| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 拟南芥、荠菜简介 | 第13页 |
| 2 花器官发育的研究动态 | 第13-22页 |
| ·花发育概述 | 第13-14页 |
| ·花器官原基的形成 | 第14-16页 |
| ·成花同源异型基因的特点 | 第16-17页 |
| ·MADS-box蛋白质的特点及其功能 | 第17-19页 |
| ·MADS-Box基因在果实发育、成熟过程中的作用 | 第19-22页 |
| 3 花器发育的相关基因 | 第22-24页 |
| ·控制拟南芥心皮发育的相关基因 | 第23-24页 |
| 4 本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
| 第二章 拟南芥、荠菜心皮发育基因CRABS CLAW(CRC)cDNA的克隆及序列分析 | 第25-41页 |
| 1 材料与方法 | 第25-32页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株 | 第25页 |
| ·酶与试剂盒 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-32页 |
| ·拟南芥、荠菜RNA的提取及RNA质量检测 | 第25-27页 |
| ·用RT-PCR的方法获得拟南芥、荠菜CRABS CLAW基因 | 第27页 |
| ·拟南芥、荠菜CRABS CLAW(CRC)基因的PCR扩增 | 第27-29页 |
| ·切胶回收目的基因片段 | 第29-30页 |
| ·将回收的目的基因片段克隆到pMD18-T Vector上 | 第30页 |
| ·大肠杆菌CaCl_2法制备及转化感受态细胞 | 第30页 |
| ·目的基因的鉴定 | 第30-32页 |
| ·拟南芥、荠菜CRABS CLAW(CRC)基因序列的分析 | 第32页 |
| 2 实验结果与分析 | 第32-39页 |
| ·拟南芥、荠菜总RNA提取 | 第32页 |
| ·拟南芥、荠菜CRABS CLAW(CRC)基因的克隆 | 第32-34页 |
| ·序列分析 | 第34-39页 |
| ·拟南芥、荠菜CRABS CLAW(CRC)核苷酸的序列翻译 | 第34-35页 |
| ·CRABS CLAW(CRC)的BLAST结果 | 第35-36页 |
| ·拟南芥、荠菜CRABS CLAW(CRC)氨基酸序列分析 | 第36-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| ·目的基因的获得 | 第39-40页 |
| ·核酸序列、蛋白质序列的对比 | 第40-41页 |
| 第三章 拟南芥愈伤组织的诱导及植株再生体系的建立 | 第41-49页 |
| 1 材料与方法 | 第41-43页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·试剂与培养基 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·外植体消毒与接种 | 第41-42页 |
| ·拟南芥无菌苗的生长 | 第42页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第42页 |
| ·继代培养 | 第42页 |
| ·芽的诱导分化 | 第42页 |
| ·根的诱导分化 | 第42页 |
| ·培养温度 | 第42页 |
| ·光照 | 第42-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-46页 |
| ·不同激素组合培养基对拟南芥无菌苗生长的影响 | 第43页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第43-44页 |
| ·愈伤组织继代培养 | 第44-45页 |
| ·芽的诱导分化 | 第45页 |
| ·根的诱导分化 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| ·赤霉素对拟南芥无菌苗生长的作用 | 第46页 |
| ·外植体的选择 | 第46-47页 |
| ·诱导根的分化时培养基的选择 | 第47页 |
| ·植株的再分化能力 | 第47-49页 |
| 第四章 拟南芥、荠菜CRABS CLAW基因cDNA表达载体的构建及交互转化 | 第49-68页 |
| 1 材料与方法 | 第49-55页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·菌株与质粒 | 第49页 |
| ·植物材料与培养基 | 第49-50页 |
| ·酶与试剂盒 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-55页 |
| ·植物表达载体pWM-atCRC、pWM-cbCRC的构建及检测 | 第50-52页 |
| ·表达载体pWM-atCRC、pWM-cbCRC转化根癌农杆菌 | 第52-53页 |
| ·拟南芥、荠菜交互转化 | 第53-54页 |
| ·转基因拟南芥、荠菜的PCR检测 | 第54-55页 |
| ·转基因拟南芥、荠菜的形态检测 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-64页 |
| ·植物表达载体pWM-atCRC、pWM-cbCRC的构建流程 | 第56页 |
| ·表达载体pWM-atCRC、pWM-cbCRC的菌落PCR和酶切检测 | 第56-57页 |
| ·表达载体pWM-atCRC、pWM-cbCRC转化农杆菌LBA4404及检测 | 第57-58页 |
| ·浸渍法、滴注法转化拟南芥、荠菜 | 第58-63页 |
| ·浸渍法转化荠菜结果 | 第58-59页 |
| ·滴注法转化拟南芥结果 | 第59-60页 |
| ·共培法转化拟南芥愈伤结果 | 第60-63页 |
| ·转基因拟南芥、荠菜的PCR检测 | 第63-64页 |
| ·Hyg~r基因PCR检测结果 | 第63页 |
| ·CRC基因PCR检测结果 | 第63-64页 |
| 3 讨论 | 第64-68页 |
| ·CRC基因的转化结果 | 第64-65页 |
| ·拟南芥愈伤与工程农杆菌共培转化效果分析 | 第65-66页 |
| ·工程农杆菌介导转化拟南芥、荠菜的方法摸索 | 第66页 |
| ·几种转化方法的比较 | 第66-68页 |
| 第五章 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 附录A 拟南芥CRC基因测序报告 | 第74-75页 |
| 附录B 荠菜CRC基因测序报告 | 第75-77页 |
| 附录C CRC基因登陆GenBank | 第77-79页 |
| 附录D 附缩略词表 | 第79-80页 |
| 附录E 主要试剂配置 | 第80-82页 |
| 附录F 载体图谱 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 作者简历 | 第84页 |
