| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-22页 |
| 1.植物类受体蛋白激酶的种类 | 第11页 |
| 2.植物类受体蛋白激酶的功能 | 第11-14页 |
| ·感受来自植物病原物的信号 | 第12页 |
| ·调控组织形成和器官发育 | 第12-13页 |
| ·调控植物的自交不亲和性 | 第13页 |
| ·其它信号的传递 | 第13-14页 |
| 3.水稻类受体蛋白激酶的克隆和功能研究 | 第14-15页 |
| 4.植物类受体蛋白激酶的结构和生化特性分析 | 第15-16页 |
| 5.植物蛋白激酶的磷酸化作用底物的研究 | 第16-20页 |
| ·激酶底物的筛选策略 | 第17-18页 |
| ·植物蛋白激酶底物的研究现状 | 第18-20页 |
| 6.植物蛋白激酶数据库 | 第20页 |
| 7.研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 第一章 水稻蛋白激酶的高通量克隆、表达及自我磷酸化活性研究 | 第22-44页 |
| ·材料和方法 | 第23-31页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| ·蛋白激酶基因的扩增 | 第24-26页 |
| ·酵母菌的转化 | 第26-27页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第27-28页 |
| ·融合蛋白质的诱导表达及其检测 | 第28-29页 |
| ·激酶自我磷酸化活性的测定 | 第29-30页 |
| ·近膜区结构域缺失的激酶编码区的克隆 | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-39页 |
| ·30个水稻蛋白激酶编码区的PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·筛选酵母阳性克隆 | 第32-33页 |
| ·27个激酶融合蛋白质的表达 | 第33-35页 |
| ·21个激酶融合蛋白质自我磷酸化活性分析 | 第35-36页 |
| ·近膜区结构域对激酶磷酸化活性的影响 | 第36-38页 |
| ·水稻蛋白激酶的功能注释 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-43页 |
| ·高通量克隆和表达水稻蛋白激酶体系的构建 | 第39-40页 |
| ·酿酒酵母表达激酶蛋白质的活性 | 第40-41页 |
| ·近膜区结构域对激酶活性的影响 | 第41-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 第二章 水稻抗稻瘟病蛋白激酶PI-D2磷酸化底物的筛选与鉴定 | 第44-65页 |
| ·材料与方法 | 第45-51页 |
| ·生物材料 | 第45页 |
| ·水稻cDNA文库中融合蛋白质的诱导和提取 | 第45-46页 |
| ·蛋白质膜的点制 | 第46页 |
| ·利用酿酒酵母表达水稻的蛋白激酶 | 第46页 |
| ·固相磷酸化(Solid phosphorylation) | 第46-47页 |
| ·候选底物编码序列的克隆 | 第47-49页 |
| ·候选底物蛋白质的诱导表达 | 第49-50页 |
| ·体外磷酸化分析 | 第50-51页 |
| ·利用水稻蛋白质芯片筛选激酶的底物 | 第51页 |
| ·结果与分析 | 第51-60页 |
| ·利用水稻cDNA表达文库筛选PI-D2的底物 | 第51-53页 |
| ·PIS1编码20S蛋白酶体的α5亚基 | 第53-55页 |
| ·PIS1基因的克隆 | 第55页 |
| ·在细菌中表达MBP-PIS1融合蛋白质 | 第55-56页 |
| ·PI-D2对PIS1的体外磷酸化验证 | 第56页 |
| ·在细菌中表达FLAG-HS1融合蛋白质 | 第56-58页 |
| ·PIB1融合蛋白质在细菌中的表达 | 第58页 |
| ·PI-D2对PIB1的体外磷酸化 | 第58-59页 |
| ·利用水稻蛋白质芯片初步筛选获得了可能的PI-D2的候选底物 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-64页 |
| ·固相磷酸化技术筛选激酶底物 | 第60-61页 |
| ·20S蛋白酶体的α亚基与抗病反应的关系 | 第61-62页 |
| ·PIB1可能是PI-D2激酶的底物 | 第62-63页 |
| ·利用蛋白质芯片技术筛选激酶的底物 | 第63-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-77页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第77-78页 |
| 作者简介 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 附 发表文章 | 第81-92页 |
