页 |
| ·基因缺失弱毒疫苗的安全性 | 第75-76页 |
| ·疫苗的效力试验 | 第76-77页 |
| ·疫苗的免疫持续期 | 第77-79页 |
| ·疫苗免疫后母源抗体持续期 | 第79页 |
| ·野毒株与基因缺失免疫原性的比较 | 第79-81页 |
| ·疫苗不同保存条件下毒价的测定 | 第81页 |
| ·不同疫苗的效力和免疫原性比较 | 第81-82页 |
| 4 讨论 | 第82-91页 |
| ·伪狂犬病研究的热点 | 第82-83页 |
| ·疫苗研究的重要性和紧迫性 | 第83页 |
| ·不同毒株增殖滴度的比较 | 第83-84页 |
| ·基因工程缺失疫苗安全性应考虑的问题 | 第84-85页 |
| ·疫苗株毒株稳定性的意义 | 第85-86页 |
| ·关于疫苗最小免疫剂量的确定 | 第86-87页 |
| ·关于疫苗生产工艺 | 第87-88页 |
| ·关于疫苗的免疫效力 | 第88-89页 |
| ·关于疫苗的水平传播 | 第89页 |
| ·该疫苗的抗体产生规律 | 第89-90页 |
| ·不同遗传背景疫苗之间的比较 | 第90-91页 |
| 5 小结 | 第91-93页 |
| 第3章 检测伪狂犬病血清抗体乳胶凝集试验的建立和应用 | 第93-101页 |
| 1 研究目的 | 第93页 |
| 2 材料和方法 | 第93-95页 |
| ·材料及溶液的配制 | 第93页 |
| ·伪狂犬病病毒鄂A株标准血清制备 | 第93-94页 |
| ·伪狂犬病病毒的增殖、沉淀和浓缩、含量的测定 | 第94页 |
| ·乳胶的预处理 | 第94页 |
| ·乳胶凝集抗原的制备 | 第94页 |
| ·乳胶凝集试验的操作过程 | 第94页 |
| ·乳胶凝集抗原质量的鉴定 | 第94页 |
| ·待检血清处理方法对凝集试验效果的影响 | 第94-95页 |
| ·乳胶凝集试验与中和试验的比较 | 第95页 |
| ·乳胶凝集抗原有效期的测定 | 第95页 |
| ·部分田间试验 | 第95页 |
| 3 结果与分析 | 第95-98页 |
| ·抗原制备时最佳浓度的选择结果 | 第95页 |
| ·抗原制备时最适蛋白浓度的确定 | 第95页 |
| ·抗原特异性的测定 | 第95-96页 |
| ·血清处理与否对结果的影响 | 第96页 |
| ·全血中伪狂犬病抗体的定性检测 | 第96页 |
| ·乳胶凝集试验与中和试验的比较结果 | 第96-97页 |
| ·抗原保存期的测定 | 第97页 |
| ·部分田间试验的结果 | 第97-98页 |
| 4 讨论 | 第98-100页 |
| ·本研究的现实意义 | 第98页 |
| ·各种条件的选择 | 第98-99页 |
| ·本法的主要特点 | 第99页 |
| ·与中和试验的比较 | 第99页 |
| ·田间试验的评价 | 第99-100页 |
| 5 小结 | 第100-101页 |
| 第4章 伪狂犬病病毒鄂A株gE基因转移载体构建 | 第101-109页 |
| 1 研究目的 | 第101页 |
| 2 材料和方法 | 第101-104页 |
| ·菌株和质粒 | 第101页 |
| ·限制性内切酶及工具酶 | 第101页 |
| ·引物与BamHI接头 | 第101页 |
| ·DNA快速纯化回收试剂盒 | 第101页 |
| ·主要试剂 | 第101-102页 |
| ·溶液(试剂)的配制 | 第102页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第102页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第102页 |
| ·质粒DNA小量提取 | 第102页 |
| ·目的DNA的酶切、回收 | 第102-103页 |
| ·载体DNA的处理 | 第103页 |
| ·连接 | 第103页 |
| ·含PrV gE基因片段的获得 | 第103页 |
| ·重组质粒SKFB的获得 | 第103页 |
| ·BamHI接头的加入 | 第103页 |
| ·插入LacZ表达盒的重组质粒的构建 | 第103-104页 |
| 3 结果与分析 | 第104-107页 |
| ·重组质粒PUC6.6的获得及酶切鉴定 | 第104-105页 |
| ·含目的基因SK4.1重组质粒的构建和鉴定 | 第105-106页 |
| ·SK4.1中LacZ表达盒的插入及其鉴定 | 第106-107页 |
| 4 讨论 | 第107-108页 |
| 5 小结 | 第108-109页 |
| 参考文献 | 第109-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 附录(已发表的文章) | 第126页 |
