中文摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-9页 |
第1章 绪论 | 第9-36页 |
·细菌群体效应 | 第9-25页 |
·细菌群体效应的发现和定义 | 第9-10页 |
·细菌群体效应的机制 | 第10-24页 |
·群体感应的研究方法与技术 | 第24-25页 |
·副干酪乳杆菌(LACTOBACILLUS PARACASEI)群体效应研究概况 | 第25-29页 |
·生物信息学概述 | 第29-30页 |
·基因敲除技术概述 | 第30-33页 |
·本研究的目的和意义 | 第33-36页 |
第2章 材料与方法 | 第36-66页 |
·实验材料 | 第36-44页 |
·供试菌种和质粒 | 第36-38页 |
·扩增引物 | 第38-39页 |
·主要仪器设备 | 第39-40页 |
·主要分子生物学及生化试剂 | 第40-41页 |
·主要缓冲液及试剂配制 | 第41-44页 |
·实验方法 | 第44-66页 |
·L.paracasei HD1.7 细菌基因组的提取及浓度测定 | 第44-45页 |
·prcR 基因的克隆及测序 | 第45-51页 |
·测定氨苄青霉素、四环素和卡那霉素杀伤曲线 | 第51-52页 |
·构建pUC18-prcR 质粒 | 第52-56页 |
·克隆四环素(Tet)抗性基因 | 第56-58页 |
·构建自杀质粒pUC18-prcR-tet | 第58-61页 |
·测定红霉素对L.paracasei HD1.7 的杀伤曲线 | 第61-62页 |
·制备L.paracasei HD1.7 感受态细胞 | 第62页 |
·pUC18-prcR-tet 和pMG36e 质粒电转化L.paracasei HD1.7 感受态细胞 | 第62-64页 |
·prcR 基因敲除突变株的构建 | 第64-66页 |
第3章 结果与分析 | 第66-102页 |
·L.PARACASEI HD1.7 细菌基因组的提取 | 第66页 |
·PRCR 基因的PCR 扩增 | 第66-68页 |
·生物信息学分析 | 第68-86页 |
·ORF 分析 | 第68页 |
·同源性分析 | 第68-76页 |
·一级结构分析 | 第76-80页 |
·二级结构和功能分析 | 第80-85页 |
·三级结构预测 | 第85-86页 |
·AMPIC、TET、KM 和EM 对L.PARACASEI HD1.7 的最小抑菌浓度 | 第86页 |
·重组质粒PUC18-PRCR 质粒的构建 | 第86-89页 |
·克隆TET 抗性基因 | 第89-90页 |
·重组质粒PUC18-PRCR-TET 质粒的构建 | 第90-95页 |
·甘氨酸(GLY)对L.PARACASEI HD1.7 细胞生长的影响 | 第95-96页 |
·利用PMG36E 质粒摸索L.PARACASEI HD1.7 电转化条件 | 第96-99页 |
·Gly 有无对电转化效率的影响 | 第96-97页 |
·不同细菌生长时期对电转化效率的影响 | 第97页 |
·不同的电转缓冲液对电转化效率的影响 | 第97-98页 |
·不同电压对电转化效率的影响 | 第98页 |
·高渗复苏培养基对电转化效率的影响 | 第98-99页 |
·其它因素对电转化效率的影响 | 第99页 |
·PRCR 基因敲除突变株的筛选与鉴定 | 第99-102页 |
·prcR 基因敲除突变株的筛选 | 第99-100页 |
·prcR 基因敲除突变株的鉴定 | 第100-102页 |
第4章 讨论 | 第102-110页 |
·PRCR 基因的克隆 | 第102页 |
·PRCR 基因生物学信息分析 | 第102-104页 |
·PRCR 基因敲除载体的构建 | 第104-106页 |
·L.PARACASEI HD1.7 电转化条件摸索 | 第106-108页 |
·PRCR 基因敲除突变株的鉴定 | 第108-109页 |
·工作设想 | 第109-110页 |
第5章 结论 | 第110-111页 |
参考文献 | 第111-121页 |
附录1 | 第121-122页 |
附录2 | 第122-124页 |
附录3 | 第124-126页 |
致谢 | 第126-127页 |