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青岚湖五种淡水蚌的群体遗传多样性及三角帆蚌微卫星DNA的分离

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略语表第11-12页
第1章 文献综述第12-26页
 1 淡水蚌概述第12-14页
   ·淡水蚌的主要生物学特征第12页
   ·鄱阳湖的淡水蚌第12-13页
   ·淡水蚌的生物多样性第13页
   ·淡水蚌研究现状第13-14页
 2 遗传多样性的检测方法及其在水产研究中的应用第14-18页
   ·形态学水平第14-15页
   ·染色体(细胞学)水平第15页
   ·同功酶水平第15页
   ·DNA水平第15-18页
     ·RFLP及其在水产研究中的应用第16页
     ·RAPD及其在水产研究中的应用第16-17页
     ·线粒体DNA及其在水产研究中的应用第17页
     ·AFLP及其在水产研究中的应用第17页
     ·SSR及其在水产研究中的应用第17-18页
     ·单核苷酸多态性技术第18页
 3 微卫星标记在水产动物中的应用前景第18-20页
   ·群体遗传变异分析第18-19页
   ·物种鉴定与亲缘关系研究第19页
   ·系统发育和进化研究第19页
   ·遗传图谱构建和基因定位第19-20页
   ·辅助育种第20页
   ·资源管理和保护第20页
 4 微卫星位点的筛选第20-24页
   ·从数据库中查找微卫星位点第21页
   ·从相近物种获得微卫星引物第21页
   ·从基因组DNA中筛选微卫星位点第21-24页
     ·杂交法富集微卫星第22-23页
     ·引物法富集微卫星第23页
     ·PIMA法第23-24页
 5 本研究的目的和意义第24-26页
第2章 青岚湖五种淡水蚌群体的微卫星DNA分析第26-55页
 1 材料和方法第26-34页
   ·样本采集第26页
   ·主要仪器及试剂第26-28页
     ·主要仪器第26页
     ·主要试剂第26-27页
     ·溶液的配制第27-28页
   ·基因组DNA的提取和检测第28-29页
   ·微卫星引物的筛选及PCR反应体系的优化第29-31页
     ·微卫星引物的来源第29页
     ·微卫星引物的筛选第29-30页
     ·PCR反应体系的优化第30-31页
   ·微卫星多态扩增及扩增产物检测第31页
   ·数据处理与分析第31-34页
     ·等位基因频率第32页
     ·遗传杂合度和平均遗传杂合度第32页
     ·多态信息含量第32页
     ·有效等位基因数第32-33页
     ·Hardy-Weinberg平衡检验第33页
     ·F-统计量第33页
     ·遗传距离第33-34页
     ·聚类分析第34页
 2 结果与分析第34-48页
   ·基因组DNA提取结果第34页
   ·微卫星引物筛选结果第34-36页
   ·PCR反应体系优化结果第36-37页
     ·模板DNA浓度的优化结果第36页
     ·dNTPs的优化结果第36页
     ·引物浓度的优化结果第36-37页
     ·Mg~(2+)浓度的优化结果第37页
     ·Taq DNA聚合酶浓度的优化结果第37页
     ·退火温度的优化第37页
   ·8个微卫星位点PCR扩增结果第37-40页
   ·五种蚌群体微卫星位点的多态性第40-48页
     ·等位基因和基因频率第40-43页
     ·各种群各位点的多态信息含量和杂和度第43-45页
     ·各种群各位点的Hardy-Weinberg平衡检验第45-46页
     ·微卫星位点的遗传分化第46-47页
     ·各个种群间的遗传距离第47页
     ·聚类分析第47-48页
 3 讨论第48-53页
   ·关于样本含量第48页
   ·关于固定组织基因组DNA的提取第48页
   ·影响PCR扩增及银染效果的主要因素第48-49页
     ·影响PCR扩增的因素第48-49页
     ·影响聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染检测效果的因素第49页
   ·关于“影子带”的问题第49-50页
   ·关于特异的微卫星位点第50页
   ·关于种群内和种群间遗传变异第50-52页
     ·等位基因和基因频率第50-51页
     ·杂合度和多态信息含量第51-52页
     ·Hardy-Weinberg平衡第52页
     ·遗传距离和聚类分析第52页
   ·微卫星在我国淡水蚌研究中的前景及对淡水蚌保护的建议第52-53页
 4 小结第53-55页
第3章 三角帆蚌微卫星DNA的分离第55-65页
 1 材料和方法第55-59页
   ·实验材料第55-56页
     ·样本采集第55页
     ·质粒和菌株第55-56页
     ·引物第56页
   ·实验仪器和药品第56-57页
     ·实验仪器第56页
     ·主要药品和试剂第56-57页
     ·主要溶液的配制第57页
   ·小片段基因组文库的构建第57-58页
     ·基因组DNA的提取第57页
     ·小片段基因组DNA的获得和纯化第57页
     ·质粒DNA的提取和酶切第57-58页
     ·连接第58页
     ·转化第58页
   ·PCR扩增筛选含有微卫星序列的阳性克隆第58页
   ·含微卫星序列的阳性克隆DNA序列测定第58页
   ·DNA序列分析第58-59页
 2 实验结果第59-63页
   ·三角帆蚌基因组DNA的提取结果第59页
   ·三角帆蚌基因组DNA酶切结果第59页
   ·质粒DNA提取和酶切结果第59-60页
   ·PCR法筛选阳性克隆的结果第60-61页
   ·DNA测序结果第61-63页
 3 讨论第63-64页
   ·微卫星标记分离方法的选择第63页
   ·关于酶切基因组DNA的回收和纯化第63页
   ·关于重组阳性克隆的PCR筛选第63页
   ·关于三角帆蚌微卫星序列的类型第63-64页
 4 小结第64-65页
参考文献第65-73页
致谢第73页

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