| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 文献综述 | 第13-54页 |
| 第一章 胚胎干细胞研究的历史回顾 | 第14-30页 |
| ·畸胎瘤干细胞（Embryonic carcinoma cells, ECCs） | 第14-15页 |
| ·胚胎干细胞(Embryonic stem cells, ESCs) | 第15-22页 |
| ·小鼠胚胎干细胞 | 第15-17页 |
| ·灵长类和人的胚胎干细胞 | 第17-19页 |
| ·动物胚胎干细胞 | 第19-22页 |
| ·胚胎生殖细胞（Embryonic germ cells, EGCs） | 第22-25页 |
| ·小鼠胚胎生殖细胞 | 第22-23页 |
| ·人类胚胎生殖细胞 | 第23-24页 |
| ·动物胚胎生殖细胞 | 第24-25页 |
| ·国内胚胎干细胞的研究现状 | 第25-30页 |
| ·小鼠胚胎干细胞 | 第26页 |
| ·小鼠胚胎生殖细胞 | 第26-27页 |
| ·人胚胎干细胞 | 第27页 |
| ·人胚胎生殖细胞 | 第27-28页 |
| ·动物胚胎干细胞与胚胎生殖细胞 | 第28-30页 |
| 第二章 小鼠胚胎干细胞的生物学特性 | 第30-39页 |
| ·胚胎干细胞细胞生物学特性及其鉴定方法 | 第30-36页 |
| ·生长及形态特性 | 第30页 |
| ·核型维持及其分析方法 | 第30页 |
| ·酶活性：碱性磷酸酶和端粒酶 | 第30-31页 |
| ·细胞表面抗原标志 | 第31-32页 |
| ·多分化潜能性 | 第32-35页 |
| ·种系传递能力 | 第35-36页 |
| ·胚胎干细胞分子生物学特性 | 第36-39页 |
| ·胚胎干细胞多分化潜能性的标志基因 | 第36-37页 |
| ·胚胎干细胞分化涉及的胚层标志基因 | 第37-39页 |
| 第三章 小鼠胚胎干细胞建系技术体系和措施 | 第39-49页 |
| ·胚胎干细胞建系途径 | 第39-41页 |
| ·体内或体外受精胚胎 | 第39页 |
| ·核移植重构胚胎 | 第39页 |
| ·孤雌胚胎 | 第39-40页 |
| ·终止妊娠早期胎儿 | 第40页 |
| ·其它途径 | 第40-41页 |
| ·胚胎干细胞建系的材料与分离方法 | 第41-42页 |
| ·胚胎发育阶段的选择 | 第41页 |
| ·卵裂球和内细胞团细胞的分离方法 | 第41-42页 |
| ·内细胞团或早期胚胎干细胞的离散方法 | 第42页 |
| ·胚胎干细胞的培养体系 | 第42-45页 |
| ·饲养层培养体系 | 第42-43页 |
| ·无饲养层培养体系 | 第43页 |
| ·胚胎干细胞的培养液组成及类型 | 第43-45页 |
| ·胚胎干细胞传代、冻存与解冻 | 第45页 |
| ·提高小鼠胚胎干细胞建系效率的技术措施 | 第45-49页 |
| ·不同品系小鼠胚胎干细胞建系效率的差异 | 第45-46页 |
| ·胚胎干细胞技术体系的优化措施 | 第46-49页 |
| 第四章 胚胎干细胞科学价值与应用前景 | 第49-54页 |
| ·胚胎干细胞是体外研究发育生物学的良好模型 | 第49页 |
| ·胚胎干细胞是研究基因表达、调控与功能的良好细胞模型 | 第49-50页 |
| ·胚胎干细胞是生产克隆动物和转基因动物的前体材料 | 第50-51页 |
| ·胚胎干细胞是进行细胞和基因治疗的最适合材料 | 第51-52页 |
| ·胚胎干细胞为新型药物开发与评价策略提供细胞来源 | 第52页 |
| ·小鼠胚胎干细胞建系面临的问题 | 第52-54页 |
| 试验研究 | 第54-109页 |
| 第五章 小鼠胎儿成纤维细胞分离及其饲养层的优化 | 第54-63页 |
| ·材料和方法 | 第54-58页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第54-55页 |
| ·方法 | 第55-58页 |
| ·结果 | 第58-60页 |
| ·丝裂霉素C 处理时间对MEF 活力的影响 | 第58页 |
| ·细胞接种量对MEF 活力的影响 | 第58-59页 |
| ·血清浓度对MEF 活力的影响 | 第59-60页 |
