| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第14-20页 |
| 1.1 转氨酶 | 第14-15页 |
| 1.1.1 转氨酶简介 | 第14页 |
| 1.1.2 ω-转氨酶(ω-TA) | 第14页 |
| 1.1.3 转氨酶的催化机制 | 第14-15页 |
| 1.2 手性胺类药物 | 第15-17页 |
| 1.2.1 手性药物及其制备方法 | 第15-16页 |
| 1.2.2 手性胺类药物及其制备方法 | 第16-17页 |
| 1.3 ω-转氨酶研究进展 | 第17页 |
| 1.3.1 ω-转氨酶研究历史 | 第17页 |
| 1.3.2 R型ω-TA的研究进展 | 第17页 |
| 1.4 酶的定向进化 | 第17-19页 |
| 1.4.1 定向进化的意义与方法 | 第17-18页 |
| 1.4.2 定向进化的应用 | 第18-19页 |
| 1.4.3 计算机在定向进化技术中的应用 | 第19页 |
| 1.5 课题的研究内容、目的及意义 | 第19-20页 |
| 1.5.1 课题研究内容 | 第19页 |
| 1.5.2 课题研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 建立易错PCR突变文库 | 第20-42页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验仪器及试剂 | 第20页 |
| 2.3 实验过程 | 第20-31页 |
| 2.3.1 浓度测定 | 第20-21页 |
| 2.3.2 高通量筛选方法 | 第21-23页 |
| 2.3.3 易错PCR体系的建立 | 第23-25页 |
| 2.3.4 建立易错PCR突变文库 | 第25-28页 |
| 2.3.5 突变体的克隆表达 | 第28-31页 |
| 2.4 实验结果分析 | 第31-40页 |
| 2.4.1 标准曲线的绘制 | 第31-34页 |
| 2.4.2 易错PCR突变文库的筛选 | 第34-36页 |
| 2.4.3 突变体的克隆表达 | 第36-40页 |
| 2.5 本章小结 | 第40-42页 |
| 第三章 转氨酶Pdbc的剪切 | 第42-48页 |
| 3.1 引言 | 第42-43页 |
| 3.2 实验仪器及试剂 | 第43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-44页 |
| 3.3.1 Pdbc JQ的克隆表达 | 第43-44页 |
| 3.4 实验结果 | 第44-47页 |
| 3.4.1 Pdbc JQ的克隆表达 | 第44-47页 |
| 3.5 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 计算机辅助Pdbc JQ分子模型建立 | 第48-54页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 实验仪器及软件 | 第48页 |
| 4.3 实验方法 | 第48-49页 |
| 4.3.1 同源建模 | 第48页 |
| 4.3.2 分子对接 | 第48-49页 |
| 4.3.3 分子动力学计算 | 第49页 |
| 4.4 实验结果分析 | 第49-53页 |
| 4.4.1 同源建模 | 第49-50页 |
| 4.4.2 分子对接 | 第50-51页 |
| 4.4.3 动力学分析 | 第51-53页 |
| 4.5 本章小结 | 第53-54页 |
| 第五章 Pdbc JQ的定点饱和突变 | 第54-66页 |
| 5.1 引言 | 第54页 |
| 5.2 实验仪器与试剂 | 第54页 |
| 5.3 实验方法 | 第54-56页 |
| 5.3.1 定点饱和突变 | 第54-56页 |
| 5.3.2 182K位定点突变 | 第56页 |
| 5.4 实验结果分析 | 第56-65页 |
| 5.4.1 定点饱和突变 | 第56-62页 |
| 5.4.2 182K定点突变 | 第62-65页 |
| 5.5 本章小结 | 第65-66页 |
| 第六章 Pdbc、PdbcJQ及突变体237Q酶学性质研究 | 第66-76页 |
| 6.1 引言 | 第66页 |
| 6.2 实验仪器及试剂 | 第66页 |
| 6.3 实验方法 | 第66-68页 |
| 6.3.1 最适温度 | 第66页 |
| 6.3.2 最适pH | 第66-67页 |
| 6.3.3 温度耐受 | 第67页 |
| 6.3.4 金属离子对酶酶活的影响 | 第67页 |
| 6.3.5 酶的催化效率 | 第67-68页 |
| 6.4 实验结果分析 | 第68-75页 |
| 6.4.1 最适温度 | 第68-69页 |
| 6.4.2 最适pH | 第69页 |
| 6.4.3 温度耐受 | 第69-70页 |
| 6.4.4 金属离子对酶活的影响 | 第70-71页 |
| 6.4.5 酶的催化效率 | 第71-75页 |
| 6.5 本章小结 | 第75-76页 |
| 第七章 总结 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 附录 | 第84-90页 |
| 致谢 | 第90-92页 |
| 研究成果及发表学术论文 | 第92-94页 |
| 作者与导师简介 | 第94-95页 |
| 附件 | 第95-96页 |