| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-18页 |
| ·-3-3蛋白家族 | 第13页 |
| ·-3-3蛋白结构 | 第13-14页 |
| ·-3-3ZETA蛋白 | 第14-16页 |
| 14-3-3zeta与配体 | 第14-15页 |
| 14-3-3zeta与细胞凋亡 | 第15页 |
| 14-3-3zeta与疾病 | 第15-16页 |
| ·国内外14-3-3蛋白抗体的研究状况 | 第16页 |
| 国外状况 | 第16页 |
| 国内状况 | 第16页 |
| ·-3-3ZETA抗体制备的目的和意义 | 第16-18页 |
| 第2章 14-3-3zeta多肽抗原的设计 | 第18-25页 |
| ·多肽抗原设计简介 | 第18页 |
| ·生物信息学在蛋白质分析中的运用 | 第18-19页 |
| ·-3-3ZETA蛋白的生物信息学分析 | 第19-22页 |
| 人14-3-3家族7个亚型序列的查找 | 第19-20页 |
| 14-3-3zeta蛋白的组成分析 | 第20页 |
| 14-3-3zeta蛋白疏水性的分析 | 第20页 |
| 14-3-3zeta蛋白免疫原性的分析 | 第20-21页 |
| 14-3-3蛋白家族同源性的分析 | 第21-22页 |
| ·-3-3ZETA多肽抗原的设计 | 第22-23页 |
| ·-3-3ZETA多肽抗原的合成与鉴定 | 第23-24页 |
| ·讨论与小结 | 第24-25页 |
| 第3章 14-3-3zeta天然抗原的制备 | 第25-40页 |
| ·实验材料 | 第25-29页 |
| ·-3-3ZETA重组抗原的分离纯化 | 第29-36页 |
| pDEST14-3-3zeta蛋白的诱导表达 | 第29页 |
| 14-3-3zeta蛋白的His-镍亲和层析 | 第29-33页 |
| 非变性梯度电泳浓缩与除盐 | 第33页 |
| 14-3-3zeta蛋白浓度的测定 | 第33-35页 |
| Quantity One凝胶电泳条带分析 | 第35-36页 |
| ·实验结果 | 第36-39页 |
| ·讨论与小结 | 第39-40页 |
| 第4章 兔抗14-3-3zeta多克隆抗体的制备 | 第40-48页 |
| ·实验材料与试剂 | 第40-41页 |
| ·-3-3ZETA兔多克隆抗体的制备 | 第41-46页 |
| 抗原的乳化 | 第41-42页 |
| 家兔免疫过程 | 第42-43页 |
| 家兔的取血 | 第43页 |
| 抗血清的分离 | 第43页 |
| 14-3-3zeta抗体的Western blot效价测定 | 第43-46页 |
| ·实验结果 | 第46-47页 |
| ·讨论与小结 | 第47-48页 |
| 第5章 14-3-3zeta抗体的特异性鉴定 | 第48-53页 |
| ·实验材料与试剂 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-52页 |
| 人14-3-3蛋白7个亚型的质粒转化 | 第48-49页 |
| 菌种的保存 | 第49页 |
| 14-3-3蛋白家族7个亚型的诱导表达及SDS-PAGE鉴定 | 第49页 |
| 14-3-3zeta抗体的特异性鉴定 | 第49-52页 |
| ·讨论与小结 | 第52-53页 |
| 第6章 抗14-3-3zeta多肽抗体的免疫细胞分析 | 第53-58页 |
| ·实验材料与试剂 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-56页 |
| 细胞冻存 | 第54-55页 |
| 质粒转染 | 第55-56页 |
| 荧光显微镜观察 | 第56页 |
| ·实验结果 | 第56-57页 |
| ·讨论与小结 | 第57-58页 |
| 全文总结 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 论文发表情况 | 第66页 |
