| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-28页 |
| ·基因工程抗体的研究进展 | 第15-27页 |
| ·基因工程抗体的类型 | 第16-23页 |
| ·抗体可变区基因克隆 | 第23-24页 |
| ·基因工程抗体的宿主表达系统 | 第24-27页 |
| ·研究目的和意义 | 第27页 |
| ·研究思路和内容 | 第27-28页 |
| 第二章 已知抗体基因序列的单链抗体的构建、表达及初步鉴定 | 第28-38页 |
| ·材料和仪器 | 第29-31页 |
| ·方法 | 第31-34页 |
| ·抗对硫磷scFv 基因的合成 | 第31页 |
| ·抗对硫磷scFv 表达质粒的构建 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第32页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌 | 第32页 |
| ·碱裂解法提取质粒 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的酶切及PCR 验证 | 第33页 |
| ·抗对硫磷scFv 基因的表达及SDS-PAGE 分析 | 第33页 |
| ·scFv 的Western Blot 检测及其纯化 | 第33-34页 |
| ·scFv 的ELISA 反应活性初步鉴定 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-37页 |
| ·抗对硫磷scFv 基因的合成 | 第34-35页 |
| ·抗对硫磷scFv 表达载体的构建及鉴定 | 第35-36页 |
| ·抗对硫磷scFv 基因的表达和融合蛋白的纯化 | 第36页 |
| ·scFv 的ELISA 反应活性初步鉴定 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 未知抗体基因的单链抗体构建及其活性研究 | 第38-55页 |
| ·材料和仪器 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-45页 |
| ·抗体重链及轻链基因的扩增 | 第40-42页 |
| ·抗MC-LR 单链抗体表达载体的构建及表达 | 第42-43页 |
| ·scFv 的纯化及抗原结合活性测定 | 第43-45页 |
| ·实验结果与分析 | 第45-53页 |
| ·抗体重链和轻链基因的扩增 | 第45-47页 |
| ·抗MC-LR 单链抗体表达载体的构建及表达 | 第47-51页 |
| ·scFv 的纯化及抗原结合活性测定 | 第51-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 半抗原四价抗体的构建及生物学活性的研究 | 第55-72页 |
| ·材料和仪器 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-61页 |
| ·核心链霉亲和素基因的分析及合成 | 第56页 |
| ·scFv 基因的PCR 扩增 | 第56-57页 |
| ·sa 基因的PCR 扩增 | 第57页 |
| ·四价抗体TeAb 编码基因的拼接 | 第57页 |
| ·四价抗体表达载体的构建 | 第57-58页 |
| ·四价抗体的表达和Western Blot 检测 | 第58-59页 |
| ·四价抗体的纯化及定量 | 第59页 |
| ·四价抗体的SDS-PAGE 及Western Blot 检测 | 第59页 |
| ·单链抗体、单克隆抗体及四价抗体的生物学活性比较 | 第59-61页 |
| ·实验结果与分析 | 第61-72页 |
| ·核心链霉亲和素基因的分析及合成 | 第61页 |
| ·scFv 及sa 基因的PCR 扩增 | 第61-62页 |
| ·四价抗体TeAb 编码基因的拼接及其表达载体的构建 | 第62-65页 |
| ·四价抗体的表达和Western Blot 检测 | 第65-66页 |
| ·四价抗体的回收及其单体分子多聚化的检测 | 第66-67页 |
| ·单链抗体、单克隆抗体及四价抗体的生物学活性比较 | 第67-72页 |
| 第五章 结论及讨论 | 第72-75页 |
| ·结论 | 第72页 |
| ·讨论 | 第72-75页 |
| 参考文献 | 第75-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 作者简历 | 第88页 |
