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L.paracasei HD1.7 prcR定位突变及pMG36e对该菌的转化

中文摘要第1-3页
Abstract第3-9页
第1章 绪论第9-36页
   ·细菌群体效应第9-25页
     ·细菌群体效应的发现和定义第9-10页
     ·细菌群体效应的机制第10-24页
     ·群体感应的研究方法与技术第24-25页
   ·副干酪乳杆菌(LACTOBACILLUS PARACASEI)群体效应研究概况第25-29页
   ·生物信息学概述第29-30页
   ·基因敲除技术概述第30-33页
   ·本研究的目的和意义第33-36页
第2章 材料与方法第36-66页
   ·实验材料第36-44页
     ·供试菌种和质粒第36-38页
     ·扩增引物第38-39页
     ·主要仪器设备第39-40页
     ·主要分子生物学及生化试剂第40-41页
     ·主要缓冲液及试剂配制第41-44页
   ·实验方法第44-66页
     ·L.paracasei HD1.7 细菌基因组的提取及浓度测定第44-45页
     ·prcR 基因的克隆及测序第45-51页
     ·测定氨苄青霉素、四环素和卡那霉素杀伤曲线第51-52页
     ·构建pUC18-prcR 质粒第52-56页
     ·克隆四环素(Tet)抗性基因第56-58页
     ·构建自杀质粒pUC18-prcR-tet第58-61页
     ·测定红霉素对L.paracasei HD1.7 的杀伤曲线第61-62页
     ·制备L.paracasei HD1.7 感受态细胞第62页
     ·pUC18-prcR-tet 和pMG36e 质粒电转化L.paracasei HD1.7 感受态细胞第62-64页
     ·prcR 基因敲除突变株的构建第64-66页
第3章 结果与分析第66-102页
   ·L.PARACASEI HD1.7 细菌基因组的提取第66页
   ·PRCR 基因的PCR 扩增第66-68页
   ·生物信息学分析第68-86页
     ·ORF 分析第68页
     ·同源性分析第68-76页
     ·一级结构分析第76-80页
     ·二级结构和功能分析第80-85页
     ·三级结构预测第85-86页
   ·AMPIC、TET、KM 和EM 对L.PARACASEI HD1.7 的最小抑菌浓度第86页
   ·重组质粒PUC18-PRCR 质粒的构建第86-89页
   ·克隆TET 抗性基因第89-90页
   ·重组质粒PUC18-PRCR-TET 质粒的构建第90-95页
   ·甘氨酸(GLY)对L.PARACASEI HD1.7 细胞生长的影响第95-96页
   ·利用PMG36E 质粒摸索L.PARACASEI HD1.7 电转化条件第96-99页
     ·Gly 有无对电转化效率的影响第96-97页
     ·不同细菌生长时期对电转化效率的影响第97页
     ·不同的电转缓冲液对电转化效率的影响第97-98页
     ·不同电压对电转化效率的影响第98页
     ·高渗复苏培养基对电转化效率的影响第98-99页
     ·其它因素对电转化效率的影响第99页
   ·PRCR 基因敲除突变株的筛选与鉴定第99-102页
     ·prcR 基因敲除突变株的筛选第99-100页
     ·prcR 基因敲除突变株的鉴定第100-102页
第4章 讨论第102-110页
   ·PRCR 基因的克隆第102页
   ·PRCR 基因生物学信息分析第102-104页
   ·PRCR 基因敲除载体的构建第104-106页
   ·L.PARACASEI HD1.7 电转化条件摸索第106-108页
   ·PRCR 基因敲除突变株的鉴定第108-109页
   ·工作设想第109-110页
第5章 结论第110-111页
参考文献第111-121页
附录1第121-122页
附录2第122-124页
附录3第124-126页
致谢第126-127页

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