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ER亚型和ProTα在胃腺癌中的作用及机制研究

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
引言第15-17页
1 文献综述第17-33页
   ·雌激素受体亚型与相关肿瘤研究进展第17-28页
     ·ER的生物学特性第17-19页
     ·ERs与乳腺癌第19-21页
     ·ERs与子宫内膜癌第21-23页
     ·ERs与卵巢癌第23-24页
     ·ERs与宫颈癌第24页
     ·ERs与前列腺癌第24-25页
     ·ERs与大肠癌第25-26页
     ·ERs与胃癌第26-27页
     ·ERs与其它肿瘤第27-28页
   ·胸腺素α原与肿瘤关系的研究进展第28-33页
     ·ProTα与肿瘤的关系及可能的作用机制第28-31页
     ·ProTα作为肿瘤标记物第31-32页
     ·ProTα在肿瘤诊断和治疗中应用前景第32-33页
2 ERα、ERβ和ProTα在人胃腺癌组织中的表达及其与临床病理的关系第33-48页
   ·实验材料第34-36页
     ·临床标本第34-35页
     ·主要试剂及配制第35-36页
     ·主要仪器第36页
   ·实验方法第36-39页
     ·染色前处理第36-37页
     ·免疫组织化学染色第37-38页
     ·染色结果判定第38页
     ·统计学分析第38-39页
   ·实验结果第39-44页
     ·ERα蛋白在胃癌中的表达第39页
     ·ERβ蛋白在良恶性胃组织中的表达第39-41页
     ·ProTα蛋白在良恶性胃组织中的表达第41-42页
     ·ERα、ERβ和ProTα蛋白表达与胃腺癌临床病理特征的相关性第42页
     ·ERβ和ProTα蛋白表达水平的定量分析及其与胃腺癌临床病理参数的相关性第42-44页
   ·讨论第44-47页
   ·小结第47-48页
3 ERα和ERβ mRNA在人胃腺癌中的表达第48-55页
   ·实验材料第48-49页
     ·人胃癌组织标本第48页
     ·主要试剂及配制第48-49页
     ·主要仪器第49页
   ·实验方法第49-52页
     ·提取RNA所用器皿及试剂的预处理第49页
     ·标本总RNA的提取及鉴定第49-50页
     ·RT-PCR分析ERα和ERβ mRNA第50-52页
     ·统计学分析第52页
   ·实验结果第52-53页
     ·ERα和ERβmRNA在胃癌和癌旁组织中的表达第52页
     ·ERα和ERβmRNA表达与胃癌病理参数的相关性第52-53页
     ·胃癌和癌旁胃粘膜组织中ERα和ERβmRNA的定量分析第53页
   ·讨论第53-54页
   ·小结第54-55页
4 17β-雌二醇和三苯氧胺对人胃腺癌细胞的生长和ProTα转录的影响第55-69页
   ·实验材料及设备第55-57页
     ·细胞系第55页
     ·试剂第55-56页
     ·溶液配制第56页
     ·仪器第56-57页
   ·实验方法第57-60页
     ·细胞培养条件第57-58页
     ·RT-PCR分析ERα和ERβ第58-59页
     ·ICC检测ERα和ERβ第59页
     ·E_2和TAM处理和细胞存活率分析第59-60页
     ·凋亡细胞的细胞核形态学变化第60页
     ·统计学分析第60页
   ·实验结果第60-65页
     ·ERα和ERβ在SGC-7901和BGC-823细胞表达第60-61页
     ·E_2和TAM处理对SGC-7901和BGC-823细胞生长的影响第61-63页
     ·E_2和TAM对SGC-7901和BGC-823细胞的形态学观察第63-64页
     ·E_2和TAM对BGC-823细胞ProTα mRNA水平的影响第64-65页
   ·讨论第65-68页
   ·小结第68-69页
5 反义人ProTα基因转染对胃癌细胞株BGC-823的影响第69-82页
   ·实验材料第69-71页
     ·细胞系及培养条件第69页
     ·主要试剂第69-70页
     ·主要仪器第70-71页
   ·实验方法第71-75页
     ·RT-PCR扩增目的DNA片段第71页
     ·PCR产物回收与纯化第71页
     ·PCR产物的TA克隆和重组质粒的转化第71-73页
     ·DNA序列分析第73页
     ·ProTα-AS-ODN转染第73-74页
     ·MTT法检测细胞存活率第74页
     ·细胞的形态学观察第74页
     ·转染细胞中ProTα基因mRNA的半定量检测第74页
     ·ICC检测ProTα第74-75页
     ·统计学分析第75页
   ·实验结果第75-79页
     ·RT-PCR检测ProTα在BGC-823细胞的表达第75页
     ·ProTα-AS-ODN对BGC-823细胞的作用第75-77页
     ·RT-PCR方法检测转染组反义ProTα基因的表达第77-78页
     ·免疫细胞化学检测ProTα蛋白表达结果第78-79页
   ·讨论第79-81页
     ·转染方法的选择第79-80页
     ·转染细胞的检测第80-81页
   ·小结第81-82页
6 结论与展望第82-85页
   ·主要结论第82-83页
   ·创新点摘要第83页
   ·有待于进一步完成的工作与前景展望第83-85页
参考文献第85-98页
附录I 缩略语第98-99页
附录II 人ProTα基因cDNA测序结果第99-100页
攻读博士学位期间发表学术论文情况第100-101页
致谢第101-103页

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