| 摘要 | 第1-6页 |
| Summary | 第6-12页 |
| 第一篇文献综述 | 第12-34页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 1 研究目的和意义 | 第12-13页 |
| 2 国内外研究现状 | 第13页 |
| 第一章干扰素的研究进展 | 第13-24页 |
| 1 干扰素的研究背景 | 第13-18页 |
| ·干扰素的发现 | 第13-14页 |
| ·干扰素的产生及其分类 | 第14页 |
| ·干扰素的分子结构和基因 | 第14-15页 |
| ·干扰素的基本特性和作用特点 | 第15-16页 |
| ·干扰素及其相应受体分布 | 第16页 |
| ·干扰素受体及信号传递途径 | 第16-18页 |
| 2 干扰素的生物学活性及其作用机制 | 第18-21页 |
| ·干扰素的抗病毒功能 | 第18-20页 |
| ·干扰素免疫调节作用 | 第20页 |
| ·干扰素的抗肿瘤作用 | 第20-21页 |
| 3 干扰素的临床应用 | 第21-23页 |
| ·治疗过敏性皮炎(AD) | 第21页 |
| ·治疗类风湿性关节炎(RA) | 第21页 |
| ·治疗哮喘 | 第21页 |
| ·抗肝纤维化 | 第21-22页 |
| ·干扰素的基因工程研究 | 第22-23页 |
| 4 猪干扰素-Γ的研究进展 | 第23-24页 |
| ·猪干扰素-Γ基因的结构 | 第23页 |
| ·猪干扰素-Γ的国内外研究进展 | 第23-24页 |
| 第二章IL-18 的研究概况 | 第24-29页 |
| 1 IL-18 的分布及分子结构 | 第24-25页 |
| 2 IL-18 受体 | 第25-26页 |
| 3 IL-18 信号转导途径研究 | 第26-27页 |
| ·IL-18 基因表达的调控 | 第26页 |
| ·IL-18 对IFN-Γ启动子的调节 | 第26-27页 |
| 4 IL-18 的生物学功能 | 第27-28页 |
| 5 IL-18 治疗疾病的潜力 | 第28-29页 |
| ·抗感染免疫 | 第28页 |
| ·抗肿瘤免疫 | 第28-29页 |
| 第三章利用哺乳动物细胞表达外源蛋白的研究进展 | 第29-34页 |
| 1 哺乳动物细胞宿主的选择 | 第29-30页 |
| 2 载体类型 | 第30页 |
| 3 载体元件 | 第30-31页 |
| 4 影响外源基因表达因素 | 第31-33页 |
| ·启动子和增强子 | 第31-32页 |
| ·多聚腺苷酸加尾信号 | 第32页 |
| ·插入序列(IVS) | 第32页 |
| ·外源基因 | 第32-33页 |
| 5 提高蛋白表达量的措施 | 第33-34页 |
| 第二篇 实验部分 | 第34-67页 |
| 第一章PIFN-Γ基因真核表达载体的构建、表达与活性分析 | 第34-53页 |
| 前言 | 第34页 |
| 1 实验材料与方法 | 第34-47页 |
| ·实验材料 | 第34-37页 |
| ·实验方法 | 第37-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-50页 |
| ·真核表达质粒的构建结果 | 第47页 |
| ·重组表达质粒转染BHK细胞阳性克隆的鉴定 | 第47页 |
| ·BHK细胞培养结果 | 第47-48页 |
| ·G418 对BHK 细胞最小致死量的测定结果 | 第48页 |
| ·荧光显微镜观察结果 | 第48页 |
| ·阳性克隆细胞RT-PCR 鉴定结果 | 第48-49页 |
| ·表达产物SDS－PAGE 鉴定结果 | 第49-50页 |
| ·表达产物WESTERN-BLOT 分析结果 | 第50页 |
| ·重组蛋白PIFN-Γ生物活性的检测结果 | 第50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 4 小结 | 第52-53页 |
| 第二章PIL-18 真核表达载体的构建、表达与活性分析 | 第53-60页 |
| 前言 | 第53页 |
| 1 实验材料和方法 | 第53-55页 |
| ·实验材料 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-57页 |
| ·真核表达质粒的构建结果 | 第55页 |
| ·重组表达质粒转染CHO-K1 细胞后，表达产物的鉴定 | 第55-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 4 小结 | 第59-60页 |
| 第三章重组PIL-18 稳定表达CHO-K1 细胞系的建立 | 第60-67页 |
| 前言 | 第60页 |
| 1 实验材料和方法 | 第60-61页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-63页 |
| ·亚克隆细胞在倒置荧光显微镜下观察结果 | 第61-62页 |
| ·阳性细胞克隆RT-PCR 鉴定 | 第62页 |
| ·表达产物的SDS－PAGE 电泳分析 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-66页 |
| 4 小结 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 附图 1 重组质粒 pEGFP-PIFN-γ测序图谱 | 第73-74页 |
| 附图 2 重组质粒 pEGFP-PIL-18 测序图谱 | 第74-75页 |
| 附图 3 pEGFP-N1 载体图谱 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76-77页 |
