| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 1 绪论 | 第11-30页 |
| ·引言 | 第11-13页 |
| ·国内外研究现状 | 第13-16页 |
| ·常规检测方法 | 第13页 |
| ·噬菌体检测法 | 第13页 |
| ·酶联免疫吸附法(ELISA)和斑点免疫结合法(DIA) | 第13-14页 |
| ·DNA 杂交诊断 | 第14页 |
| ·DNA 指纹图谱分析 | 第14-15页 |
| ·PCR 检测方法 | 第15-16页 |
| ·锁式探针 | 第16-19页 |
| ·锁式探针的结构 | 第16-17页 |
| ·锁式探针的扩增与检测 | 第17-19页 |
| ·滚环扩增技术 | 第19-27页 |
| ·滚环扩增的种类及主要特征 | 第19-21页 |
| ·滚环扩增检测的特异性、灵敏度和可重复性 | 第21页 |
| ·滚环扩增优势和不足 | 第21-22页 |
| ·滚环扩增的应用 | 第22-24页 |
| ·实时荧光RCA 技术 | 第24-27页 |
| ·国内外专利授权情况 | 第27页 |
| ·研究目的和意义 | 第27页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第27-29页 |
| ·研究内容 | 第27-28页 |
| ·技术路线 | 第28-29页 |
| ·本研究的创新点 | 第29-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-37页 |
| ·供试材料 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第30-32页 |
| ·病原微生物基因组DNA 的提取 | 第32-33页 |
| ·TENS 法提取Xac 基因组DNA | 第32页 |
| ·CTAB 法提取小麦矮腥黑穗病菌基因组DNA | 第32-33页 |
| ·锁式探针及其扩增引物的设计 | 第33页 |
| ·滚环扩增检测体系的建立及优化 | 第33-34页 |
| ·连接及Exonuclease I 酶切消化 | 第33-34页 |
| ·分支滚环式扩增(HRCA) | 第34页 |
| ·体系优化 | 第34页 |
| ·Xac 滚环扩增检测体系性能测试及实际样品的检测 | 第34页 |
| ·滚环扩增检测的特异性 | 第34页 |
| ·滚环扩增检测的灵敏度 | 第34页 |
| ·滚环扩增检测体系的初步应用 | 第34页 |
| ·连接酶依赖性 PCR(Ligase-dependent PCR, L-PCR) | 第34-35页 |
| ·常规PCR | 第34-35页 |
| ·Real time L-PCR | 第35页 |
| ·反向斑点杂交 | 第35-37页 |
| 3 结果 | 第37-47页 |
| ·Xac 及 TCK 基因组 DNA 的提取 | 第37页 |
| ·HRCA 体系的优化 | 第37-39页 |
| ·Xac 滚环扩增检测体系性能测试及实际样品的检测 | 第39-41页 |
| ·滚环扩增检测的特异性 | 第39-40页 |
| ·滚环扩增检测的灵敏度 | 第40-41页 |
| ·实际样品的初步检测 | 第41页 |
| ·Xac 与 TCK 的混合检测 | 第41-47页 |
| ·TCK 锁式探针性能测试 | 第41-42页 |
| ·Xac 与TCK 的滚环扩增检测 | 第42-43页 |
| ·反向斑点杂交 | 第43-47页 |
| 4 讨论 | 第47-51页 |
| ·锁式探针及其扩增引物的设计 | 第47页 |
| ·锁式探针-靶标拓扑结构 | 第47-48页 |
| ·核酸外切酶I 的作用 | 第48页 |
| ·热循环连接法 | 第48页 |
| ·检测样品的处理 | 第48页 |
| ·实际样品的检测 | 第48-49页 |
| ·锁式探针两种扩增方法的等效性 | 第49页 |
| ·Real-time L-PCR | 第49页 |
| ·反向斑点杂交 | 第49-51页 |
| 5 结论及后续工作 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 附录 | 第58-68页 |
