| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-24页 |
| ·酵母双杂交系统 | 第12-17页 |
| ·IBDV 及其细胞受体研究进展 | 第17-22页 |
| ·本实验研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-33页 |
| ·试验材料 | 第24-26页 |
| ·病毒、细胞和实验动物 | 第24页 |
| ·菌株、质粒和表达载体 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·引物 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-33页 |
| ·鸡胚成纤维细胞cDNA 表达文库构建 | 第26-27页 |
| ·IBDV 弱毒VP2 诱饵载体构建及其自激活作用检测 | 第27-29页 |
| ·IBDV Gt VP2 受体蛋白筛选及相互作用验证 | 第29-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-47页 |
| ·鸡胚成纤维细胞cDNA 表达文库构建 | 第33-36页 |
| ·鸡胚成纤维细胞总RNA 和纯化的mRNA 质量分析 | 第33页 |
| ·鸡胚成纤维细胞cDNA 鉴定 | 第33页 |
| ·鸡胚成纤维细胞cDNA 文库滴度测定 | 第33-34页 |
| ·cDNA 入门文库与表达文库质量鉴定 | 第34-35页 |
| ·cDNA 入门文库序列测定及生物信息学分析 | 第35-36页 |
| ·IBDV 弱毒VP2 诱饵载体构建及其自激活作用检测 | 第36-38页 |
| ·诱饵载体构建及鉴定 | 第36-37页 |
| ·3AT 浓度测试 | 第37-38页 |
| ·X-gal 报告基因测试 | 第38页 |
| ·IBDV Gt VP2 受体蛋白筛选及相互作用验证 | 第38-43页 |
| ·含诱饵质粒酵母菌鉴定 | 第38-39页 |
| ·文库质粒转化含诱饵质粒酵母感受态细胞 | 第39页 |
| ·X-gal 试验对相互作用阳性克隆的初步筛选 | 第39页 |
| ·阳性克隆进一步筛选 | 第39-41页 |
| ·从阳性克隆中剔除Bait 质粒 | 第41页 |
| ·阳性克隆中所带文库质粒的鉴定及序列分析 | 第41-42页 |
| ·构建Prey质粒并转化酵母感受态细胞 | 第42-43页 |
| ·Bait 质粒转化含Prey 质粒酵母感受态细胞并验证二者互作 | 第43页 |
| ·IBDV Gt VP2 蛋白CEF 受体初步研究 | 第43-47页 |
| ·CR2_(11) 原核表达载体构建 | 第43-44页 |
| ·CR2_(11) 真核表达载体构建 | 第44-45页 |
| ·CR2_(11) 原核表达产物SDS-PAGE 电泳分析 | 第45页 |
| ·CR2_(11) 真核载体质粒转染PK15—受体重建实验 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| ·IBDV 受体研究的必要性 | 第47页 |
| ·CEF cDNA 表达文库的构建 | 第47-48页 |
| ·诱饵载体构建及自激活检测 | 第48页 |
| ·文库的筛选 | 第48-49页 |
| ·IBDV Gt VP2 蛋白 CEF 受体的初步研究 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58页 |
