中文摘要 | 第1-18页 |
英文摘要 | 第18-22页 |
前言 | 第22-38页 |
1.肿瘤细胞诱导分化机理研究及其深入方向 | 第22-26页 |
2.核基质与核基质蛋白研究 | 第26-30页 |
3.核基质异常与细胞癌变 | 第30-33页 |
4.肝癌细胞诱导分化研究及其存在问题 | 第33-35页 |
5.本论文具体研究工作及其科学意义 | 第35-38页 |
材料和方法 | 第38-54页 |
1.试剂与材料 | 第38-39页 |
2.主要仪器 | 第39-40页 |
3.细胞培养与诱导分化处理 | 第40-41页 |
4.人肝癌SMMC-7721细胞诱导分化过程中生长曲线的测定 | 第41页 |
5.人肝癌SMMC-7721细胞诱导分化前后细胞周期分布的测定 | 第41-42页 |
6.苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色及光镜观察 | 第42页 |
7.人肝癌SMMC-7721细胞的扫描及透射电镜样品制备观察 | 第42-43页 |
8.人肝癌SMMC-7721细胞相关癌基因c-fos、c-myc、bcl-2、c-erbB-2及抑癌基因p53、rb、p21、p27表达产物的免疫细胞化学检测 | 第43-44页 |
9.人肝癌SMMC-7721细胞核基质-中间纤维系统的选择性抽提 | 第44页 |
10.核基质-中间纤维系统的整装光镜及电镜样品制备与观察 | 第44-45页 |
11.核基质蛋白组分的提取 | 第45-46页 |
12.双向聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第46-47页 |
13.凝胶染色 | 第47页 |
14.凝胶图像分析 | 第47页 |
15.胶内酶解 | 第47-48页 |
16.质谱分析及数据库检索 | 第48-49页 |
17.蛋白质印记杂交检测 | 第49-50页 |
18.免疫荧光染色观察 | 第50-51页 |
19.免疫胶体金标记样品的制备观察_ | 第51页 |
20.激光共聚焦显微镜观察样品的制备与观察 | 第51-54页 |
实验结果 | 第54-80页 |
1.HMBA对人肝癌SMMC-7721细胞分化的诱导效果 | 第54-63页 |
·HMBA诱导处理前后SMMC-7721细胞生长曲线的观察结果 | 第54-56页 |
·HMBA诱导处理过程中SMMC-7721细胞周期的测定结果 | 第56-58页 |
·HMBA诱导处理前后SMMC-7721细胞形态和超微结构的观察结果 | 第58-59页 |
·光镜观察结果 | 第58-59页 |
·扫描电镜观察结果 | 第59页 |
·透射电镜观察结果 | 第59页 |
·HMBA对人肝癌SMMC-7721细胞癌基因、抑癌基因表达的影响 | 第59-63页 |
·SMMC-7721细胞诱导处理前后c-fos表达产物的变化 | 第59-60页 |
·SMMC-7721细胞诱导处理前后c-myc表达产物的变化 | 第60页 |
·SMMC-7721细胞诱导处理前后bcl-2表达产物的变化 | 第60-61页 |
·SMMC-7721细胞诱导处理前后c-erbB-2表达产物的变化 | 第61页 |
·SMMC-7721细胞诱导处理前后p53表达产物的变化 | 第61页 |
·SMMC-7721细胞诱导处理前后Rb表达产物的变化 | 第61-62页 |
·SMMC-7721细胞诱导处理前后p21表达产物的变化 | 第62页 |
·SMMC-7721细胞诱导处理前后p27表达产物的变化 | 第62-63页 |
2.SMMC-7721细胞诱导分化过程中核基质-中间纤维构型的变化 | 第63-65页 |
·核基质-中间纤维系统的光镜观察结果 | 第63-64页 |
·核基质-中间纤维系统的整装扫描电镜观察结果 | 第64-65页 |
·核基质-中间纤维系统的整装透射电镜观察结果 | 第65页 |
3.HMBA诱导人肝癌SMMC-7721细胞分化过程中核基质蛋白表达的变化 | 第65-71页 |
·双向电泳与凝胶图像分析结果 | 第65-67页 |
·质谱鉴定与数据库查询结果 | 第67-71页 |
4.SMMC-7721细胞诱导分化前后特异核基质蛋白表达变化的确证 | 第71-75页 |
·蛋白质印迹杂交结果 | 第71-72页 |
·核基质蛋白NPM及PHB的免疫荧光染色观察结果 | 第72-74页 |
·NPM的免疫荧光染色观察结果 | 第72页 |
·PHB的免疫荧光染色观察结果 | 第72-74页 |
·核基质蛋白NPM和PHB在核基质上的定位 | 第74-75页 |
5.NPM与癌基因c-fos、c-myc以及抑癌基因Rb、p53表达产物在细胞内的共定位观察结果 | 第75-77页 |
·NPM和c-Fos在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系 | 第75-76页 |