| ·传代次数对MEF 其活力的影响 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| ·丝裂霉素C 处理时间对MEF 活力的影响 | 第60-61页 |
| ·细胞接种量对丝裂酶素C 处理后MEF 活力的影响 | 第61页 |
| ·血清浓度对丝裂酶素C 处理后MEF 活力的影响 | 第61页 |
| ·传代次数对丝裂酶素C 处理后MEF 活力的影响 | 第61页 |
| ·小结 | 第61-63页 |
| 第六章 昆明小鼠胚胎干细胞分离培养影响因素的研究 | 第63-73页 |
| ·材料与方法 | 第63-66页 |
| ·实验材料、试剂和仪器 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64-66页 |
| ·ESCs 的鉴定 | 第66页 |
| ·数据统计 | 第66页 |
| ·结果 | 第66-69页 |
| ·不同培养液对胚胎贴壁和ICM 集落形成的影响 | 第66-68页 |
| ·不同培养液对ESCs 集落形成及其传代的影响 | 第68页 |
| ·不同消化液对ICM 细胞离散后ESCs 集落形成及其传代的影响 | 第68-69页 |
| ·昆明系mESCs 的鉴定 | 第69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·KSR 替代FBS 对ICM 集落形成及ESCs 培养的影响 | 第69-70页 |
| ·PD98059 对胚胎贴壁、ICM 集落形成及ESCs 维持培养的影响 | 第70页 |
| ·消化液对ESCs 集落形成及其传代的影响 | 第70-71页 |
| ·昆明系mESCs 的鉴定 | 第71页 |
| ·小结 | 第71-73页 |
| 第七章 129♂×KM♀杂交小鼠胚胎干细胞的分离鉴定 | 第73-94页 |
| ·材料与方法 | 第73-78页 |
| ·材料 | 第73-74页 |
| ·方法 | 第74-78页 |
| ·数据统计 | 第78页 |
| ·结果 | 第78-82页 |
| ·不同 KSR/FBS 比例对 129♂×KM♀杂交小鼠胚胎与 ICM 集落形成的影响 | 第78-79页 |
| ·不同KSR/FBS 比例对129♂×KM♀杂交小鼠ESCs 传代的影响 | 第79-80页 |
| ·不同 KSR/FBS 比例对 129♂×KM♀杂交小鼠 ESCs 单细胞克隆的影响 | 第80页 |
| ·129♂×KM♀杂交小鼠ESCs 的鉴定 | 第80-81页 |
| ·129♂×KM♀杂交小鼠ESCs 的多分化潜能性研究 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-86页 |
| ·不同培养液对129♂×KM♀杂交小鼠ESCs 分离培养的影响 | 第82-84页 |
| ·129♂×KM♀杂交小鼠ESCs 生物学特性 | 第84页 |
| ·ESCs 的多分化潜能性研究 | 第84-85页 |
| ·品系间杂交提高小鼠ESCs 的建系成功率 | 第85-86页 |
| ·小结 | 第86-94页 |
| 第八章 129♂×KM♀杂交小鼠孤雌胚胎干细胞分离鉴定 | 第94-109页 |
| ·材料与方法 | 第94-96页 |
| ·材料 | 第94-95页 |
| ·方法 | 第95-96页 |
| ·结果分析 | 第96页 |
| ·结果 | 第96-99页 |
| ·不同培养液对129♂×KM♀杂交小鼠孤雌胚胎ICM 集落形成的影响.. | 第96-97页 |
| ·不同培养液对129♂×KM♀杂交小鼠pESCs 克隆形成率的影响 | 第97-98页 |
| ·129♂×KM♀杂交小鼠pESCs 的鉴定 | 第98-99页 |
| ·129♂×KM♀杂交小鼠pESCs 的多分化潜能性研究 | 第99页 |
| ·讨论 | 第99-101页 |
| ·小结 | 第101-109页 |
| 结论 | 第109-111页 |
| 论文创新点及进一步研究的课题 | 第111-112页 |
| 1 论文创新点 | 第111页 |
| 2 进一步研究的课题 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-134页 |
| 致谢 | 第134-136页 |
| 个人简介 | 第136页 |
