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核基质蛋白在人肝癌SMMC-7721细胞诱导分化过程中的变化研究

中文摘要第1-18页
英文摘要第18-22页
前言第22-38页
 1.肿瘤细胞诱导分化机理研究及其深入方向第22-26页
 2.核基质与核基质蛋白研究第26-30页
 3.核基质异常与细胞癌变第30-33页
 4.肝癌细胞诱导分化研究及其存在问题第33-35页
 5.本论文具体研究工作及其科学意义第35-38页
材料和方法第38-54页
 1.试剂与材料第38-39页
 2.主要仪器第39-40页
 3.细胞培养与诱导分化处理第40-41页
 4.人肝癌SMMC-7721细胞诱导分化过程中生长曲线的测定第41页
 5.人肝癌SMMC-7721细胞诱导分化前后细胞周期分布的测定第41-42页
 6.苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色及光镜观察第42页
 7.人肝癌SMMC-7721细胞的扫描及透射电镜样品制备观察第42-43页
 8.人肝癌SMMC-7721细胞相关癌基因c-fos、c-myc、bcl-2、c-erbB-2及抑癌基因p53、rb、p21、p27表达产物的免疫细胞化学检测第43-44页
 9.人肝癌SMMC-7721细胞核基质-中间纤维系统的选择性抽提第44页
 10.核基质-中间纤维系统的整装光镜及电镜样品制备与观察第44-45页
 11.核基质蛋白组分的提取第45-46页
 12.双向聚丙烯酰胺凝胶电泳第46-47页
 13.凝胶染色第47页
 14.凝胶图像分析第47页
 15.胶内酶解第47-48页
 16.质谱分析及数据库检索第48-49页
 17.蛋白质印记杂交检测第49-50页
 18.免疫荧光染色观察第50-51页
 19.免疫胶体金标记样品的制备观察_第51页
 20.激光共聚焦显微镜观察样品的制备与观察第51-54页
实验结果第54-80页
 1.HMBA对人肝癌SMMC-7721细胞分化的诱导效果第54-63页
     ·HMBA诱导处理前后SMMC-7721细胞生长曲线的观察结果第54-56页
     ·HMBA诱导处理过程中SMMC-7721细胞周期的测定结果第56-58页
     ·HMBA诱导处理前后SMMC-7721细胞形态和超微结构的观察结果第58-59页
       ·光镜观察结果第58-59页
       ·扫描电镜观察结果第59页
       ·透射电镜观察结果第59页
     ·HMBA对人肝癌SMMC-7721细胞癌基因、抑癌基因表达的影响第59-63页
       ·SMMC-7721细胞诱导处理前后c-fos表达产物的变化第59-60页
       ·SMMC-7721细胞诱导处理前后c-myc表达产物的变化第60页
       ·SMMC-7721细胞诱导处理前后bcl-2表达产物的变化第60-61页
       ·SMMC-7721细胞诱导处理前后c-erbB-2表达产物的变化第61页
       ·SMMC-7721细胞诱导处理前后p53表达产物的变化第61页
       ·SMMC-7721细胞诱导处理前后Rb表达产物的变化第61-62页
       ·SMMC-7721细胞诱导处理前后p21表达产物的变化第62页
       ·SMMC-7721细胞诱导处理前后p27表达产物的变化第62-63页
 2.SMMC-7721细胞诱导分化过程中核基质-中间纤维构型的变化第63-65页
     ·核基质-中间纤维系统的光镜观察结果第63-64页
     ·核基质-中间纤维系统的整装扫描电镜观察结果第64-65页
     ·核基质-中间纤维系统的整装透射电镜观察结果第65页
 3.HMBA诱导人肝癌SMMC-7721细胞分化过程中核基质蛋白表达的变化第65-71页
     ·双向电泳与凝胶图像分析结果第65-67页
     ·质谱鉴定与数据库查询结果第67-71页
 4.SMMC-7721细胞诱导分化前后特异核基质蛋白表达变化的确证第71-75页
     ·蛋白质印迹杂交结果第71-72页
     ·核基质蛋白NPM及PHB的免疫荧光染色观察结果第72-74页
       ·NPM的免疫荧光染色观察结果第72页
     ·PHB的免疫荧光染色观察结果第72-74页
   ·核基质蛋白NPM和PHB在核基质上的定位第74-75页
 5.NPM与癌基因c-fos、c-myc以及抑癌基因Rb、p53表达产物在细胞内的共定位观察结果第75-77页
     ·NPM和c-Fos在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系第75-76页
     ·NPM和c-Myc在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系第76页
     ·NPM和mtP53在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系第76页
     ·NPM和pRb在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系第76-77页
 6.PHB与癌基因c-fos、c-myc以及抑癌基因Rb、p53表达产物在细胞内的共定位观察结果第77-80页
     ·PHB和c-Fos在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系第77-78页
     ·PHB和c-Myc在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系第78页
     ·PHB和mtP53在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系第78-79页
     ·PHB和pRb在人肝癌SMMC-7721细胞内的共定位关系第79-80页
讨论第80-124页
 1.HMBA对人肝癌SMMC-7721细胞的诱导分化效果第80-84页
     ·HMBA对SMMC-7721细胞的增殖与细胞周期进程的影响第80-81页
     ·HMBA对SMMC-7721细胞形态与超微结构的影响第81-82页
     ·HMBA对SMMC-7721细胞相关癌基因与抑癌基因表达的影响第82-84页
 2.HMBA对人肝癌SMMC-7721细胞分化过程中核基质构型变化的影响第84-87页
 3.差异表达核基质蛋白与HMBA诱导人肝癌SMMC-7721细胞分化的关系第87-118页
     ·人肝癌SMMC-7721细胞诱导分化前后差异表达的核基质蛋白第87-89页
     ·差异表达核基质蛋白的功能分析第89-104页
       ·NPM的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用第89-91页
       ·PHB的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用第91-93页
       ·突变型Pyst1的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用第93-94页
       ·sin3b的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用第94-96页
       ·基础转录因子IIH复合物p44亚基的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用第96-98页
       ·SFRS1的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用第98-100页
       ·真核启始因子6的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用第100-102页
       ·Laminin结合蛋白LBP的功能及其在人肝癌SMMC-7721细胞分化中的可能作用第102-104页
     ·NPM和PHB在人肝癌SMMC-7721细胞分化过程中与相关基因产物的关系第104-118页
       ·NPM与SMMC-7721细胞中相关癌基因及抑癌基因基因产物的关系第104-112页
         ·NPM与c-Myc第105-106页
         ·NPM与c-Fos第106-107页
         ·NPM与mtP53第107-108页
         ·NPM与pRb第108-112页
       ·PHB与SMMC-7721细胞中相关癌基因及抑癌基因基因产物的关系第112-118页
         ·NPM与c-Myc第113-114页
         ·NPM与c-Fos第114页
         ·NPM与P53第114-115页
         ·NPM与pRb第115-118页
 4.HMBA诱导人肝癌SMMC-7721细胞分化的调控机制第118-124页
结论第124-125页
论文创新点第125-128页
参考文献第128-160页
图版及说明第160-184页
缩略语第184-185页
在校期间发表的论文第185-187页
致谢第187页

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