·NPM和c-Myc在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系 | 第76页 |
·NPM和mtP53在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系 | 第76页 |
·NPM和pRb在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系 | 第76-77页 |
6.PHB与癌基因c-fos、c-myc以及抑癌基因Rb、p53表达产物在细胞内的共定位观察结果 | 第77-80页 |
·PHB和c-Fos在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系 | 第77-78页 |
·PHB和c-Myc在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系 | 第78页 |
·PHB和mtP53在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系 | 第78-79页 |
·PHB和pRb在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系 | 第79-80页 |
讨论 | 第80-124页 |
1.HMBA对人肝癌SMMC-7721细胞的诱导分化效果 | 第80-84页 |
·HMBA对SMMC-7721细胞的增殖与细胞周期进程的影响 | 第80-81页 |
·HMBA对SMMC-7721细胞形态与超微结构的影响 | 第81-82页 |
·HMBA对SMMC-7721细胞相关癌基因与抑癌基因表达的影响 | 第82-84页 |
2.HMBA对人肝癌SMMC-7721细胞分化过程中核基质构型变化的影响 | 第84-87页 |
3.差异表达核基质蛋白与HMBA诱导人肝癌SMMC-7721细胞分化的关系 | 第87-118页 |
·人肝癌SMMC-7721细胞诱导分化前后差异表达的核基质蛋白 | 第87-89页 |
·差异表达核基质蛋白的功能分析 | 第89-104页 |
·NPM的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用 | 第89-91页 |
·PHB的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用 | 第91-93页 |
·突变型Pyst1的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用 | 第93-94页 |
·sin3b的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用 | 第94-96页 |
·基础转录因子IIH复合物p44亚基的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用 | 第96-98页 |
·SFRS1的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用 | 第98-100页 |
·真核启始因子6的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用 | 第100-102页 |
·Laminin结合蛋白LBP的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用 | 第102-104页 |
·NPM和PHB在人肝癌SMMC-7721细胞分化过程中与相关基因产物的关系 | 第104-118页 |
·NPM与SMMC-7721细胞中相关癌基因及抑癌基因基因产物的关系 | 第104-112页 |
·NPM与c-Myc | 第105-106页 |
·NPM与c-Fos | 第106-107页 |
·NPM与mtP53 | 第107-108页 |
·NPM与pRb | 第108-112页 |
·PHB与SMMC-7721细胞中相关癌基因及抑癌基因基因产物的关系 | 第112-118页 |
·NPM与c-Myc | 第113-114页 |
·NPM与c-Fos | 第114页 |
·NPM与P53 | 第114-115页 |
·NPM与pRb | 第115-118页 |
4.HMBA诱导人肝癌SMMC-7721细胞分化的调控机制 | 第118-124页 |
结论 | 第124-125页 |
论文创新点 | 第125-128页 |
参考文献 | 第128-160页 |
图版及说明 | 第160-184页 |
缩略语 | 第184-185页 |
在校期间发表的论文 | 第185-187页 |
致谢 | 第187页 |