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线虫中细胞分泌特性和蛋白质功能的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-15页
1 绪论第15-48页
   ·线虫的研究历史和进展第15-26页
     ·线虫和细胞凋亡的研究第17-19页
     ·线虫和RNA 干扰技术的研究第19-21页
     ·线虫和行为学研究第21-25页
     ·线虫研究领域丰富的共享资源第25-26页
   ·线虫的发育学和生理学特性第26-35页
     ·线虫的生长周期和细胞发育第26-32页
     ·线虫的生理结构第32-35页
   ·囊泡转运和分泌相关蛋白质的研究进展第35-47页
     ·介导胞内物质运输的转运囊泡第35-37页
     ·内质网和高尔基体之间的囊泡转运第37-39页
     ·与细胞分泌相关的重要蛋白质第39-44页
     ·分泌型囊泡的形成和胞吐的分子机制第44-47页
   ·本研究的主要内容第47-48页
2 实验原理与技术第48-55页
   ·绿色荧光蛋白标记技术第48-49页
   ·微分干涉相差显微镜的原理第49-50页
   ·电极压力抛光技术第50-52页
   ·全细胞膜片钳和膜电容检测技术第52-53页
   ·碳纤电极安培测量技术第53页
   ·光解释放技术第53-55页
3 线虫培养及其胚胎细胞的体外原代培养第55-70页
   ·前言第55-56页
   ·实验材料和方法第56-63页
     ·线虫食物的选择和制备第56-57页
     ·线虫的观察和挑取第57-58页
     ·线虫的平板培养第58页
     ·大规模液体培养第58-59页
     ·线虫的冻存和复苏第59-61页
     ·线虫胚胎细胞的体外原代培养第61-63页
     ·线虫成像系统第63页
   ·结果和讨论第63-69页
     ·线虫的观测和成像第63-67页
     ·胚胎细胞原代培养的条件控制第67-68页
     ·不同种类胚胎细胞的特征第68-69页
   ·本章小结第69-70页
4 线虫神经元5-HT 分泌特性的研究第70-86页
   ·背景第70-74页
     ·乙酰胆碱第70-71页
     ·GABA第71-72页
     ·多巴胺第72页
     ·5-羟色胺第72-74页
   ·实验材料和方法第74-76页
     ·虫系的选择第74页
     ·溶液及配置第74-75页
     ·神经细胞培养第75页
     ·膜片钳及碳纤电极记录第75页
     ·数据处理第75-76页
   ·实验结果第76-83页
     ·神经元在体成像和定位分析第76-78页
     ·NSM 神经元离子通道的电流特性第78-80页
     ·NSM 神经元囊泡分泌的膜电容变化第80-81页
     ·碳纤电极检测5-HT 分泌的特性研究第81-83页
   ·讨论第83-85页
   ·本章小结第85-86页
5 线虫高通量基因突变库的构建第86-102页
   ·前言第86-87页
   ·原理和方法第87-97页
     ·设备(耗材)和试剂第87-89页
     ·建库前的条件准备第89页
     ·突变库的构建步骤第89-92页
     ·突变库的DNA 制备第92-94页
     ·突变基因的筛选第94-96页
     ·突变虫系的复苏和鉴定第96-97页
   ·结果和讨论第97-101页
     ·突变库构建的质量控制第97-99页
     ·突变库的利用和保存第99-100页
     ·突变虫系的特征提取和分析第100-101页
   ·本章小结第101-102页
6 全文总结与展望第102-104页
致谢第104-106页
参考文献第106-115页
附录 攻读学位期间发表的论文目录第115页

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