| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 第1章 炭疽芽孢杆菌致病机制及检测研究进展 | 第11-27页 |
| ·炭疽芽孢杆菌的形态极其分类 | 第11页 |
| ·炭疽病 | 第11-13页 |
| ·皮肤炭疽(cutaneous anthrax) | 第12页 |
| ·吸入炭疽(inhalatinal anthrax) | 第12-13页 |
| ·胃肠道炭疽(gastrointestinal anthrax) | 第13页 |
| ·炭疽芽孢杆菌的毒力因子以及致病机理 | 第13-16页 |
| ·毒素质粒和荚膜质粒 | 第13-14页 |
| ·保护性抗原(PA) | 第14-15页 |
| ·致死毒素 | 第15-16页 |
| ·水肿毒素 | 第16页 |
| ·检测方法 | 第16-26页 |
| ·细菌学检测 | 第16-17页 |
| ·核酸检测 | 第17-20页 |
| ·免疫学检测 | 第20-22页 |
| ·适配子检测 | 第22-23页 |
| ·化学分析检测 | 第23页 |
| ·生物传感器检测 | 第23-25页 |
| ·生物芯片检测 | 第25-26页 |
| ·结论 | 第26-27页 |
| 第2章 抗炭疽芽孢表面抗原单克隆抗体的制备 | 第27-49页 |
| ·前言 | 第27-29页 |
| ·材料 | 第29-33页 |
| ·动物和细胞 | 第29页 |
| ·菌株 | 第29-30页 |
| ·试剂 | 第30-31页 |
| ·仪器设备 | 第31页 |
| ·溶液配制 | 第31-33页 |
| ·细菌培养基 | 第31页 |
| ·细胞培养相关溶液 | 第31-32页 |
| ·ELISA相关溶液 | 第32页 |
| ·单抗纯化相关溶液 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE电泳相关溶液 | 第32-33页 |
| ·试验方法 | 第33-40页 |
| ·芽孢抗原的制备 | 第33-34页 |
| ·芽孢培养与纯化 | 第33-34页 |
| ·芽孢计数 | 第34页 |
| ·芽孢灭活 | 第34页 |
| ·小鼠免疫 | 第34-35页 |
| ·ELISA检测方法的建立 | 第35页 |
| ·骨髓瘤细胞的复苏与培养 | 第35-36页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第36页 |
| ·细胞融合 | 第36-37页 |
| ·收集骨髓瘤细胞 | 第36页 |
| ·分离脾细胞 | 第36页 |
| ·融合 | 第36-37页 |
| ·阳性杂交瘤细胞筛选与克隆化 | 第37-38页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第38页 |
| ·单克隆抗体的腹水生产及纯化 | 第38-39页 |
| ·腹水生产 | 第38页 |
| ·单克隆抗体纯化(正辛酸-饱和硫酸铵沉淀法) | 第38-39页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第39-40页 |
| ·单克隆抗体分型(ELISA) | 第39页 |
| ·单克隆抗体效价的测定 | 第39页 |
| ·单克隆抗体特异性鉴定 | 第39-40页 |
| ·杂交瘤细胞稳定性鉴定 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-47页 |
| ·扛原制备 | 第40-41页 |
| ·ELISA检测方法的建立 | 第41页 |
| ·ELISA检测免疫小鼠的血清效价 | 第41-42页 |
| ·细胞的融合与筛选 | 第42页 |
| ·单克隆抗体性质的鉴定 | 第42-47页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第42页 |
| ·单克隆抗体的亲和力鉴定 | 第42-43页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第43-47页 |
| ·单克隆抗体对炭疽芽孢的特异性 | 第43-45页 |
| ·单克隆抗体对炭疽芽孢杆菌的特异性 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 第3章 单克隆抗体靶抗原的鉴定及相关研究 | 第49-70页 |
| ·前言 | 第49-50页 |
| ·材料 | 第50-52页 |
| ·菌株与质粒 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50-51页 |
| ·仪器设备 | 第51页 |
| ·溶液配制 | 第51-52页 |
| ·细菌培养基 | 第51-52页 |
| ·纯化芽孢外壁相关溶液 | 第52页 |
| ·SDS-PAGE和Western Blot相关溶液 | 第52页 |
| ·质谱分析相关溶液 | 第52页 |
| ·蛋白质纯化相关溶液 | 第52页 |
| ·试验方法 | 第52-57页 |
| ·芽孢外壁的纯化 | 第52-53页 |
| ·SDS-PAGE和Western Blot | 第53页 |
| ·质谱分析 | 第53-54页 |
| ·基因克隆 | 第54-56页 |
| ·基因扩增 | 第54-55页 |
| ·载体构建 | 第55页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第55-56页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第55-56页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第56页 |
| ·蛋白质的表达与纯化 | 第56页 |
| ·间接ELISA试验 | 第56-57页 |
| ·免疫荧光试验 | 第57页 |
| ·原子力显微镜(AFM) | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-68页 |
| ·芽孢外壁的纯化 | 第57-58页 |
| ·单克隆抗体靶蛋白的鉴定 | 第58-59页 |
| ·eag基因的克隆表达与蛋白纯化 | 第59-60页 |
| ·单克隆抗体与EA1亲和力鉴定 | 第60-62页 |
| ·免疫荧光试验 | 第62-64页 |
| ·SA26与8G3的比较 | 第64页 |
| ·洗涤对炭疽芽孢表面的影响 | 第64-68页 |
| ·讨论 | 第68-69页 |
| ·结论 | 第69-70页 |
| 第4章 表面等离子共振传感器检测炭疽芽孢 | 第70-81页 |
| ·前言 | 第70-72页 |
| ·材料 | 第72-73页 |
| ·菌株 | 第72页 |
| ·试剂 | 第72-73页 |
| ·仪器设备 | 第73页 |
| ·溶液配制 | 第73页 |
| ·细菌培养基 | 第73页 |
| ·夹心ELISA试验相关溶液 | 第73页 |
| ·SPR试验相关溶液 | 第73页 |
| ·试验方法 | 第73-75页 |
| ·芽孢制备 | 第73页 |
| ·夹心ELISA | 第73-74页 |
| ·SPR试验 | 第74-75页 |
| ·抗体固定 | 第74页 |
| ·芯片再生 | 第74页 |
| ·SPR检测炭疽芽孢 | 第74-75页 |
| ·特异性鉴定 | 第75页 |
| ·结果与分析 | 第75-79页 |
| ·夹心ELISA检测炭疽芽孢 | 第75-76页 |
| ·抗体固定与芯片再生 | 第76-77页 |
| ·SPR传感器检测炭疽芽孢 | 第77-78页 |
| ·特异性鉴定 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| ·结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 附录 | 第95页 |
